施 堅(jiān)
(安徽池州陵陽(yáng)鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)服務(wù)中心,安徽池州 242801)
鉬對(duì)淮南麻雞胸腺指數(shù)和胸腺結(jié)構(gòu)的影響
施 堅(jiān)
(安徽池州陵陽(yáng)鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)服務(wù)中心,安徽池州 242801)
1.1 試驗(yàn)動(dòng)物與設(shè)計(jì)
選取1日齡健康淮南麻雞240只,正常飼喂至1周后隨機(jī)分為6組,每組40只,每組4個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)10只雞。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧,飲用清水,試驗(yàn)組(分別為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組)在飲用清水中分別添加10%、20%、40%、80%、160%的鉬酸鈉,飼喂42 d。每2周屠宰1次,即在21日齡、35日齡、49日齡各屠宰一次,每次每組隨機(jī)抽取10只雞進(jìn)行屠宰試驗(yàn);采集胸腺稱其凈質(zhì)重并做石蠟切片染色鏡檢。
1.2 飼養(yǎng)管理
試驗(yàn)期為42 d,對(duì)照組與試驗(yàn)組均在同一環(huán)境采用立體籠養(yǎng)飼喂,基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平相同。
1.3 試驗(yàn)試劑與儀器
Na2MoO4·2H2O(分析純)、85%乙醇、95%乙醇(Ⅰ、Ⅱ)、100%乙醇(Ⅰ、Ⅱ)、醇苯、二甲苯(Ⅰ、Ⅱ)、石蠟(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)、染色缸、載玻片、蓋玻片、光學(xué)顯微鏡、瑞氏染液、樹(shù)膠、切片機(jī)、展片機(jī)、毛筆、烤箱、解剖刀、手術(shù)剪、鑷子、解剖臺(tái)、臺(tái)秤、電子秤、瓷盤(pán)、骨剪、承血盆和記錄本等。
1.4 試驗(yàn)數(shù)據(jù)指標(biāo)測(cè)定
1.4.1 胸腺指數(shù)測(cè)定
剖殺前,對(duì)雞進(jìn)行空腹體重測(cè)定;剖殺后立即取出雞胸腺去脂肪、結(jié)締組織等稱其凈重,計(jì)算胸腺指數(shù):胸腺指數(shù)=胸腺重/雞活重。
1.4.2 胸腺形態(tài)及組織學(xué)檢查
每2周每組隨機(jī)抽取10只剖殺,立即取胸腺觀察其形態(tài)學(xué)變化,并立即以10%福爾馬林溶液進(jìn)行固定,然后石蠟包埋,切片、HE染色后鏡檢,觀察其組織病理學(xué)變化。
1.5 試驗(yàn)方法
1.5.1 樣本的采集
在試驗(yàn)第14 d,28 d,42 d時(shí)分別每組抽取10只淮南麻雞剖殺,剖殺前對(duì)雞進(jìn)行空腹體重測(cè)定,剖殺后立即取出胸腺去脂肪、結(jié)締組織等稱其凈重量,并分別記錄,并立即將胸腺以10%福爾馬林溶液進(jìn)行固定,石蠟包埋,切片后HE染色鏡檢。
1.5.2 切片制作
將新鮮去取出的胸腺樣本放入10%中性福爾馬林固定液中做固定處理。以乙醇從低濃度到高濃度脫水后,再以二甲苯溶液作透明處理,最后將組織放入石蠟液中浸漬。
1.6 HE 染色
H.E染色法即蘇木素-伊紅染色法的簡(jiǎn)稱。貼好的切片因有石蠟不能被直接染色,需要先將貼片在二甲苯中經(jīng)行脫蠟處理,然后在進(jìn)行脫苯、復(fù)水、染色、脫水、透明、封固。
1.7 封片
HE染色后的切片加入香柏油封片處理。
1.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
試驗(yàn)數(shù)據(jù)使用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)處理軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行ANOVA單因子方差分析并使用Duncan多重比較,數(shù)據(jù)均以平均數(shù)(x)±標(biāo)準(zhǔn)差(S)表示。
2.1 鉬對(duì)雞胸腺質(zhì)量的影響從表1看出,在14日齡階段,Ⅰ組與Ⅲ組、Ⅳ組、Ⅴ組差異極顯著;與對(duì)照組和Ⅱ組差異顯著;對(duì)照組、Ⅱ組與Ⅲ組、Ⅳ組、Ⅴ組差異顯著;在28日齡和42日齡階段,各組之間沒(méi)有顯著差異。在14日齡時(shí),Ⅰ組與Ⅲ組、Ⅳ組、Ⅴ組差異極顯著,其胸腺質(zhì)量明顯高于其他三組;Ⅱ組胸腺質(zhì)量顯著高于Ⅲ組、Ⅳ組、Ⅴ組。
表1 鉬對(duì)胸腺質(zhì)量的影響 g/kg
2.2 鉬對(duì)胸腺指數(shù)的影響從表2可以看出,在14日齡階段,對(duì)照組與Ⅴ組差異顯著,Ⅰ組與Ⅴ組差異顯著;28日齡階段各組間無(wú)顯著差異;42日齡階段,Ⅴ組與Ⅱ組、Ⅲ組差異顯著。14日齡時(shí)在飲水中添加160%的Ⅴ組的胸腺臟器指數(shù)顯著低于空白對(duì)照組,其他組與對(duì)照組無(wú)顯著差異;在28日齡時(shí)試驗(yàn)組與對(duì)照組的胸腺臟器指數(shù)均無(wú)顯著差異;42日齡時(shí),對(duì)照組與各組差異不顯著,Ⅴ組胸腺臟器指數(shù)顯著高于Ⅱ組、Ⅲ組。
表2 鉬對(duì)胸腺指數(shù)的影響 g/kg
[1] 楊自軍,龍塔等,鉬的生物學(xué)功能及其在動(dòng)物生產(chǎn)中的作用[J].河南科技大學(xué)學(xué)報(bào)(農(nóng)學(xué)版),2004,24(2):40-43.