董 威董玉君

（1 遼寧省北票市中醫(yī)院眼科，遼寧 北票 122100；2 遼寧省朝陽市中心醫(yī)院眼科，遼寧 朝陽 122000）

羊膜并自體角膜緣干細(xì)胞移植顯微技術(shù)治療復(fù)發(fā)性翼狀胬肉的臨床觀察

董 威1董玉君2

（1 遼寧省北票市中醫(yī)院眼科，遼寧 北票 122100；2 遼寧省朝陽市中心醫(yī)院眼科，遼寧 朝陽 122000）

目的探討羊膜并自體角膜緣干細(xì)胞移植顯微術(shù)治療復(fù)發(fā)性翼狀胬肉的臨床效果。方法采用羊膜聯(lián)合自體角膜緣干細(xì)胞于手術(shù)顯微鏡下移植，治療復(fù)發(fā)的翼狀胬肉28例28眼。結(jié)果28例中27例有效，有效率96.43%，1例無效，無效率3.57%。結(jié)論羊膜并自體角膜緣干細(xì)胞移植治療復(fù)發(fā)性翼狀胬肉療效顯著，值得推廣。

羊膜；角膜緣干細(xì)胞；復(fù)發(fā)的；翼狀胬肉

復(fù)發(fā)性翼狀胬肉是后天性角膜緣功能障礙導(dǎo)致的眼表疾病[1]，是眼表面完整性和屏障功能遭到損害所致的障礙性眼表病。翼狀胬肉手術(shù)一旦復(fù)發(fā)，發(fā)展會更快，二次或多次手術(shù)難度更大，隨之而來的手術(shù)并發(fā)癥會更多。為此，我們對復(fù)發(fā)性翼狀胬肉（以下簡稱胬肉）采用羊膜聯(lián)合自體干細(xì)胞于顯微條件下手術(shù)，收到了很好的手術(shù)效果，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：本組為2012年～2013年我科住院胬肉的病例，共28例28眼，其中男12例12眼，女16例16眼，均為單眼，年齡41～68歲，一次術(shù)后復(fù)發(fā)19例19眼，二次以上手術(shù)復(fù)發(fā)9例9眼。

1.2 羊膜的制備：①羊膜取自剖宮產(chǎn)孕婦的胎盤，產(chǎn)前進(jìn)行血清學(xué)檢查，無人類免疫缺陷病毒（HIV）、乙肝病毒（HBV）、丙肝病毒（HCV）及梅毒等疾病的健康產(chǎn)婦。②產(chǎn)后立即取出胎盤，無菌條件下，用生理鹽水將其沖洗干凈。③通過羊膜與絨毛膜兩層組織之間的空隙進(jìn)行鈍性分離獲取羊膜。④放入含有400 μ/mL慶大霉素和二性霉素B的平衡鹽溶液中浸泡5～10 min，將其上皮面朝上，平鋪于纖維過濾紙上，根據(jù)需要可剪成4 cm×5 cm或4 cm×4 cm大小塊狀，卷成小筒，置于已滅菌后裝有BMEM甘油瓶中密封，放入4 ℃冰箱中保存。⑤使用時用無菌生理鹽水沖去甘油，放入含有400 μ/mL慶大霉素和二性霉素B的平衡鹽溶液中，復(fù)水30 min備用；⑥所用羊膜保存期為30 d。

1.3 手術(shù)方法：①所有手術(shù)均在顯微鏡下操作。②術(shù)前5 d術(shù)眼持續(xù)點抗生素眼藥水。③手術(shù)步驟：a.術(shù)眼點0.4%倍諾喜表麻，2%利多卡因0.2 mL于胬肉頸部注入作浸潤麻醉；b.斜視鉤于胬肉頸部插入提起，然后用刀片將頭部分離，刮除角膜、鞏膜表面復(fù)發(fā)胬肉所遺留的瘢痕，松解粘連球結(jié)膜，剪去胬肉和病變的結(jié)膜，暴露鞏膜，電凝止血；c.將備制的羊膜平鋪于鞏膜暴露部（上皮面朝上），將羊膜各邊置于球結(jié)膜下，四角用10-0尼龍線固定縫合后，再連同結(jié)膜—羊膜—淺層鞏膜縫合以固定羊膜；d.于下方球結(jié)膜注入0.1 mL 2%利多卡因后，沿角膜緣切除4 mm×5 mm結(jié)膜瓣，上皮面朝上，平鋪于羊膜表面，同樣用10-0尼龍線縫合固定于結(jié)膜—羊膜—淺層鞏膜上；e.術(shù)畢涂妥布霉素地塞米松眼膏，加壓包扎24 h，每天換藥，周身靜點抗生素和地塞米松，術(shù)眼點抗生素及皮質(zhì)類固醇眼藥水，10 d拆線。

2 結(jié) 果

2.1 療效判定：①有效：角膜創(chuàng)面愈合、透明光滑，結(jié)膜無新生血管及纖維組織增生，熒光素染色不著色。②無效：結(jié)膜新生血管和纖維組織增生，角膜區(qū)有新生血管和翼狀胬肉侵入。

2.2 療效：術(shù)后隨訪1～12個月，28例患者有27例1周內(nèi)羊膜均有不同程度水腫，呈灰白色。1周～10 d水腫消退，角膜逐漸透明，羊膜逐漸溶解，1～2個月時吸收，隨訪期內(nèi)角膜、結(jié)膜創(chuàng)面光滑，結(jié)膜上皮覆蓋平整，無明顯新生血管和纖維增生，1例于術(shù)后7個月時再次復(fù)發(fā)，本組手術(shù)成功率為96.43%，復(fù)發(fā)率3.57%。

3 討 論

近年來，應(yīng)用羊膜移植治療翼狀胬肉多見報道，其手術(shù)在預(yù)防胬肉的復(fù)發(fā)上也收到了良好的效果。但專門應(yīng)對術(shù)后復(fù)發(fā)胬肉再次手術(shù)治療且聯(lián)合應(yīng)用羊膜、角膜緣干細(xì)胞的報道較少。為此，我們開展了羊膜并角膜緣干細(xì)胞移植治療復(fù)發(fā)性胬肉，取得了較好的效果。

研究表明，翼狀胬肉發(fā)病基礎(chǔ)源于角膜緣干細(xì)胞功能障礙[2]。而復(fù)發(fā)性翼狀胬肉特別是多次術(shù)后復(fù)發(fā)病例，究其原因，是常規(guī)的手術(shù)加重了角膜緣干細(xì)胞功能的損害，使正常的角膜上皮不能重建，角膜上皮結(jié)膜化，結(jié)膜新生血管化，再次出現(xiàn)纖維組織增生，翼狀胬肉復(fù)發(fā)。

羊膜無血管及淋巴管，抗原性低，其分泌的多種細(xì)胞因子和含有大量的膠原酶抑制劑，均具有抗炎、抗纖維化，抗新生血管形成、促進(jìn)傷口愈合的作用。但是羊膜對角膜緣干細(xì)胞完全或嚴(yán)重?fù)p傷者，不能替代其功能[3]。需要通過供體角膜緣干細(xì)胞的增生、分化和細(xì)胞的向心性移動來修復(fù)受損的角膜表面，以阻止新生血管的侵入。帶有角膜緣干細(xì)胞的結(jié)膜瓣易于辨認(rèn)上皮面，其成活率高，不發(fā)生排異反應(yīng)，且能較迅速的發(fā)生干細(xì)胞增殖，并逆轉(zhuǎn)基底細(xì)胞的異常代謝，恢復(fù)角膜緣干細(xì)胞的數(shù)量，修復(fù)創(chuàng)傷處角膜上皮，阻止結(jié)膜上皮的移行生長，控制翼狀胬肉的再次復(fù)發(fā)[4-6]。

根據(jù)我們的經(jīng)驗和觀察，施行該手術(shù)應(yīng)注意以下幾點：①手術(shù)必須在顯微條件下進(jìn)行，術(shù)中才能保證將角膜和鞏膜表面瘢痕、纖維增生組織清除干凈；②術(shù)中徹底止血，防止植片下積血影響組織愈合；③羊膜、結(jié)膜上皮面必須朝上?？p合時固定淺層鞏膜，以防脫離。

[1]陳梅珠,楊麗霞.角膜緣干細(xì)胞移植術(shù)與結(jié)膜瓣移植術(shù)治療翼狀胬肉療效比較[J].中國實用眼科雜志,2001,19(12):906.

[2]劉祖國.眼表疾病學(xué)[M].2版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2003:362.

[3]郭青,周朝輝.羊膜和角膜緣干細(xì)胞移植治療眼表疾病臨床觀察[J].中國實用眼科雜志,2006,12(24):1247-1249.

[4]林文雅,黃麗娟,張招德.翼狀胬肉的不同術(shù)式對角膜上皮修復(fù)及復(fù)發(fā)率的影響[J].中國實用醫(yī)刊,2014,41(17):50-52.

[5]高建紅.月型隧道刀在翼狀胬肉切除自體角膜緣干細(xì)胞移植手術(shù)中的應(yīng)用[J].中國醫(yī)藥指南,2014,12(9):166-167.

[6]伍繼光,楊明善.不同手術(shù)方式治療原發(fā)性翼狀胬肉療效分析[J].中國眼耳鼻喉科雜志,2014,14(2):109-110.

R777.33

B

1671-8194（2015）04-0182-01