■孟 巖 祁宏偉

（1.吉林農(nóng)業(yè)科技學院，吉林省吉林市 132101；2.吉林省農(nóng)業(yè)科學院畜牧科學分院，吉林公主嶺 136100）

消化酶的活性對于動物體的營養(yǎng)物質(zhì)吸收有著重要的影響，是營養(yǎng)物質(zhì)消化并吸收的基礎。大部分的營養(yǎng)物質(zhì)都要在小腸中進行吸收，如果動物體的消化酶活性不高或者小腸功能出現(xiàn)障礙，那么在小腸內(nèi)就會殘存大量的不能吸收的物質(zhì)，這些未吸收的物質(zhì)會增加腸道內(nèi)的滲透壓，從而引起動物滲透性腹瀉及其它疾病[1]。

本試驗以豆粕提取物為研究對象，探討不同添加水平的豆粕提取復合物對肉仔雞養(yǎng)分表觀代謝率以及腸道消化酶活性的影響，進而明確其在肉仔雞玉米-豆粕型日糧中的適宜添加水平，為研究豆粕提取復合物促進肉仔雞消化代謝的機理及其對肉仔雞腸道機能作用提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

豆粕提取物：吉林省農(nóng)業(yè)科學院研制，具體組成為：大豆異黃酮0.928%，大豆低聚糖71.33%（其中蔗糖42.6%、水蘇糖22.6%、棉籽糖6.13%）、大豆皂甙7.2%、大豆多肽6.2%。試驗動物為1日齡健康的艾維茵肉仔雞，購自公主嶺市某孵化場。

1.2 試驗設計

選擇健康狀況良好的1日齡艾維茵肉仔雞600只，隨機分為5個處理，每個處理設4個重復，每個重復30只。其中一組設為對照組，只飼喂基礎日糧，不添加任何添加劑。試驗組分為4個組，分別為250 mg/kg處理組：基礎日糧+豆粕提取復合物250 mg/kg；500 mg/kg處理組：基礎日糧+豆粕提取復合物500 mg/kg；750 mg/kg處理組：基礎日糧＋豆粕提取復合物750 mg/kg；1 000 mg/kg處理組：基礎日糧+豆粕提取復合物1 000 mg/kg。試驗期為49 d，分為前、后兩期，前期0～21 d，后期22～49 d。

1.3 試驗基礎日糧

基礎日糧按照肉雞不同生長發(fā)育階段營養(yǎng)需要自行配制?；A日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎日糧組成及營養(yǎng)水平(風干基礎)

1.4 飼養(yǎng)管理

在試驗前對雞舍進行徹底清潔和消毒，試驗期內(nèi)雞舍每7 d消毒兩次。前期0～21日齡肉仔雞采用籠養(yǎng)方式，后期22～49日齡采用地上平養(yǎng)飼養(yǎng)方式。試驗期間，對雞舍的溫度和濕度進行人工控制，保持良好通風換氣，自由飲水和采食，參照肉雞標準化飼養(yǎng)管理進行。對肉仔雞進行常規(guī)免疫，試驗期間均不使用其他抗生素藥物。

1.5 養(yǎng)分表觀代謝率的測定

試驗28 d時，每個重復隨機選擇2只雞進行為期4 d的代謝試驗。代謝試驗采用全收糞法。在代謝試驗開始和結束時將試驗雞以重復為單位稱重，準確記錄各重復的飼料添加量，并采集各組飼料樣品，粉碎過40目篩，裝入樣品瓶備測。在各重復的糞盤上各放一塊干凈的塑料布用于接糞。每天早8∶00收集糞便，挑凈糞布上的羽毛和飼料顆粒等雜物后，用10%的稀硫酸進行處理，每100 g糞樣加10 ml，將4 d收集的糞便稱重并混勻，冰箱4℃保存。將糞樣65℃烘干，室溫充分冷卻回潮24 h，稱重，粉碎過40目篩，裝入樣品瓶備測。測定飼料和糞樣中的粗蛋白質(zhì)、粗脂肪和能值，計算各營養(yǎng)物質(zhì)表觀代謝率。糞便和飼料樣本的粗蛋白質(zhì)含量測定采用凱式定氮法，粗脂肪含量采用索氏脂肪提取法，能值采用氧彈式測熱儀測定。

蛋白質(zhì)表觀代謝率（%）=[（食入飼料量×飼料蛋白質(zhì)含量-糞便量×糞便蛋白質(zhì)含量）/食入飼料量×飼料蛋白質(zhì)含量]×100；

脂肪表觀代謝率（%）=[（食入飼料量×飼料脂肪含量-糞便量×糞便脂肪含量）/食入飼料量×飼料脂肪含量]×100；

表觀代謝能（MJ/kg）=[食入能量（MJ）-排泄物中能量（MJ）]/食入飼料量（kg）。

1.6 肉雞腸道消化酶活性測定

于21日齡時每處理隨機取4只雞(每重復1只)屠宰，迅速打開腹腔，取十二指腸食糜。將十二指腸食糜按照生理鹽水和食糜1∶5的質(zhì)量比進行混合，混勻后在勻漿器進行勻漿，勻漿的過程中，勻漿管處于冰水混合物中，勻漿時間30 s，在4℃離心機，離心15 min(12 000 r/min)，取離心后的上清液，放置于-80℃保存?zhèn)錅y。使用試劑盒（購自南京建成生物工程研究所）分別對淀粉酶、脂肪酶以及蛋白酶的活性進行測定。蛋白酶活性采用福林-酚試劑法[2]測定，淀粉酶活性采用碘-淀粉比色法[2]測定，脂肪酶活性采用比濁法[3]測定。

1.7 數(shù)據(jù)處理

利用SPSS13.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，試驗數(shù)據(jù)結果用“平均值±標準差”表示，采用Duncan's法進行多重比較。

2 結果與分析

2.1 豆粕提取物對養(yǎng)分表觀代謝率的影響(見表2)

表2 豆粕提取物對養(yǎng)分表觀代謝率的影響

由表2可見，不同添加水平豆粕提取物對肉仔雞養(yǎng)分表觀代謝率均可產(chǎn)生積極的影響。在粗蛋白代謝影響方面，試驗組均比對照組有所提高，其中250 mg/kg處理組較對照組雖然有所提高，但影響不顯著（P＞0.05）；500 mg/kg處理組比對照組提高了7.45%（P＜0.05），提高幅度最大；750 mg/kg處理組比對照組提高了6.76%（P＜0.05）；1 000 mg/kg處理組比對照組提高了5.79%（P＜0.05），500、750、1 000 mg/kg三個處理組之間無顯著差異(P＞0.05)，但1 000 mg/kg處理組較750 mg/kg處理組代謝率有下降的趨勢（P＞0.05）；在粗脂肪代謝方面，試驗組與對照組相比雖然均有提高，但只有500 mg/kg處理組與對照組相比差異顯著（P＜0.05），其它各組與對照組相比均差異不明顯（P＞0.05）。表觀代謝能方面，雖然試驗組間有比對照組提高的趨勢，但均無顯著差異（P＞0.05）。

2.2 豆粕提取復合物對肉仔雞腸道消化酶活性的影響(見表3)

表3 豆粕提取復合物對肉仔雞腸道消化酶活性的影響(U/g)

由表3可見，各試驗組的α-淀粉酶活性均比對照組有不同程度的提高，其中，250 mg/kg組比對照組提高10.55%（P＜0.05），500、750、1 000 mg/kg組比對照組分別高出50.49%、50.61%、45.7%，差異極顯著（P＜0.01）；三個處理組脂肪酶活性比對照組分別高出30.34%、28.08%、16.95%，差異顯著（P＜0.05），而250 mg/kg組的脂肪酶活性與對照組相比無明顯差異（P＞0.05）；500、750 mg/kg和1 000 mg/kg三個處理組的總蛋白水解酶的酶活比對照組分別高出39.69%、33.04%、24.72%，差異顯著（P＜0.05），250 mg/kg組總蛋白水解酶活性比對照組有所增加，但差異不顯著（P＞0.05）。1 000 mg/kg組與500 mg/kg組和750 mg/kg組相比較，消化酶活性均有下降的趨勢，但差異不顯著（P＞0.05 ）。

3 討論

3.1 豆粕提取物對養(yǎng)分表觀代謝率的影響

大量的研究表明，豆粕提取物中的活性物質(zhì)除了具有提高機體免疫力、抗脂質(zhì)氧化、降血脂、抗自由基、抗病毒、抗腫瘤等生理功能以外，這些大豆活性物質(zhì)還可以促進機體生長發(fā)育，提高機體對營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收和利用，同時影響了機體正常菌群的活性，使得腸黏膜細胞代謝發(fā)生變化，進而影響了肉仔雞養(yǎng)分表觀代謝率。豆粕提取物活性物質(zhì)一方面可以提高蛋白質(zhì)等含氮化合物的利用；另一方面，豆粕提取物含有大量的多聚糖類，可以提高益生菌的活性，可以加強對含氮化合物的利用；低聚糖可以吸附氨氣，使得腸道氨氣濃度降低，吸附的氨氣隨著糞便排出體外；不僅提高了含氮化合物的利用度，還改善了腸道環(huán)境，最終可以提高機體對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收。本研究粗蛋白和粗脂肪的表觀代謝率在豆粕提取復合物添加量為500 mg/kg之前是增加的，并達到最大值，在750 mg/kg之后呈現(xiàn)下降趨勢。粗蛋白和粗脂肪表觀消化率升降與豆粕提取物能夠促進并提高肉仔雞的生產(chǎn)性能結果是一致的，具體作用機理需要進一步深入的研究。

3.2 豆粕提取物對腸道消化酶活性的影響

腸道中消化酶的活性一方面可以反映動物的消化能力；另一方面也是酶合成與酶分解的平衡反映。當動物受到應激刺激等行為時，其分泌的消化酶就會明顯減少，影響動物對食物的消化吸收[4]。酶活性的增加另一方面是由于酶的合成增多，或者酶的合成大于酶的降解。其影響主要是由于機體對攝入的蛋白質(zhì)和氨基酸進行代謝產(chǎn)生尿素等，這些含氮物質(zhì)在機體腸道分解產(chǎn)生氨氣，對消化道的pH值產(chǎn)生了影響，從而使得消化酶的活性發(fā)生改變。

本研究結果表明，豆粕提取物可以提高腸道中的淀粉酶、脂肪酶、蛋白酶的活性，這主要是由于豆粕提取物提高了動物體的免疫能力，減少了動物的應激反應，提高了消化酶的合成速度。此結果與豆粕提取物提高養(yǎng)分表觀代謝率相一致,結果表明肉仔雞養(yǎng)分表觀代謝率與腸道脂肪酶活性有關，也說明了雞腸道消化酶活性可能反映了雞對營養(yǎng)物質(zhì)的利用能力[5]。本試驗研究的數(shù)據(jù)結果和上述研究結果一致，豆粕提取物能夠明顯提高肉仔雞的消化酶活性。

4 結論

從本試驗結果可以得出,肉仔雞日糧中添加豆粕提取物可提高養(yǎng)分的表觀代謝率以及腸道消化酶活性，綜合對二者的影響結果,豆粕提取復合物在肉仔雞日糧中的添加量以500～750 mg/kg為宜。