王躍斌,胡則輝,朱云海,柴學(xué)軍
(浙江省海洋水產(chǎn)研究所,浙江省海水增養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,農(nóng)業(yè)部重點(diǎn)漁場(chǎng)漁業(yè)資源科學(xué)觀測(cè)實(shí)驗(yàn)站,浙江舟山 316021)
鹽度對(duì)日本黃姑魚(yú)生長(zhǎng)及非特異性免疫的影響
王躍斌,胡則輝,朱云海,柴學(xué)軍
(浙江省海洋水產(chǎn)研究所,浙江省海水增養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,農(nóng)業(yè)部重點(diǎn)漁場(chǎng)漁業(yè)資源科學(xué)觀測(cè)實(shí)驗(yàn)站,浙江舟山 316021)
以初始體重8.36±0.85 g的日本黃姑魚(yú)為研究對(duì)象,進(jìn)行為期30 d的養(yǎng)殖試驗(yàn),研究不同鹽度(分別為鹽度0、6、12、18、24及30)對(duì)日本黃姑魚(yú)生長(zhǎng)、存活和非特異性免疫的影響。結(jié)果顯示,鹽度0組日本黃姑魚(yú)從第7天開(kāi)始停止攝食并出現(xiàn)死亡,至第10天時(shí)死亡率達(dá)100%,其余各鹽度組日本黃姑魚(yú)生長(zhǎng)良好,均無(wú)死亡。試驗(yàn)結(jié)束后,鹽度24組日本黃姑魚(yú)的體重及特定生長(zhǎng)率最高,顯著高于鹽度6、12和18組(P〈0.05),但與鹽度30組無(wú)顯著差異(P〉0.05);鹽度6組日本黃姑魚(yú)體重及特定生長(zhǎng)率均最低但與鹽度12、18組無(wú)顯著差異(P〉0.05)。試驗(yàn)結(jié)束后,對(duì)各鹽度組日本黃姑魚(yú)的腎臟、肝臟、肌肉及鰓中超氧化物歧化酶(SOD)、過(guò)氧化氫酶(CAT)、堿性磷酸酶(AKP)和酸性磷酸酶(ACP)進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果顯示,鹽度24組日本黃姑魚(yú)的腎臟AKP活力顯著低于鹽度6及18組(P〈0.05),但與鹽度12及30組差異不顯著(P〉0.05);其它各組織中SOD、CAT、AKP和ACP活力在不同鹽度下均未發(fā)現(xiàn)有顯著差異(P〉0.05)。結(jié)果表明,日本黃姑魚(yú)對(duì)低鹽度的耐受力較強(qiáng),在鹽度6的條件下經(jīng)過(guò)一段時(shí)間的適應(yīng)后可以正常生長(zhǎng)存活,其適宜的鹽度范圍為18~30。
日本黃姑魚(yú);鹽度;生長(zhǎng);非特異性免疫
日本黃姑魚(yú)Nibea japonica屬鱸形目Perciformes、石首魚(yú)科Sciaenidae、黃姑魚(yú)屬Nibea,俗稱黑毛鲿,分布于我國(guó)東海、南海以及日本南部海域,為廣鹽、暖水性大型肉食性魚(yú)類[1],是一種生長(zhǎng)速度快、抗病能力強(qiáng),適合近海網(wǎng)箱養(yǎng)殖和池塘養(yǎng)殖的優(yōu)良品種。目前國(guó)內(nèi)外對(duì)日本黃姑魚(yú)的研究主要集中在苗種繁育、養(yǎng)殖試驗(yàn)、能量代謝和分子生物學(xué)等方面[2-5],在基礎(chǔ)生物學(xué)方面的研究較少[6]。
鹽度是影響魚(yú)類生長(zhǎng)的重要因素之一,與魚(yú)類的滲透壓密切相關(guān),對(duì)魚(yú)類呼吸代謝、生長(zhǎng)、存活及免疫防御影響顯著[7]。非特異性免疫對(duì)于維持魚(yú)類的機(jī)體健康、抗病防御中具有重要作用,魚(yú)體各組織器官中非特異性免疫酶活力的變化一定程度上可以作為反映魚(yú)體對(duì)不同鹽度脅迫適應(yīng)能力的生理指標(biāo)。國(guó)內(nèi)外已報(bào)道了鹽度對(duì)很多魚(yú)類非特異性免疫的影響[8-10],但對(duì)日本黃姑魚(yú)非特異性免疫的影響尚未見(jiàn)報(bào)道。本文研究了鹽度對(duì)日本黃姑魚(yú)生長(zhǎng)及非特異性免疫酶活性的影響,旨在探討日本黃姑魚(yú)在不同鹽度環(huán)境下養(yǎng)殖的可能性,為日本黃姑魚(yú)的健康養(yǎng)殖提供參考依據(jù)。
1.1 試驗(yàn)材料
試驗(yàn)于2014年8-9月在浙江省海水增養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室西閃基地進(jìn)行。試驗(yàn)用魚(yú)取自該基地自行培育的日本黃姑魚(yú)。挑選體質(zhì)健壯、規(guī)格整齊、體色正常的日本黃姑魚(yú)作為試驗(yàn)用魚(yú)(初始體長(zhǎng)8.08±0.37 cm,初始體重8.36±0.85 g)。試驗(yàn)用養(yǎng)殖容器為有效容積200 L(直徑70 cm,高70 cm)的圓形塑料缸。
1.2 試驗(yàn)方法
試驗(yàn)開(kāi)始前試驗(yàn)用魚(yú)先在塑料缸中暫養(yǎng)7 d。試驗(yàn)設(shè)鹽度0(淡水組)、6、12、18、24、30(海水對(duì)照)共6個(gè)鹽度梯度,每個(gè)鹽度梯度設(shè)置3個(gè)平行組,每個(gè)平行隨機(jī)放入日本黃姑魚(yú)30ind,并測(cè)量初始體重。采用經(jīng)充分曝氣自來(lái)水和自然沙濾海水(鹽度30)混合的方式降低鹽度,各組魚(yú)馴化方法為:鹽度24、18、12組不經(jīng)過(guò)馴化直接放入;鹽度6組從鹽度12開(kāi)始馴化,以每天降鹽度2的速度馴化至鹽度6;淡水組從鹽度6開(kāi)始馴化,以每天降鹽度2的速度馴化至鹽度0。試驗(yàn)期間水溫26~29℃,pH 7.8~8.1,自然光照,連續(xù)24 h充氣,保持水中溶解氧含量大于5.0 mg/L。每天吸污1次,100%換水1次。日投飼量為魚(yú)體質(zhì)量的3%~5%,以實(shí)際攝食量為準(zhǔn),分2次投喂。養(yǎng)殖試驗(yàn)持續(xù)30 d。
1.3 樣品采集及測(cè)定
試驗(yàn)結(jié)束后停飼24 h,測(cè)量每個(gè)平行組的終末體重和存活魚(yú)尾數(shù)。每個(gè)平行隨機(jī)挑3 ind魚(yú)測(cè)量體長(zhǎng)并進(jìn)行取樣。取樣前先用丁香酚對(duì)試驗(yàn)魚(yú)進(jìn)行麻醉處理,取其腎臟、肝臟、肌肉和鰓組織放入離心管中,再放入液氮中冷凍保存,以上操作均在冰盤中進(jìn)行。所有樣品帶回實(shí)驗(yàn)室后分別測(cè)定各組織(腎臟、肝臟、肌肉和鰓)內(nèi)超氧化物歧化酶(SOD)活力,過(guò)氧化氫酶(CAT)活力、堿性磷酸酶(AKP)活力及酸性磷酸酶(ACP)活力。組織樣品用手術(shù)剪剪碎,準(zhǔn)確稱取0.2 g于玻璃勻漿管中,加入9倍的生理鹽水后冰水浴條件下機(jī)械勻漿,再用離心機(jī)2 500 r/min離心10 min然后取上清分別稀釋至所需濃度后進(jìn)行酶活的測(cè)定。所有酶活力及蛋白含量(蛋白含量測(cè)定采用考馬斯亮蘭法)的測(cè)定所用試劑盒均購(gòu)自南京建成生物工程有限公司,測(cè)定方法參照試劑盒說(shuō)明書(shū)。SOD酶活力單位定義:每毫克組織蛋白在1 mL反應(yīng)液中SOD抑制率達(dá)50%時(shí)所對(duì)應(yīng)的SOD量為1個(gè)酶活力單位(U);CAT酶活力單位定義:每毫克組織蛋白每秒鐘分解1μmol的H2O2的量為1個(gè)酶活力單位(U);AKP酶活力單位定義:每克組織蛋白在37℃下與基質(zhì)作用15 min產(chǎn)生1 mg酚為1個(gè)酶活力單位(U);ACP酶活力單位定義:每克組織蛋白在37℃下與基質(zhì)作用15 min產(chǎn)生1 mg酚為1個(gè)酶活力單位(U)。
1.4 計(jì)算方法
特定生長(zhǎng)率(SGR/%)=(1nWt-1nW0)/t×100
成活率(SR/%)=Nt/N0×100
式中,W0為初始平均體重(g),Wt為終末平均體重(g),t為實(shí)驗(yàn)時(shí)間(d),N0為試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)魚(yú)尾數(shù),Nt為試驗(yàn)結(jié)束時(shí)魚(yú)尾數(shù)。
1.5 數(shù)據(jù)分析
測(cè)定和分析的結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(Mean±SD)表示;實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。
2.1 鹽度對(duì)日本黃姑魚(yú)生長(zhǎng)及存活的影響
試驗(yàn)過(guò)程中除淡水組外其余各鹽度組日本黃姑魚(yú)生長(zhǎng)良好,均無(wú)死亡,存活率100%。淡水組日本黃姑魚(yú)從試驗(yàn)第6天開(kāi)始攝食量明顯降低,且體色發(fā)黑,游動(dòng)變緩;第7天開(kāi)始停止攝食并出現(xiàn)死亡,死亡率為16.67%;至第10天時(shí)死亡率達(dá)100%。日本黃姑魚(yú)在不同鹽度下的生長(zhǎng)情況見(jiàn)表1。鹽度24組日本黃姑魚(yú)的體重及特定生長(zhǎng)率最高,顯著高于鹽度6、12和18組(P<0.05),但與鹽度30組無(wú)顯著差異(P>0.05);鹽度6組日本黃姑魚(yú)體重及特定生長(zhǎng)率均最低但與鹽度12、18組無(wú)顯著差異(P>0.05);鹽度6組日本黃姑魚(yú)體長(zhǎng)與鹽度12組無(wú)顯著差異(P>0.05),但顯著低于鹽度18、24、30組(P<0.05)。
表1 不同鹽度下日本黃姑魚(yú)生長(zhǎng)指標(biāo)Tab.1 The growth index ofN.japonicareared at different salinities
2.2 鹽度對(duì)日本黃姑魚(yú)不同組織SOD活力的影響
不同鹽度下日本黃姑魚(yú)不同組織中SOD活力變化見(jiàn)表2。日本黃姑魚(yú)不同組織中SOD活力在不同鹽度下無(wú)顯著性差異(P>0.05)。其中肝臟中的SOD活力顯著高于其它各組織的SOD活力(P<0.05);腎臟中的SOD活力跟肝臟、肌肉、鰓中的SOD活力也有顯著差異(P<0.05);肌肉和鰓中的SOD活力顯著低于腎臟和肝臟中的SOD活力(P<0.05),但兩者之間無(wú)顯著差異(P>0.05)。
表2 不同鹽度下日本黃姑魚(yú)不同組織中SOD活力變化Tab.2 Changes of SOD activity in different tissues ofN.japonicaat different salinities U/mg prot
2.3 鹽度對(duì)日本黃姑魚(yú)不同組織CAT活力的影響
不同鹽度下日本黃姑魚(yú)不同組織中CAT活力變化見(jiàn)表3。日本黃姑魚(yú)不同組織中CAT活力在不同鹽度下無(wú)顯著性差異(P>0.05),其中腎臟及肌肉組中的CAT活力有隨鹽度的升高而略有升高的趨勢(shì)。不同組織中的CAT活力大小順序依次為肝臟>腎臟>鰓>肌肉,各組織中CAT活力存在顯著差異(P<0.05);其中肌肉中CAT活性含量最低,顯著低于其它各組織(P<0.05)。
表3 不同鹽度下日本黃姑魚(yú)不同組織中CAT活力變化Tab.3 Changes of CAT activity in different tissues ofN.japonicaat different salinities U/mg prot
2.4 鹽度對(duì)日本黃姑魚(yú)不同組織AKP活力的影響
不同鹽度下日本黃姑魚(yú)不同組織中AKP活力變化見(jiàn)表4。鹽度24組中日本黃姑魚(yú)腎臟AKP活力顯著低于鹽度6及18組(P<0.05),但與鹽度12及30組差異不顯著(P>0.05);肝臟、肌肉和鰓中AKP活力在不同鹽度下無(wú)顯著性差異著(P>0.05);不同組織中AKP活力以腎臟中活性最高,顯著高于其余各組織(P<0.05),鰓次之,肌肉中含量最低。
表4 不同鹽度下日本黃姑魚(yú)不同組織中AKP活力變化Tab.4 Changes of AKP activity in different tissues ofN.japonicaat different salinities U/mg prot
表5 不同鹽度下日本黃姑魚(yú)不同組織中ACP活力變化Tab.5 Changes of ACP activity in different tissues ofN.japonicaat different salinities U/mg prot
2.5 鹽度對(duì)日本黃姑魚(yú)不同組織ACP活力的影響
不同鹽度下日本黃姑魚(yú)不同組織中ACP活力變化見(jiàn)表5。日本黃姑魚(yú)不同組織中ACP活力在不同鹽度下無(wú)顯著性差異(P>0.05)。其中腎臟中的ACP活力顯著高于其它各組織(P<0.05);肝臟和鰓中的ACP活力次之,且兩者之間無(wú)顯著差異(P>0.05);肌肉中的ACP活性最低,顯著低于其它各組織(P<0.05)。
3.1 鹽度對(duì)日本黃姑魚(yú)生長(zhǎng)及存活的影響
鹽度是魚(yú)類生活中重要的環(huán)境因子,鹽度的變動(dòng)對(duì)魚(yú)類的新陳代謝具有明顯的影響。鹽度發(fā)生變化時(shí),魚(yú)類需要消耗大量的能量進(jìn)行滲透壓調(diào)節(jié)等一系列生理生化過(guò)程,加速體內(nèi)新陳代謝,增大了魚(yú)體的能量消耗,從而影響魚(yú)類的生長(zhǎng)情況[11]。如果魚(yú)體長(zhǎng)期處于低鹽或者高鹽狀態(tài),將會(huì)導(dǎo)致魚(yú)體能量收支失衡,使其抵抗力下降,容易引起魚(yú)體死亡[12]。莊平等[13]研究指出,廣鹽性魚(yú)類在環(huán)境鹽度變化過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)浮頭、游動(dòng)減少和攝食活動(dòng)降低等適應(yīng)性行為,且隨鹽度脅迫的量度和強(qiáng)度不同,對(duì)魚(yú)體造成的傷害也存在差異。本試驗(yàn)結(jié)果顯示,除淡水組外,其余各鹽度組的日本黃姑魚(yú)均可長(zhǎng)期生長(zhǎng)存活。淡水組日本黃姑魚(yú)從試驗(yàn)第6天開(kāi)始攝食量明顯降低,且體色發(fā)黑,游動(dòng)變緩;第7天開(kāi)始停止攝食并出現(xiàn)死亡,死亡率為16.67%;至第10天時(shí)死亡率達(dá)100%,這種適應(yīng)性行為跟上述研究結(jié)果類似,但也有可能是試驗(yàn)過(guò)程中從鹽度6馴化至淡水時(shí)用時(shí)過(guò)短,從而導(dǎo)致魚(yú)體死亡,具體情況還有待進(jìn)一步研究。本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn),日本黃姑魚(yú)在不同鹽度梯度下養(yǎng)殖30 d后,鹽度24組日本黃姑魚(yú)的體重及特定生長(zhǎng)率最高,顯著高于鹽度6、12和18組(P<0.05),但與鹽度30組無(wú)顯著差異(P>0.05);鹽度6組日本黃姑魚(yú)體重及特定生長(zhǎng)率均最低但與鹽度12、18組無(wú)顯著差異(P>0.05),說(shuō)明日本黃姑魚(yú)在鹽度范圍6~18之間生長(zhǎng)狀況無(wú)顯著差別,均可正常生長(zhǎng);而其最適的鹽度范圍為18~30,在該鹽度范圍內(nèi),可能有利于日本黃姑魚(yú)將更多的能量用于生長(zhǎng)。
3.2 鹽度對(duì)日本黃姑魚(yú)非特異性免疫的影響
SOD和CAT是生物機(jī)體內(nèi)重要的抗氧化酶。SOD普遍存在于需氧生物的組織細(xì)胞中,其功能是將機(jī)體內(nèi)超氧陰離子自由基(O2-·)歧化成H2O2和O2,保護(hù)細(xì)胞免受氧化損傷。CAT可以將H2O2分解H2O為和O2,從而使細(xì)胞免于遭受過(guò)氧化氫的毒害,SOD和CAT二者的協(xié)同作用可以清除細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生的過(guò)量的超氧陰離子自由基,對(duì)生物體具有重要保護(hù)功能[14]。VIARENGO[15]等研究發(fā)現(xiàn),環(huán)境條件的變動(dòng)如水溫、鹽度、溶解氧等均可引起魚(yú)體抗氧化酶活性的變化。王曉杰等[16]對(duì)許氏平鲉Sebastes schlegelii的研究發(fā)現(xiàn),許氏平鲉血液中SOD、CAT的活力隨海水鹽度降低呈逐漸上升趨勢(shì);房子恒等[17]對(duì)經(jīng)長(zhǎng)期低鹽度脅迫的半滑舌鰨Cynoglossus semilaevis研究發(fā)現(xiàn),不同鹽度條件下半滑舌鰨幼魚(yú)組織中SOD、CAT出現(xiàn)顯著變化,肝臟中SOD、CAT含量顯著高于其它組織;但王妤等[18]對(duì)點(diǎn)籃子魚(yú)Siganus guttatus經(jīng)40 d不同鹽度馴養(yǎng)后發(fā)現(xiàn),點(diǎn)籃子魚(yú)肝臟、腎臟和肌肉中SOD、CAT酶活性在不同鹽度下無(wú)顯著性差異(P>0.05),且肝臟中SOD、CAT含量顯著高于其它組織;這說(shuō)明肝臟是進(jìn)行氧化反應(yīng)較多的組織,所以其中的抗氧化酶活力較高[19]。本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn),日本黃姑魚(yú)在不同鹽度條件下養(yǎng)殖30 d后,日本黃姑魚(yú)中腎臟、肝臟、肌肉和鰓中SOD、CAT活力均無(wú)顯著性差異(P>0.05),且肝臟中SOD、CAT含量顯著高于其它組織,跟王妤等[18]對(duì)點(diǎn)籃子魚(yú)的研究結(jié)果類似。
磷酸酶是一種催化各種含磷化合物水解的酶類,根據(jù)它們催化作用的最適pH特性,可分為堿性磷酸酶(AKP)和酸性磷酸酶(ACP)。磷酸酶具有非常重要的生理功能,是生物體內(nèi)重要的解毒體系,它們能通過(guò)調(diào)節(jié)蛋白的去磷酸化,在一些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化、吸收、轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程中起著重要作用[20]。磷酸酶與水產(chǎn)動(dòng)物機(jī)體的生長(zhǎng)密切相關(guān),詹付鳳等[21]用重金屬鎘對(duì)鯽魚(yú)Carassias auratus進(jìn)行致毒試驗(yàn)時(shí)發(fā)現(xiàn),在重金屬鎘高濃度長(zhǎng)時(shí)間脅迫下,對(duì)鯽魚(yú)腸、肝胰臟和鰓中AKP和ACP酶活性有明顯的抑制作用;杜啟艷等[22]對(duì)泥鰍Misgurnus anguillicaudatus進(jìn)行饑餓和再投喂試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)泥鰍肝臟、肌肉和消化道中的AKP和ACP酶活性發(fā)生明顯變化。房子恒[17]等對(duì)半滑舌鰨幼魚(yú)研究中發(fā)現(xiàn),在不同鹽度條件下半滑舌鰨幼魚(yú)組織中除肌肉ACP活力無(wú)顯著差異外(P>0.05),鰓、肝臟和腎臟中的AKP和ACP活力均出現(xiàn)明顯變化。本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn),除生活在鹽度24中日本黃姑魚(yú)中腎臟AKP活力顯著低于鹽度6及18組外,肝臟、肌肉、鰓中AKP和ACP及腎臟ACP活力均無(wú)顯著差異(P>0.05),跟房子恒等[17]對(duì)半滑舌鰨的研究結(jié)果并不一致,這可能跟不同魚(yú)種對(duì)鹽度的適應(yīng)能力不一樣或者實(shí)驗(yàn)方法不同有一定的關(guān)系,具體情況還需進(jìn)一步研究。
通過(guò)本試驗(yàn)的研究可以發(fā)現(xiàn),鹽度6組日本黃姑魚(yú)體重及特定生長(zhǎng)率較海水對(duì)照組有所下降但與鹽度12、18組無(wú)顯著差異(P>0.05);鹽度6組日本黃姑魚(yú)各組織中的SOD、CAT、AKP和ACP活力與海水對(duì)照組均無(wú)顯著差異(P>0.05)。由此可知,日本黃姑魚(yú)對(duì)低鹽度的耐受力較強(qiáng),在鹽度6的條件下經(jīng)過(guò)一段時(shí)間的適應(yīng)后可以正常生長(zhǎng)存活,但在淡水中能否生長(zhǎng)存活還有待進(jìn)一步研究確定。
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Effects of Salinity on Growth and Non-specific Immunity of Nibea japonica
WANG Yue-bin,HU Ze-hui,ZHU Yun-hai,et al
(Zhe jiang Marine Fisheries Research Institute,Zhe jiang Key Lab of Mariculture&Enhancement, Scientific Observation and Experiment Station of Fishery Resources in Key Fishing Grounds,Ministry of Agriculture,Zhoushan 316021,China)
A 30-day experiment was conducted to investigate the effect of salinity on the survival,growth and non-specific immunity for giant croaker(Nibea japonica)(8.36±0.85 g)under different salinities(salinity 0,6,12, 18,24 and 30).In the group of salinity 0,N.japonicastopped feeding from 7 th day and died completely from 10th day.In the rest of groups,N.japonicashowed well growth and no death.At the end of the experiment,weight gain rate (WGR)and specific growth rate(SGR)in the group of salinity 24 was the highest,which were significantly higher than that of salinity 6,12 and 18(P<0.05),but no significant difference compared with the group of salinity 30(P>0.05).In the group of salinity 6,N.japonicapresented the lowest WGR an SGR,whereas no significant differences compared with the group of salinity 12 and 18(P>0.05).Based on the determination of superoxide dismutase (SOD),catalase(CAT),alkaline phosphatase(AKP)and acid phosphatase(ACP),the results showed that AKP in the kidney for the group of salinity 24 was significantly lower than that of salinity 6 and 18(P<0.05),but no significant difference(P>0.05)with the group of salinity 12 and 30.There were no significant differences for SOD,CAT, AKP and ACP in the other tissues at different salinities (P>0.05).The results suggested thatN.japonicahas stronger tolerance to low salinity,which could grow and survive normally after a period of adaption under the salinity 6.It’s proved that the suitable salinity range forN.japonicais from 18 to 30.
Nibea japonica;salinity;growth;non-specific immunity
S917
A
1008-830X(2015)01-0026-06
2014-09-25
浙江省科技廳公益技術(shù)研究農(nóng)業(yè)項(xiàng)目(2014C32069);浙江省科技廳創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)建設(shè)與人才培養(yǎng)項(xiàng)目(2013F20001);國(guó)家高技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃(863計(jì)劃)(2012AA10A413);2014年農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)創(chuàng)新與推廣(浙財(cái)農(nóng)[2014]306號(hào))
王躍斌(1983-),男,浙江寧海人,工程師,研究方向:海水增養(yǎng)殖.E-mail:wybin@126.com
柴學(xué)軍,高級(jí)工程師.E-mail:chaixj6530@sohu.com