童平珍

貴陽(yáng)中醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院病理科，貴州貴陽(yáng) 550001

血清SIL-2R、IL-8和TNF水平在輪狀病毒（RV）腸炎發(fā)病中的作用機(jī)制研究

童平珍

貴陽(yáng)中醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院病理科，貴州貴陽(yáng) 550001

目的了解血清SIL-2R、IL-8和TNF水平在輪狀病毒（RV）腸炎發(fā)病中的作用機(jī)制。方法隨機(jī)擇取該院2012年3月—2014年3月收治的50例RV腸炎患兒為實(shí)驗(yàn)組，并選擇同期來(lái)該院體查的50例健康體檢者為對(duì)照組，應(yīng)用雙抗體夾心ELISA法，對(duì)兩組血清中SIL-2R、IL-8及TNF-A水平進(jìn)行檢測(cè)，觀察兩組各個(gè)指標(biāo)變化情況。結(jié)果實(shí)驗(yàn)組RV腸炎患兒在急性期血清中SIL-2R、TNF-A、IL-8水平 （45.23±11.23）pg/mL，（122.23±6.75）pg/mL，（526.43±12.54）pg/mL明顯高于正常對(duì)照組（28.64±9.62）pg/mL，（68.12±5.46）pg/mL，（197.32±14.24）pg/mL，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。與對(duì)照組比較，輕癥組、中癥組、重癥組RV腸炎患兒血清IL-8、SIL-2R及TNF-A水平亦呈增高趨勢(shì)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），提示三者與病情輕重具有關(guān)聯(lián)性。結(jié)論血清IL-8、SIL-2R、TNF-A在輪狀病毒感染免疫防御與免疫損傷機(jī)制中具有重要的引導(dǎo)作用，臨床上應(yīng)引起足夠重視。

血清SIL-2R；IL-8；TNF；輪狀病毒；腸炎；作用機(jī)制

據(jù)流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，輪狀病毒屬于嬰幼兒流行性腹瀉的關(guān)鍵病原，目前RV腸炎發(fā)病免疫機(jī)制尚未完全明確，腫瘤壞死因子與白細(xì)胞介素屬于體內(nèi)關(guān)鍵的促炎癥介質(zhì)與免疫調(diào)節(jié)因子[1-2]?，F(xiàn)階段，國(guó)內(nèi)外對(duì)顯現(xiàn)RV感染后血清中IL、TNF水平變化情況的報(bào)道相對(duì)較少[3]。為了深入探究血清SIL-2R、IL-8和TNF水平在輪狀病毒（RV）腸炎發(fā)病中的作用機(jī)制，該文主要對(duì)該院2012年3月—2014年3月收治的50例RV腸炎患兒進(jìn)行平行對(duì)照研究，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機(jī)擇取該院2012年3月—2014年3月收治的RV腸炎患兒50例為實(shí)驗(yàn)組，符合《實(shí)用兒科學(xué)》（第7版）中的有關(guān)臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)[2]，糞便輪狀病毒ELISA試驗(yàn)呈陽(yáng)性，無(wú)嚴(yán)重肺、心、肝等疾病，其中男性30例，女性20例，年齡6～30個(gè)月，平均年齡在(21.36±2.12)個(gè)月；在病情嚴(yán)重程度上，其中輕癥者20例，中癥者17例，重癥者13例。并選擇同期來(lái)該院體查的50例健康體檢者為對(duì)照組，其中男性32例，女性18例，年齡8～30個(gè)月，平均年齡在(23.06±2.34)個(gè)月。兩組患者一般資料對(duì)比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 一般方法

抽取所有試驗(yàn)對(duì)象3mL外周靜脈血，按照2000轉(zhuǎn)/min的速度離心10 min后留取上層血清，并置入EP管（2 m L）中，于－20℃環(huán)境下貯存?zhèn)錅y(cè)。于試驗(yàn)前1 d，于－4℃環(huán)境下存儲(chǔ)標(biāo)本，確保室溫平衡。待標(biāo)本檢測(cè)前期工作完畢后，采用SIEMENS IMMULITE 2000型自動(dòng)發(fā)光免疫分析儀及其藥盒（美國(guó)德普公司）,應(yīng)用雙抗體夾心ELISA法,參照藥盒說(shuō)明書，由專業(yè)人員對(duì)兩組進(jìn)行檢測(cè)。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察兩組患兒血清中SIL-2R、IL-8及TNF-A水平變化情況。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

應(yīng)用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)上述資料進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，進(jìn)行t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 RV腸炎患兒與正常人群SIL-2R、IL-8、TNF-A水平比較

與對(duì)照組比較，實(shí)驗(yàn)組SIL-2R(45.23±11.23)pg/mL、IL-8(526.43± 12.54)pg/mL、TNF-A(122.23±6.75)pg/m L水平明顯上升，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），表明三者在RV腸炎發(fā)病過程中具有參與作用，見表1。

表1 RV腸炎患兒與正常人群血清IL-8、SIL-2R及TNF-A水平比較[（x±s），pg/m L]

2.2 三組不同程度RV腸炎患兒對(duì)正常人群血清IL-8、SIL-2R及TNF-A水平比較

與對(duì)照組比較，輕癥組、中癥組、重癥組 RV腸炎患兒血清IL-8、SIL-2R及TNF-A水平亦呈增高趨勢(shì)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），提示三者與病情輕重具有關(guān)聯(lián)性，見表2。

表2 三組不同程度RV腸炎與對(duì)照組血清IL-8、SIL-2R及TNF-A水平比較[（x±s），pg/m L]

3 討論

據(jù)有關(guān)研究資料顯示，積極控制與預(yù)防RV感染取決于其發(fā)病機(jī)制的系統(tǒng)研究,但現(xiàn)階段其發(fā)病免疫機(jī)制尚未完全清晰。RV侵犯的細(xì)胞多為腸絨毛上皮細(xì)胞，但腸上皮集合淋巴結(jié)中多為T淋巴細(xì)胞，而B淋巴細(xì)胞約占10%左右，其形成的抗體取決于T淋巴細(xì)胞系統(tǒng)調(diào)控，故在腸道抗病毒中細(xì)胞免疫的作用研究顯得尤為重要[4-5]。

據(jù)有關(guān)研究提示，RV侵犯部位多屬于T淋巴細(xì)胞,，而Th細(xì)胞是形成TNF-A等細(xì)胞因子的關(guān)鍵細(xì)胞[6-7]。當(dāng)繼發(fā)RV感染后，易激活Th細(xì)胞，進(jìn)而分泌大量的TNF-A。在體內(nèi)，此類細(xì)胞因子具有一定的免疫保護(hù)作用，可誘導(dǎo)機(jī)體抗感染能力上升。此外，此二者屬于致炎因子,可誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞、T細(xì)胞分泌大量的IL-8、IL-2等炎性介質(zhì)，引起中性粒細(xì)胞趨化,進(jìn)而形成粘膜水腫與血管損傷,提升通透性[8]。SIL-2R作為m IL-2R（細(xì)胞膜上白介素2受體）脫落流入體液內(nèi)的一種產(chǎn)物，目前已成為了細(xì)胞免疫敏感性、定量性指標(biāo)。

該研究結(jié)果提示，于RV腸炎患兒急性期，其血清中SIL-2R含量逐漸升高,從（43.02±12.12）pg/mL上升至（45.13±10.34）pg/mL再上升至（48.32±11.42）pg/mL，觀察上升范圍與病情分組，可發(fā)現(xiàn)上升范圍與病情輕重具有明顯關(guān)聯(lián)，多因RV感染后導(dǎo)致免疫細(xì)胞被激活，進(jìn)而釋放大量SIL-2R，提示RV腸炎急性期易激活細(xì)胞免疫,推測(cè)SIL-2R可作為RV疫苗接種后細(xì)胞免疫檢測(cè)的輔助性指標(biāo)[9-10]。

IL-8屬于白細(xì)胞趨化因子,經(jīng)多種細(xì)胞活化后可分泌，對(duì)T淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞具有激活作用，并可誘導(dǎo)其浸潤(rùn)至炎癥局部，進(jìn)而釋放大量的炎癥介質(zhì),誘發(fā)炎癥反應(yīng)，引起小腸上皮細(xì)胞壞死與脫落[11]。待出現(xiàn)廣泛性損害后，極其容易減少腸吸收面積與絨毛上皮分泌雙糖酶，進(jìn)而引起糖吸收障礙,導(dǎo)致腸腔內(nèi)滲透壓急劇升高,最終形成水樣瀉大便。見文中數(shù)據(jù)，健康的對(duì)照組IL-8水平在200 pg/mL之下，而患有腸炎的輕中重三組則均在500 pg/mL之上，且癥狀越嚴(yán)重，IL-8水平越高，因此，可推斷出IL-8水平與病情輕重具有明顯關(guān)聯(lián)。

而TNF-A多由單核巨噬細(xì)胞形成,較IL-8炎癥介質(zhì)而言，其組織損傷功能相似。見文中數(shù)據(jù)，健康的對(duì)照組TNF-A水平在100 pg/mL之下，而患有腸炎的輕中重3組則均在100 pg/m L之上，且癥狀越嚴(yán)重，TNF-A水平越高。除了驗(yàn)證了TNF-A水平與病情輕重的必然聯(lián)系，也證明了TNF-A具有抗病毒作用，TNF-A升高時(shí)為了遏制病毒對(duì)身體的侵害，病情越重，則有越多TNF-A進(jìn)行疾病抵抗。

結(jié)合該研究結(jié)果與楊志紅[12]所著《炎癥性腸病的病因?qū)W和藥物治療研究進(jìn)展》可以發(fā)現(xiàn)，于RV腸炎患兒急性期，其血清中TNF-A、IL-8呈升高態(tài)勢(shì),提示二者在RV腸炎發(fā)病過程中具有參與作用，且與病情輕重具有關(guān)聯(lián)性。目前，臨床諸多研究資料提示，在RV發(fā)病中，IL-8的作用主要體現(xiàn)在兩個(gè)方面：①于RV感染后，可誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞、腸粘膜淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)；②趨化RV感染后，可誘導(dǎo)形成的RV特異性細(xì)胞毒T細(xì)胞最大限度地發(fā)揮自身效應(yīng)器功能[13-14]。從整體角度而言，TNF-A、IL-8在RV感染中具有一定的促炎作用，而非抗病毒作用。這同時(shí)，SIL-2R亦在RV腸炎免疫病理過程中具有引導(dǎo)作用，三者的變化提示著嬰幼兒RV腸炎伴有免疫失衡現(xiàn)象,為今后調(diào)節(jié)失衡提供了可參考依據(jù)[15]。

綜上所述，在輪狀病毒感染免疫防御與免疫損傷機(jī)制中，血清IL-8、SIL-2R、TNF-A具有重要的引導(dǎo)作用，值得臨床借鑒。

[1]張勝,周濤,付四毛,等.輪狀病毒腸炎伴良性驚厥患兒血清及腦脊液白介素檢測(cè)意義分析[J].中國(guó)全科醫(yī)學(xué),2010,13（32）:3612-3614.

[2]胡亞美.實(shí)用兒科學(xué)[M].7版.北京：人民衛(wèi)生出版社,2012：56.

[3]王建軍.大腸癌血清腫瘤壞死因子α、白細(xì)胞介素8和可溶性白細(xì)胞介素2受體水平的檢測(cè)及其臨床意義[J].中國(guó)腫瘤臨床與康復(fù),2012,12（3）:241-243.

[4]曹秀紅,張學(xué)彥,張曉娜.白介素在潰瘍性結(jié)腸炎發(fā)病機(jī)制中的研究進(jìn)展[J].世界華人消化雜志,2011,25（30）:3143-3148.

[5]周彥平.輪狀病毒腸炎患兒血清心肌酶檢測(cè)及臨床意義[J].實(shí)用臨床醫(yī)藥雜志,2013,26（23）:173-174.

[6]戎玲勤，徐甦.康復(fù)新液灌腸聯(lián)合健脾清腸湯加減治療潰瘍性結(jié)腸炎32例[J].中醫(yī)雜志，2013，54（13）：1150-1151.

[7]毛穎，王秀珍，張喆，等.潰瘍性結(jié)腸炎動(dòng)物模型研究進(jìn)展[J].中醫(yī)藥信息，2013，30（4）：126-130.

[8] Endemann DH，Schiffrin EL.Endothelial dysfunction [J].J Am Soc Nephrol，2010，15(8)：1983-1992.

[9]柴玉娜，杜群.潰結(jié)靈對(duì)Caco-2炎癥細(xì)胞模型IκBα基因和蛋白表達(dá)的作用[J].中藥新藥與臨床藥理，2013，24（1）：14-17.

[10]王新月，閆昕.潰瘍性結(jié)腸炎的發(fā)病特點(diǎn)與“毒損腸絡(luò)”病機(jī)學(xué)說(shuō)[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志，2013，33（3）：410-414.

[11]Izzard AS，Rizzoni D，Agabiti-Rosei E，et al.Small artery structure and hypertension：adaptive changes and targetorgan damage[J].JHypertens，2011，23(2)：247-250.

[12]楊志紅,鄧彤斌,王夢(mèng)明，等.炎癥性腸病的病因?qū)W和藥物治療研究進(jìn)展[J].中國(guó)藥師,2013,16(6):905-907.

[13]張婷,陳燁,王中秋，等.炎癥性腸病患者腸道菌群結(jié)構(gòu)的變化及其與炎性指標(biāo)的關(guān)系[J].南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2013,33(10):1474-1477,1498.

[14]張明明,于成功.普拉梭菌與炎癥性腸病關(guān)系的研究進(jìn)展[J].中華消化雜志,2012,32(11):789-792.

[15]洪娜,于成功.腸道菌群在炎癥性腸病發(fā)生中的作用[J].胃腸病學(xué), 2011,16(11):692-695.

Serum SIL-2R,IL-8 and TNF Levels in Rotavirus Enteritis(RV)to Study the Effects and M echanism of the Pathogenesis

TONG Ping-zhen
Department of Pathology,the Second Affiliated Hospital of Guiyang College of Traditional Chinese Medicine,guiyang,Guizhou Province,550001 China

ObjectiveTo investigate the serum levels of SIL-2R,IL-8 and TNF levels in rotavirus enteritis(RV)mechanism in the pathogenesis.Metheds50 cases of RV enteritis children in our hospital in 2012March to take in 2014 March were as the experimental group,and 50 healthy subjects over the same period in our hospital physical examination as control group,the double antibody sandwich ELISA method was used to detect SIL-2R,IL-8 and TNF-A levels in serum of two groups,to observe the changes of two groups each index.ResultsThe experimental group RV enteritis in the acute phase serum SIL-2R,TNF-A and IL-8 levels(45.23±11.23,122.23±6.75,526.43±12.54)pg/m L was significantly higher than that in normal control group (28.64± 9.62,68.12±5.46,197.32±14.24)pg/mL,there was a statistically significant difference(P＜0.05).Compared with the control group, m ild group and severe group in symptom group,serum IL-8,SIL-2R of RV enteritis and the level of TNF-A was also increased (P＜0.05),suggesting that the three related to the severity of the association.ConclusionSerum IL-8,SIL-2R,TNF-A in rotavirus infection play an important role in immune defense and immunemechanism of injury,clinical attention should be paid.

Serum SIL-2R;IL-8;TNF;Rotavirus;Enteritis;Mechanism of action

R 725

A

1674-0742（2015）07（b）－0010-03

2015-04-13）

童平珍（1978.8-），女，湖南漢壽人，碩士研究生，主治醫(yī)師，研究方向：胸腺病理、消化病理、血液病理。