北伐是孫中山的一貫主張，蔣介石從1926年初就開始極力推動北伐計劃。但莫斯科明確指示要阻止北伐，為此召支持北伐的鮑羅廷、加侖回國，由季山嘉接任。季山嘉反對北伐，并削減黃埔軍校的經(jīng)費、改編軍隊，引起蔣介石的猜疑，汪精衛(wèi)傾向季山嘉的態(tài)度又增加了蔣的疑懼。3月18日晚，商輪定安號遭匪搶劫向黃埔軍校求救，軍校值班人員電請駐省辦事處派船，駐省辦事處主任向海軍局求助，海軍局當夜即令中山艦出動。次日清晨，中山艦駛往黃埔不久，一俄國考察團提出上午要參觀中山艦，海軍局局長、共產(chǎn)黨員李之龍請示蔣介石，問可否調(diào)回中山艦。此時，汪精衛(wèi)又幾度詢問蔣何時回黃埔，而蔣赴俄的護照又剛好得到批準，于是蔣猜疑：中山艦開黃埔意在把他架往蘇聯(lián)，是倒蔣的陰謀。20日上午，蔣下令逮捕李之龍，占領(lǐng)中山艦，廣州部分地區(qū)戒嚴，一度收繳蘇聯(lián)顧問衛(wèi)隊的武器；下午蔣意識到并不存在特別危險，就取消了戒嚴，交還武器并放人。周恩來當天也并未被軟禁，第一軍中的共產(chǎn)黨員沒有受到?jīng)_擊。事件當天，蔣介石十分緊張，以致見到何香凝時“竟像小孩子般伏在寫字臺上哭了”。事后，蔣不得不向蘇聯(lián)顧問百般道歉，但是，蘇方不僅沒有追究，而且痛快地答應(yīng)了調(diào)走季山嘉的要求。如果說，事件對蔣的心理產(chǎn)生什么重要影響，那么可以肯定，蔣對用強力解決內(nèi)部糾紛，實現(xiàn)政治目的留下了深刻印象。5月5日，國民黨二屆二中全會召開，包括毛澤東、惲代英、林伯渠在內(nèi)的共產(chǎn)黨員，對整理黨務(wù)案都采取了相當合作的態(tài)度。蔣介石提出整理黨務(wù)案，目的是限制共產(chǎn)黨發(fā)展，確保自己和國民黨的政治生命和前途，還不是要馬上與共產(chǎn)黨分手。在他為退出第一軍的黨代表舉行的宴會上，仍試圖消除兩黨黨員的沖突，北伐開始后，他重新啟用一批共產(chǎn)黨員參加第一軍工作，如蔣先云等。