袁田慧子 馮 靜 郭 靜 楊 青

(湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院,湖南長(zhǎng)沙 410128)

犬布魯氏菌病及其診治

袁田慧子 馮 靜 郭 靜 楊 青

(湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院,湖南長(zhǎng)沙 410128)

布魯氏菌病是危害動(dòng)物和人類健康的一種人畜共患病。隨著生活水平的提高，飼養(yǎng)寵物增多，人類和犬接觸越來(lái)越密切，犬布魯氏菌病越來(lái)越受到重視。本文針對(duì)犬的布魯氏菌病對(duì)其病原學(xué)、流行病學(xué)、發(fā)病機(jī)理、檢測(cè)方法、癥狀、治療和免疫預(yù)防進(jìn)行了綜述。

布魯氏菌病 犬 檢測(cè) 診治

1 病原體

布魯氏菌為需氧革蘭氏陰性小球桿菌，無(wú)鞭毛，不形成芽孢，通常沒有莢膜，毒力菌株可有菲薄的莢膜。經(jīng)研究，病菌大小通常在0.6～1.5μm×0.5～0.71μm之間。布魯氏菌的生長(zhǎng)和繁殖具有較高的營(yíng)養(yǎng)需求，當(dāng)前實(shí)驗(yàn)室研究多使用含血清培養(yǎng)基或馬鈴薯浸液培養(yǎng)基，生長(zhǎng)所需溫度在20℃～40℃之間，37℃最為合適。該菌生長(zhǎng)較為緩慢，初代分離布魯氏菌通常需1周以上才可長(zhǎng)出肉眼可見的圓形菌落，經(jīng)多次繼代培養(yǎng)后菌落的生長(zhǎng)速度將有所提高。經(jīng)抗生素作用該菌可發(fā)生變異。布魯氏菌的抗滅活能力較強(qiáng)，對(duì)低溫，干燥均有較強(qiáng)的抵抗力，但不喜濕熱，對(duì)抗生素、紫外線、常用消毒劑等比較敏感。

2 流行病學(xué)

布魯氏菌病是一種人和動(dòng)物共患傳染病，傳染性很強(qiáng)，主要經(jīng)消化道、呼吸道、破損皮膚、皮膚黏膜、交配、繁育、吸血昆蟲等途徑傳染。發(fā)病沒有季節(jié)性，一年四季均可發(fā)病，但動(dòng)物流產(chǎn)季節(jié)發(fā)病率最高。此病的傳染源主要為患病動(dòng)物及帶菌動(dòng)物，目前已知的布魯氏菌宿主在陸生哺乳動(dòng)物，水生哺乳動(dòng)物和禽類中多達(dá)60多種，易感動(dòng)物范圍極廣?；疾?dòng)物的流產(chǎn)物、排泄物、分泌物及乳類均含有大量病菌，尤其以生殖器分泌物中病菌量最多。動(dòng)物對(duì)布魯氏桿菌的易感性在性成熟時(shí)最高，幼崽和年老動(dòng)物感染率較低，且雌性動(dòng)物易感性高于雄性動(dòng)物。

3 發(fā)病機(jī)理

布魯氏菌一旦侵入犬類機(jī)體，首先進(jìn)入淋巴源性遷徙階段，幾日內(nèi)便可侵入淋巴結(jié)，若犬自身的吞噬細(xì)胞未能將其消滅，病菌便在細(xì)胞內(nèi)生長(zhǎng)繁殖并形成局部原發(fā)病灶。通常此階段為14～180d。之后布魯氏菌會(huì)在吞噬細(xì)胞內(nèi)大量增殖并導(dǎo)致后者破裂，從而進(jìn)入血液中引起可間歇性出現(xiàn)的菌血癥。隨后病菌隨血液擴(kuò)散至病犬的各個(gè)器官中，在引起器官病變的同時(shí)又可從犬的排泄物排出。此外，布魯氏菌進(jìn)入絨毛膜上皮細(xì)胞內(nèi)增殖可能導(dǎo)致胎盤炎，并在絨毛膜與子宮膜之間擴(kuò)散，造成子宮內(nèi)膜炎。在絨毛膜上皮細(xì)胞內(nèi)增殖時(shí)，使絨毛發(fā)生漸進(jìn)性壞死，同時(shí)產(chǎn)生一層纖維性膿性分泌物，逐漸使胎兒胎盤與母體胎盤松離，引起胎兒營(yíng)養(yǎng)障礙并使母畜發(fā)生流產(chǎn)。布魯氏菌還可穿過(guò)胎盤屏障進(jìn)入胎衣羊水導(dǎo)致胎兒病變。

4 臨床癥狀

通常犬類感染布魯氏菌病后多呈隱性，尤其是青年犬和未妊娠的犬，以不發(fā)熱和體表淋巴結(jié)腫大為特征，可帶菌排菌兩年以上。出現(xiàn)癥狀的犬有“波浪熱”，但常被犬主忽略，可有關(guān)節(jié)病炎，腱鞘炎，肝、脾腫大，區(qū)域性淋巴結(jié)腫大等，也容易被犬主忽視，少數(shù)可捫及包塊。犬呈乏力、食欲不振，精神狀態(tài)差，煩躁，疼痛部位不讓觸碰，有時(shí)出現(xiàn)跛行。只有妊娠母犬可能表現(xiàn)出稍明顯的癥狀，在妊娠前、后期發(fā)生無(wú)征兆的流產(chǎn)，全身淋巴結(jié)腫大，乳房炎。母犬流產(chǎn)后可能發(fā)生胎衣滯留和子宮內(nèi)膜炎、陰道炎，從陰道流出惡臭的淡褐色或灰綠色黏性分泌物，胎兒多為死胎，胎水多清朗，但有時(shí)混濁含有膿樣絮片。偶見患肝炎、肺炎、心內(nèi)膜炎等的病變活產(chǎn)胎兒，存活時(shí)日較短?；疾」疾G丸炎、附睪炎、睪丸萎縮、前列腺炎和陰囊皮炎等，患病公犬常焦躁不安舔蹭陰囊皮膚。由于需與此病鑒別診斷的病征較多，且多數(shù)癥狀易被犬主忽視，因此單純根據(jù)臨床癥狀是難以確診的，必須依靠細(xì)菌學(xué)和血清學(xué)檢驗(yàn)?？刹扇×鳟a(chǎn)胎兒、血液、尿、陰道分泌物、精液及乳汁等送檢。

5 診斷

5.1 細(xì)菌學(xué)檢測(cè)

5.1.1 科茲羅夫斯基染色法

可取流產(chǎn)胎兒的淋巴結(jié)、肝、脾、肺、胃內(nèi)容物或胎衣、羊水、胎盤等組織，也可用犬的陰道分泌物、乳汁、精液、血液、尿液等制成抹片，用科茲羅夫斯基染色法染色鏡檢，查出紅色的球狀或短小桿菌便可確診，而其他菌為藍(lán)色。

5.1.2 病原分離培養(yǎng)

新鮮病料可用胰蛋白大豆瓊脂面或血液瓊脂斜面、血清葡萄糖瓊脂、肝湯瓊脂斜面等培養(yǎng)基培養(yǎng)；陳舊病料或污染病料，可用選擇性培養(yǎng)基培養(yǎng)如Farrell氏培養(yǎng)基。培養(yǎng)時(shí)，一份在普通條件下，另一份放于含有5%～10%二氧化碳的環(huán)境中，以37℃恒溫培養(yǎng)7～10d。然后通過(guò)布魯氏菌的形態(tài)、生長(zhǎng)特性、染色、菌落形態(tài)和氧化酶及過(guò)氧化氫酶試驗(yàn)、單價(jià)特異性抗血清凝集試驗(yàn)、抗布魯氏菌多克隆抗體玻片凝集試驗(yàn)，來(lái)鑒定布魯氏菌。

5.2 血清學(xué)檢測(cè)

（1）試管凝集試驗(yàn)（SAT）是經(jīng)典的常規(guī)血清學(xué)檢測(cè)方法，檢測(cè)費(fèi)用低、簡(jiǎn)便、快速。但可能出現(xiàn)假陽(yáng)性，所以不適宜單獨(dú)應(yīng)用確診；

（2）巰基乙醇快速載玻片凝集試驗(yàn)（MERSAT）是鑒別動(dòng)物未受布魯氏桿菌感染的最好方法，陰性結(jié)果表明動(dòng)物未受感染；

（3）虎紅平板凝集試驗(yàn)（RBPT）診斷布魯氏菌病符合率為95.92%?？焖倜舾?，是國(guó)內(nèi)外普遍的初篩方式。但不能確定持續(xù)感染，還是耐過(guò)，只能推斷感染過(guò)[8]；

（4）全乳環(huán)狀試驗(yàn)（MRT）?；⒓t平板凝集試驗(yàn)與全乳環(huán)狀試驗(yàn)結(jié)合判斷成為國(guó)際貿(mào)易和奶牛布魯氏菌病檢測(cè)中的初篩方法；

（5）補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)（CFT）是布魯氏菌病血清學(xué)診斷最重要的技術(shù)之一，可確診布魯氏菌病，但操作煩瑣、費(fèi)時(shí)。適用于初篩出的陽(yáng)性血清樣品復(fù)核確診；

（6）酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）比補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)操作方便，準(zhǔn)確率與補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)相差不多?？梢宰鳛楹Y選試驗(yàn)也可以作為確定試驗(yàn)，是大家公認(rèn)的一種方便有效的診斷方法。

（7）熒光偏振試驗(yàn)（FPA），現(xiàn)僅用于布魯氏菌研究性試驗(yàn)。

6 治療

治療原則應(yīng)為多療程，早期、足量、聯(lián)合給藥。多休息補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)，給予多維生素，高熱量，易消化飲食，維持水及電解質(zhì)平衡。用藥時(shí)可先做藥敏試驗(yàn)，篩選出敏感的藥物以供參考。一般使用的藥物組合有利福平+多西環(huán)素、利福平+多西環(huán)素、利福平+鏈霉素、利福平+喹諾酮類、利福平+四環(huán)素、多西環(huán)素+復(fù)方新諾明、鏈霉素+多西環(huán)素、四環(huán)素+氨基糖苷、米諾環(huán)素+雙氫鏈霉素、四環(huán)素+鏈霉素。

我國(guó)中醫(yī)中藥治療布魯氏菌病效果也較為明顯，但受犬類服用中藥不易限制沒有很好的臨床應(yīng)用。中醫(yī)認(rèn)為布魯氏菌病急性期系外感濕熱病邪，內(nèi)外相引而致，慢性期因久病正氣耗損而導(dǎo)致正虛邪盛，風(fēng)、濕、寒三氣雜合而為痹所致，表現(xiàn)為虛證、痹證、血瘀和濕熱等，治療應(yīng)辨證施治，采用扶正固本、益痹活絡(luò)、活血化瘀、清熱利濕等治療。清營(yíng)湯合三仁湯加減，甘露消毒丹加減，獨(dú)活寄生湯加減等方劑都可以用于布魯氏菌病的治療。中國(guó)預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院流行病學(xué)研究所用白芷、連翹、川芎、甘草、木瓜、黃連、肉桂、雙花、牛夕、金蟲、生地、防風(fēng)、乳香、地骨皮、白芍、當(dāng)歸、麥冬、甘草、青陳皮等組方治療布魯氏菌病190例，更是有效率達(dá)93.68%。

7 預(yù)防措施

養(yǎng)寵物犬應(yīng)定期給犬做血清學(xué)檢查以及健康檢查。飼養(yǎng)肉犬應(yīng)經(jīng)常消毒犬舍，病犬、孕犬與其他犬隔開飼養(yǎng)，定期檢疫。種犬在配種前應(yīng)做血清學(xué)化驗(yàn)和體檢確保健康，流產(chǎn)的犬要進(jìn)行細(xì)菌學(xué)檢測(cè)和血清學(xué)檢測(cè)，查明流產(chǎn)原因。感染布魯氏菌的寵物應(yīng)該被隔離，減少感染人或其他犬的機(jī)會(huì)。對(duì)病犬的犬舍、用具、活動(dòng)場(chǎng)所應(yīng)用布魯氏菌敏感的消毒劑進(jìn)行徹底消毒。對(duì)流產(chǎn)的胎兒、羊水、胎衣、污染物等應(yīng)無(wú)害化處理。治愈的種犬應(yīng)被淘汰，不能再留作種用。一般情況下對(duì)感染布魯氏菌病的犬實(shí)施安樂(lè)死，若犬主不舍應(yīng)積極治療病犬，并且要認(rèn)識(shí)到布魯氏菌病會(huì)傳染給人。犬主要提高警惕，接觸病犬時(shí)做好防護(hù)措施，戴護(hù)目鏡、穿防護(hù)衣、戴口罩、手套，皮膚有傷口時(shí)暫時(shí)避免接觸病犬。犬主可進(jìn)行疫苗免疫，但因可能會(huì)出現(xiàn)高度皮膚過(guò)敏甚至病理改變，且接種后產(chǎn)生的抗體血清學(xué)檢測(cè)時(shí)不易與染病鑒別所以不主張使用菌苗接種。

[1] 齊海霞，張海云，張宛婧，等.寵物犬布魯氏菌病的現(xiàn)狀與防控[J].中國(guó)畜牧獸醫(yī)文摘，2013，29（8）：110-113.

[2] 王季秋.布魯氏桿菌病病原學(xué)[J].中國(guó)地方病防治雜志，2009，4 （3）：6.

[3] 劉倩宏.布魯氏菌膜相關(guān)蛋白的原核表達(dá)和抗原性鑒定[D].中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)，2007.

[4] 鄧海云.柳州市布魯士桿菌病調(diào)查及綜合防控對(duì)策探討[D].南京農(nóng)業(yè)大學(xué)，2007.

[5] 張慧，張喜悅，范偉興.法國(guó)布魯氏菌病參考實(shí)驗(yàn)室的血清學(xué)檢測(cè)方法[J].中國(guó)動(dòng)物檢疫，2013，30（10）：34-37.

袁田慧子（1988-），本科，湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院。

楊青（1972-），教授，湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院教授。