李章勇+羅迪賢+林應(yīng)標(biāo)+顏復(fù)生

[摘要] 目的 探討CA7000血凝儀試劑盤(pán)上試劑使用時(shí)間對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響。 方法 將試劑放置CA7000血凝儀試劑盤(pán)上，之后在不同時(shí)間點(diǎn)（0 h、2 h、4 h、8 h、12 h、18 h、24 h、36 h）對(duì)同一混合血漿進(jìn)行凝血酶原時(shí)間（PT）、部分活化的凝血活酶時(shí)間（APTT）、凝血酶時(shí)間（TT）、纖維蛋白原（FIB）測(cè)定。 結(jié)果 測(cè)定結(jié)果顯示試劑放置試劑盤(pán)后8 h時(shí)的TT結(jié)果、12 h時(shí)的APTT結(jié)果、18 h時(shí)的FIB結(jié)果、36 h時(shí)的PT結(jié)果分別與0 h時(shí)的結(jié)果比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 在日常工作中，CA7000血凝儀試劑盤(pán)上放置試劑的穩(wěn)定時(shí)間不同，根據(jù)不同穩(wěn)定時(shí)間配置相應(yīng)的試劑用量，避免剩余試劑失效而造成浪費(fèi)。

[關(guān)鍵詞] CA7000血凝儀；凝血四項(xiàng)；穩(wěn)定時(shí)間

[中圖分類號(hào)] R446.1 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 1673-9701（2014）28-0054-03

隨著醫(yī)學(xué)科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，各種全自動(dòng)凝血儀和商品化試劑盒已廣泛應(yīng)用于臨床實(shí)驗(yàn)室。在日常工作中，我們發(fā)現(xiàn)同一標(biāo)本不同時(shí)間段測(cè)定結(jié)果差異較大[1]。經(jīng)分析可知，引起結(jié)果差異較大的因素較多，包括標(biāo)本的處理與保存、儀器的狀態(tài)、試劑的溶解與保存以及試劑的使用時(shí)間等[2，3]。其中，試劑開(kāi)蓋后的使用時(shí)間是影響檢驗(yàn)結(jié)果的重要因素之一。為了保證測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性，分析希森美康CA7000全自動(dòng)凝血儀試劑盤(pán)上凝血試劑使用時(shí)間對(duì)測(cè)定凝血四項(xiàng)（PT、APTT、TT、FIB）結(jié)果的影響，我們對(duì)其進(jìn)行探討，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器 CA7000 全自動(dòng)血凝儀，由日本Sysmex 公司生產(chǎn)。

1.1.2 試劑 PT試劑批號(hào)1008655；APTT試劑批號(hào)1006171；TT試劑批號(hào)1009181；FIB試劑批號(hào)1006081；以上試劑由上海長(zhǎng)島生物技術(shù)有限公司提供。配套質(zhì)控血漿由Sysmex 公司提供。

1.1.3 標(biāo)本篩選正常血漿標(biāo)本（排出藥物、肝素、DIC及有相關(guān)疾病的標(biāo)本，且避免溶血、脂血、黃疸），然后從每份標(biāo)本中吸取血漿混勻，制作混合血漿，分裝8份后于-20℃凍存[4]（確保血漿成分穩(wěn)定，每份不少于5 mL[5]）。

1.2 方法

試劑及質(zhì)控血漿按要求復(fù)溶，再把試劑放置儀器試劑倉(cāng)中，做好保養(yǎng)和質(zhì)控，保證儀器處于最佳狀態(tài)，每次檢測(cè)前先按要求復(fù)溶一份凍存標(biāo)本待檢。在擬訂的不同時(shí)間點(diǎn)（0 h、2 h、4 h、8 h、12 h、18 h、24 h、36 h）進(jìn)行凝血四項(xiàng)檢測(cè)，記錄測(cè)定結(jié)果。每一時(shí)間點(diǎn)測(cè)定一份標(biāo)本，重復(fù)測(cè)定8次，結(jié)果以（x±s）表示。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，不同時(shí)點(diǎn)重復(fù)計(jì)量資料采用方差分析，每一時(shí)間點(diǎn)測(cè)定結(jié)果與0 h的結(jié)果進(jìn)行配對(duì)t檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

試劑放置CA7000試劑盤(pán)上不同時(shí)間段（0 h、2 h、4 h、8 h、12 h、18 h、24 h、36 h）結(jié)果比較，見(jiàn)表1。

3 討論

凝血四項(xiàng)為臨床常用的指標(biāo)，用于術(shù)前篩查、出血疾病的診斷、抗凝藥物使用的檢測(cè)以及妊娠婦女分娩風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測(cè)[6]等，人體的止血功能很關(guān)鍵，每當(dāng)在人體受到意外情況受傷而流血時(shí)，止血功能就起到了非常關(guān)鍵的作用，使得血液能夠凝固從而及時(shí)堵住傷口使其不再繼續(xù)流血，減少了血量的過(guò)度流失[7]。如果患者的止血功能有欠缺，并且沒(méi)有能夠得到及時(shí)有效處理，就可能造成患者的生命危險(xiǎn)。

凝血試驗(yàn)所用試劑是根據(jù)不同反應(yīng)而加入不同的凝血因子，均為生物制劑，容易受環(huán)境因素影響而降低其生物活性，甚至因失去活性而喪失引起凝血反應(yīng)的能力[8]。影響凝血四項(xiàng)測(cè)定結(jié)果的因素很多，包括：儀器的精密度和重復(fù)性，試劑盒的配置和保存，樣本的采集、處理、保存與分離，藥物的干擾等[9]。相關(guān)研究也比較多，如標(biāo)本放置溫度[10，11]、試劑預(yù)熱時(shí)間[12，13]等研究。但關(guān)于開(kāi)蓋后試劑使用一段時(shí)間而影響穩(wěn)定性方面的研究比較少。在日常工作中，我們發(fā)現(xiàn)同一定值標(biāo)本不同時(shí)間段測(cè)定結(jié)果差異較大。雖然試劑說(shuō)明書(shū)中有試劑復(fù)溶后的密閉保存穩(wěn)定時(shí)間，但沒(méi)用試劑敞開(kāi)使用的穩(wěn)定時(shí)間，且各實(shí)驗(yàn)室的溫濕度和使用方式不盡相同，試劑開(kāi)蓋后的穩(wěn)定時(shí)間也會(huì)不同[14]。

本文通過(guò)對(duì)CA7000血凝儀試劑盤(pán)上試劑敞開(kāi)使用的穩(wěn)定時(shí)間進(jìn)行研究，從表1可以看出，凝血試劑敞開(kāi)使用8 h時(shí)的TT結(jié)果、12 h時(shí)的APTT結(jié)果、18 h時(shí)的FIB結(jié)果、36 h時(shí)的PT結(jié)果分別與0 h時(shí)的結(jié)果比較有顯著性差異（P<0.05）。結(jié)果表明，由于環(huán)境溫度、濕度的影響，試劑在CA7000試劑盤(pán)上敞開(kāi)使用的穩(wěn)定時(shí)間是不同的，PT、APTT、TT、FIB的穩(wěn)定時(shí)間分別是36 h、18 h、12 h、24 h，超過(guò)穩(wěn)定時(shí)間的試劑不能使用，否則誤導(dǎo)臨床。

通過(guò)本次實(shí)驗(yàn)，我們可以確定本室凝血試劑開(kāi)蓋后使用的穩(wěn)定時(shí)間，超過(guò)穩(wěn)定時(shí)間時(shí)應(yīng)更換新鮮試劑，保證檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠。同時(shí)，使用凝血試劑時(shí)要根據(jù)本室每天工作量選擇試劑包裝量大小，適量配制，既保證質(zhì)量，又避免試劑剩余浪費(fèi)。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 孫磊. 討論凝血四項(xiàng)標(biāo)本放置時(shí)間和溫度對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響[J]. 中國(guó)醫(yī)藥指南，2013，10（11）：267-268.

[2] 諸越瑾，張梅，聶渝瓊. 凝血實(shí)驗(yàn)檢測(cè)的影響因素探討[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2013，23（4）：903-904.

[3] 張志源. 凝血功能檢測(cè)影響因素的觀察[J]. 檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2012，19（8）：427-428.

[4] 戴慶忠，覃瑜. 影響凝血四項(xiàng)檢測(cè)的因素分析[J]. 國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2013，34（17）：2349-2350.

[5] 楊繼明，張愛(ài)華，肖中華，等. 標(biāo)本采集量對(duì)凝血項(xiàng)目檢測(cè)結(jié)果的影響[J]. 實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2011，15（1）：736-737.

[6] 楊海英，韓桂玲. 妊娠中晚期婦女凝血四項(xiàng)的監(jiān)測(cè)與分析[J]. 山西醫(yī)藥雜志，2012，41（10）：1049-1050.

[7] 趙晶，葛存興，張鳳俠. 孕婦臨產(chǎn)前（38周后）凝血四項(xiàng)檢查結(jié)果及分析[J]. 中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥，2010，5（3）：82.

[8] 張永愛(ài)，付林金. 凝血試驗(yàn)的室內(nèi)質(zhì)量控制[J]. 實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2011，32（2）：148-149.

[9] 馬海玲，劉方鶴，等. 凝血四項(xiàng)檢測(cè)應(yīng)注意的問(wèn)題[J]. 黑龍江醫(yī)藥，2012，25（2）：309-310.

[10] 申衛(wèi)和，黃倩. 凝血四項(xiàng)標(biāo)本室溫條件下不同時(shí)間檢測(cè)對(duì)結(jié)果的影響[J]. 海南醫(yī)學(xué)，2012，23（4）：87-88.

[11] 李濟(jì)凱，吳建平，徐根云. 標(biāo)本放置溫度及時(shí)間對(duì)PT、APTT檢測(cè)結(jié)果的影響[J]. 浙江檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2009，9（7）：22-24.

[12] Mischke R，Junker J，Deegen E. Sensitivity of commercial prothrombin time reagents to detect coagulation factor deficiencies in equine plasma[J]. The Veterinary Journal，2006，171（1）：69-70.

[13] 王潤(rùn)琴，李美英，楊海青. 25℃室溫下不同保存時(shí)間對(duì)凝血功能的影響[J]. 山西職工醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2011，21（1）：13-14.

[14] 劉志鋒，張耀輝，李雯麗. 標(biāo)本離心時(shí)間對(duì)凝血四項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果的影響[J]. 檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2013，10（12）：1535-1536.

（收稿日期：2014-05-16）endprint

[摘要] 目的 探討CA7000血凝儀試劑盤(pán)上試劑使用時(shí)間對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響。 方法 將試劑放置CA7000血凝儀試劑盤(pán)上，之后在不同時(shí)間點(diǎn)（0 h、2 h、4 h、8 h、12 h、18 h、24 h、36 h）對(duì)同一混合血漿進(jìn)行凝血酶原時(shí)間（PT）、部分活化的凝血活酶時(shí)間（APTT）、凝血酶時(shí)間（TT）、纖維蛋白原（FIB）測(cè)定。 結(jié)果 測(cè)定結(jié)果顯示試劑放置試劑盤(pán)后8 h時(shí)的TT結(jié)果、12 h時(shí)的APTT結(jié)果、18 h時(shí)的FIB結(jié)果、36 h時(shí)的PT結(jié)果分別與0 h時(shí)的結(jié)果比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 在日常工作中，CA7000血凝儀試劑盤(pán)上放置試劑的穩(wěn)定時(shí)間不同，根據(jù)不同穩(wěn)定時(shí)間配置相應(yīng)的試劑用量，避免剩余試劑失效而造成浪費(fèi)。

[關(guān)鍵詞] CA7000血凝儀；凝血四項(xiàng)；穩(wěn)定時(shí)間

[中圖分類號(hào)] R446.1 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 1673-9701（2014）28-0054-03

隨著醫(yī)學(xué)科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，各種全自動(dòng)凝血儀和商品化試劑盒已廣泛應(yīng)用于臨床實(shí)驗(yàn)室。在日常工作中，我們發(fā)現(xiàn)同一標(biāo)本不同時(shí)間段測(cè)定結(jié)果差異較大[1]。經(jīng)分析可知，引起結(jié)果差異較大的因素較多，包括標(biāo)本的處理與保存、儀器的狀態(tài)、試劑的溶解與保存以及試劑的使用時(shí)間等[2，3]。其中，試劑開(kāi)蓋后的使用時(shí)間是影響檢驗(yàn)結(jié)果的重要因素之一。為了保證測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性，分析希森美康CA7000全自動(dòng)凝血儀試劑盤(pán)上凝血試劑使用時(shí)間對(duì)測(cè)定凝血四項(xiàng)（PT、APTT、TT、FIB）結(jié)果的影響，我們對(duì)其進(jìn)行探討，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器 CA7000 全自動(dòng)血凝儀，由日本Sysmex 公司生產(chǎn)。

1.1.2 試劑 PT試劑批號(hào)1008655；APTT試劑批號(hào)1006171；TT試劑批號(hào)1009181；FIB試劑批號(hào)1006081；以上試劑由上海長(zhǎng)島生物技術(shù)有限公司提供。配套質(zhì)控血漿由Sysmex 公司提供。

1.1.3 標(biāo)本篩選正常血漿標(biāo)本（排出藥物、肝素、DIC及有相關(guān)疾病的標(biāo)本，且避免溶血、脂血、黃疸），然后從每份標(biāo)本中吸取血漿混勻，制作混合血漿，分裝8份后于-20℃凍存[4]（確保血漿成分穩(wěn)定，每份不少于5 mL[5]）。

1.2 方法

試劑及質(zhì)控血漿按要求復(fù)溶，再把試劑放置儀器試劑倉(cāng)中，做好保養(yǎng)和質(zhì)控，保證儀器處于最佳狀態(tài)，每次檢測(cè)前先按要求復(fù)溶一份凍存標(biāo)本待檢。在擬訂的不同時(shí)間點(diǎn)（0 h、2 h、4 h、8 h、12 h、18 h、24 h、36 h）進(jìn)行凝血四項(xiàng)檢測(cè)，記錄測(cè)定結(jié)果。每一時(shí)間點(diǎn)測(cè)定一份標(biāo)本，重復(fù)測(cè)定8次，結(jié)果以（x±s）表示。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，不同時(shí)點(diǎn)重復(fù)計(jì)量資料采用方差分析，每一時(shí)間點(diǎn)測(cè)定結(jié)果與0 h的結(jié)果進(jìn)行配對(duì)t檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

試劑放置CA7000試劑盤(pán)上不同時(shí)間段（0 h、2 h、4 h、8 h、12 h、18 h、24 h、36 h）結(jié)果比較，見(jiàn)表1。

3 討論

凝血四項(xiàng)為臨床常用的指標(biāo)，用于術(shù)前篩查、出血疾病的診斷、抗凝藥物使用的檢測(cè)以及妊娠婦女分娩風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測(cè)[6]等，人體的止血功能很關(guān)鍵，每當(dāng)在人體受到意外情況受傷而流血時(shí)，止血功能就起到了非常關(guān)鍵的作用，使得血液能夠凝固從而及時(shí)堵住傷口使其不再繼續(xù)流血，減少了血量的過(guò)度流失[7]。如果患者的止血功能有欠缺，并且沒(méi)有能夠得到及時(shí)有效處理，就可能造成患者的生命危險(xiǎn)。

凝血試驗(yàn)所用試劑是根據(jù)不同反應(yīng)而加入不同的凝血因子，均為生物制劑，容易受環(huán)境因素影響而降低其生物活性，甚至因失去活性而喪失引起凝血反應(yīng)的能力[8]。影響凝血四項(xiàng)測(cè)定結(jié)果的因素很多，包括：儀器的精密度和重復(fù)性，試劑盒的配置和保存，樣本的采集、處理、保存與分離，藥物的干擾等[9]。相關(guān)研究也比較多，如標(biāo)本放置溫度[10，11]、試劑預(yù)熱時(shí)間[12，13]等研究。但關(guān)于開(kāi)蓋后試劑使用一段時(shí)間而影響穩(wěn)定性方面的研究比較少。在日常工作中，我們發(fā)現(xiàn)同一定值標(biāo)本不同時(shí)間段測(cè)定結(jié)果差異較大。雖然試劑說(shuō)明書(shū)中有試劑復(fù)溶后的密閉保存穩(wěn)定時(shí)間，但沒(méi)用試劑敞開(kāi)使用的穩(wěn)定時(shí)間，且各實(shí)驗(yàn)室的溫濕度和使用方式不盡相同，試劑開(kāi)蓋后的穩(wěn)定時(shí)間也會(huì)不同[14]。

本文通過(guò)對(duì)CA7000血凝儀試劑盤(pán)上試劑敞開(kāi)使用的穩(wěn)定時(shí)間進(jìn)行研究，從表1可以看出，凝血試劑敞開(kāi)使用8 h時(shí)的TT結(jié)果、12 h時(shí)的APTT結(jié)果、18 h時(shí)的FIB結(jié)果、36 h時(shí)的PT結(jié)果分別與0 h時(shí)的結(jié)果比較有顯著性差異（P<0.05）。結(jié)果表明，由于環(huán)境溫度、濕度的影響，試劑在CA7000試劑盤(pán)上敞開(kāi)使用的穩(wěn)定時(shí)間是不同的，PT、APTT、TT、FIB的穩(wěn)定時(shí)間分別是36 h、18 h、12 h、24 h，超過(guò)穩(wěn)定時(shí)間的試劑不能使用，否則誤導(dǎo)臨床。

通過(guò)本次實(shí)驗(yàn)，我們可以確定本室凝血試劑開(kāi)蓋后使用的穩(wěn)定時(shí)間，超過(guò)穩(wěn)定時(shí)間時(shí)應(yīng)更換新鮮試劑，保證檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠。同時(shí)，使用凝血試劑時(shí)要根據(jù)本室每天工作量選擇試劑包裝量大小，適量配制，既保證質(zhì)量，又避免試劑剩余浪費(fèi)。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 孫磊. 討論凝血四項(xiàng)標(biāo)本放置時(shí)間和溫度對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響[J]. 中國(guó)醫(yī)藥指南，2013，10（11）：267-268.

[2] 諸越瑾，張梅，聶渝瓊. 凝血實(shí)驗(yàn)檢測(cè)的影響因素探討[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2013，23（4）：903-904.

[3] 張志源. 凝血功能檢測(cè)影響因素的觀察[J]. 檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2012，19（8）：427-428.

[4] 戴慶忠，覃瑜. 影響凝血四項(xiàng)檢測(cè)的因素分析[J]. 國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2013，34（17）：2349-2350.

[5] 楊繼明，張愛(ài)華，肖中華，等. 標(biāo)本采集量對(duì)凝血項(xiàng)目檢測(cè)結(jié)果的影響[J]. 實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2011，15（1）：736-737.

[6] 楊海英，韓桂玲. 妊娠中晚期婦女凝血四項(xiàng)的監(jiān)測(cè)與分析[J]. 山西醫(yī)藥雜志，2012，41（10）：1049-1050.

[7] 趙晶，葛存興，張鳳俠. 孕婦臨產(chǎn)前（38周后）凝血四項(xiàng)檢查結(jié)果及分析[J]. 中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥，2010，5（3）：82.

[8] 張永愛(ài)，付林金. 凝血試驗(yàn)的室內(nèi)質(zhì)量控制[J]. 實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2011，32（2）：148-149.

[9] 馬海玲，劉方鶴，等. 凝血四項(xiàng)檢測(cè)應(yīng)注意的問(wèn)題[J]. 黑龍江醫(yī)藥，2012，25（2）：309-310.

[10] 申衛(wèi)和，黃倩. 凝血四項(xiàng)標(biāo)本室溫條件下不同時(shí)間檢測(cè)對(duì)結(jié)果的影響[J]. 海南醫(yī)學(xué)，2012，23（4）：87-88.

[11] 李濟(jì)凱，吳建平，徐根云. 標(biāo)本放置溫度及時(shí)間對(duì)PT、APTT檢測(cè)結(jié)果的影響[J]. 浙江檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2009，9（7）：22-24.

[12] Mischke R，Junker J，Deegen E. Sensitivity of commercial prothrombin time reagents to detect coagulation factor deficiencies in equine plasma[J]. The Veterinary Journal，2006，171（1）：69-70.

[13] 王潤(rùn)琴，李美英，楊海青. 25℃室溫下不同保存時(shí)間對(duì)凝血功能的影響[J]. 山西職工醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2011，21（1）：13-14.

[14] 劉志鋒，張耀輝，李雯麗. 標(biāo)本離心時(shí)間對(duì)凝血四項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果的影響[J]. 檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2013，10（12）：1535-1536.

（收稿日期：2014-05-16）endprint

[摘要] 目的 探討CA7000血凝儀試劑盤(pán)上試劑使用時(shí)間對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響。 方法 將試劑放置CA7000血凝儀試劑盤(pán)上，之后在不同時(shí)間點(diǎn)（0 h、2 h、4 h、8 h、12 h、18 h、24 h、36 h）對(duì)同一混合血漿進(jìn)行凝血酶原時(shí)間（PT）、部分活化的凝血活酶時(shí)間（APTT）、凝血酶時(shí)間（TT）、纖維蛋白原（FIB）測(cè)定。 結(jié)果 測(cè)定結(jié)果顯示試劑放置試劑盤(pán)后8 h時(shí)的TT結(jié)果、12 h時(shí)的APTT結(jié)果、18 h時(shí)的FIB結(jié)果、36 h時(shí)的PT結(jié)果分別與0 h時(shí)的結(jié)果比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 在日常工作中，CA7000血凝儀試劑盤(pán)上放置試劑的穩(wěn)定時(shí)間不同，根據(jù)不同穩(wěn)定時(shí)間配置相應(yīng)的試劑用量，避免剩余試劑失效而造成浪費(fèi)。

[關(guān)鍵詞] CA7000血凝儀；凝血四項(xiàng)；穩(wěn)定時(shí)間

[中圖分類號(hào)] R446.1 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 1673-9701（2014）28-0054-03

隨著醫(yī)學(xué)科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，各種全自動(dòng)凝血儀和商品化試劑盒已廣泛應(yīng)用于臨床實(shí)驗(yàn)室。在日常工作中，我們發(fā)現(xiàn)同一標(biāo)本不同時(shí)間段測(cè)定結(jié)果差異較大[1]。經(jīng)分析可知，引起結(jié)果差異較大的因素較多，包括標(biāo)本的處理與保存、儀器的狀態(tài)、試劑的溶解與保存以及試劑的使用時(shí)間等[2，3]。其中，試劑開(kāi)蓋后的使用時(shí)間是影響檢驗(yàn)結(jié)果的重要因素之一。為了保證測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性，分析希森美康CA7000全自動(dòng)凝血儀試劑盤(pán)上凝血試劑使用時(shí)間對(duì)測(cè)定凝血四項(xiàng)（PT、APTT、TT、FIB）結(jié)果的影響，我們對(duì)其進(jìn)行探討，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器 CA7000 全自動(dòng)血凝儀，由日本Sysmex 公司生產(chǎn)。

1.1.2 試劑 PT試劑批號(hào)1008655；APTT試劑批號(hào)1006171；TT試劑批號(hào)1009181；FIB試劑批號(hào)1006081；以上試劑由上海長(zhǎng)島生物技術(shù)有限公司提供。配套質(zhì)控血漿由Sysmex 公司提供。

1.1.3 標(biāo)本篩選正常血漿標(biāo)本（排出藥物、肝素、DIC及有相關(guān)疾病的標(biāo)本，且避免溶血、脂血、黃疸），然后從每份標(biāo)本中吸取血漿混勻，制作混合血漿，分裝8份后于-20℃凍存[4]（確保血漿成分穩(wěn)定，每份不少于5 mL[5]）。

1.2 方法

試劑及質(zhì)控血漿按要求復(fù)溶，再把試劑放置儀器試劑倉(cāng)中，做好保養(yǎng)和質(zhì)控，保證儀器處于最佳狀態(tài)，每次檢測(cè)前先按要求復(fù)溶一份凍存標(biāo)本待檢。在擬訂的不同時(shí)間點(diǎn)（0 h、2 h、4 h、8 h、12 h、18 h、24 h、36 h）進(jìn)行凝血四項(xiàng)檢測(cè)，記錄測(cè)定結(jié)果。每一時(shí)間點(diǎn)測(cè)定一份標(biāo)本，重復(fù)測(cè)定8次，結(jié)果以（x±s）表示。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，不同時(shí)點(diǎn)重復(fù)計(jì)量資料采用方差分析，每一時(shí)間點(diǎn)測(cè)定結(jié)果與0 h的結(jié)果進(jìn)行配對(duì)t檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

試劑放置CA7000試劑盤(pán)上不同時(shí)間段（0 h、2 h、4 h、8 h、12 h、18 h、24 h、36 h）結(jié)果比較，見(jiàn)表1。

3 討論

凝血四項(xiàng)為臨床常用的指標(biāo)，用于術(shù)前篩查、出血疾病的診斷、抗凝藥物使用的檢測(cè)以及妊娠婦女分娩風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測(cè)[6]等，人體的止血功能很關(guān)鍵，每當(dāng)在人體受到意外情況受傷而流血時(shí)，止血功能就起到了非常關(guān)鍵的作用，使得血液能夠凝固從而及時(shí)堵住傷口使其不再繼續(xù)流血，減少了血量的過(guò)度流失[7]。如果患者的止血功能有欠缺，并且沒(méi)有能夠得到及時(shí)有效處理，就可能造成患者的生命危險(xiǎn)。

凝血試驗(yàn)所用試劑是根據(jù)不同反應(yīng)而加入不同的凝血因子，均為生物制劑，容易受環(huán)境因素影響而降低其生物活性，甚至因失去活性而喪失引起凝血反應(yīng)的能力[8]。影響凝血四項(xiàng)測(cè)定結(jié)果的因素很多，包括：儀器的精密度和重復(fù)性，試劑盒的配置和保存，樣本的采集、處理、保存與分離，藥物的干擾等[9]。相關(guān)研究也比較多，如標(biāo)本放置溫度[10，11]、試劑預(yù)熱時(shí)間[12，13]等研究。但關(guān)于開(kāi)蓋后試劑使用一段時(shí)間而影響穩(wěn)定性方面的研究比較少。在日常工作中，我們發(fā)現(xiàn)同一定值標(biāo)本不同時(shí)間段測(cè)定結(jié)果差異較大。雖然試劑說(shuō)明書(shū)中有試劑復(fù)溶后的密閉保存穩(wěn)定時(shí)間，但沒(méi)用試劑敞開(kāi)使用的穩(wěn)定時(shí)間，且各實(shí)驗(yàn)室的溫濕度和使用方式不盡相同，試劑開(kāi)蓋后的穩(wěn)定時(shí)間也會(huì)不同[14]。

本文通過(guò)對(duì)CA7000血凝儀試劑盤(pán)上試劑敞開(kāi)使用的穩(wěn)定時(shí)間進(jìn)行研究，從表1可以看出，凝血試劑敞開(kāi)使用8 h時(shí)的TT結(jié)果、12 h時(shí)的APTT結(jié)果、18 h時(shí)的FIB結(jié)果、36 h時(shí)的PT結(jié)果分別與0 h時(shí)的結(jié)果比較有顯著性差異（P<0.05）。結(jié)果表明，由于環(huán)境溫度、濕度的影響，試劑在CA7000試劑盤(pán)上敞開(kāi)使用的穩(wěn)定時(shí)間是不同的，PT、APTT、TT、FIB的穩(wěn)定時(shí)間分別是36 h、18 h、12 h、24 h，超過(guò)穩(wěn)定時(shí)間的試劑不能使用，否則誤導(dǎo)臨床。

通過(guò)本次實(shí)驗(yàn)，我們可以確定本室凝血試劑開(kāi)蓋后使用的穩(wěn)定時(shí)間，超過(guò)穩(wěn)定時(shí)間時(shí)應(yīng)更換新鮮試劑，保證檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠。同時(shí)，使用凝血試劑時(shí)要根據(jù)本室每天工作量選擇試劑包裝量大小，適量配制，既保證質(zhì)量，又避免試劑剩余浪費(fèi)。

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