王 玲,孫友德,劉錫武,孫國強*
(1.青島農(nóng)業(yè)大學動物科技學院,山東青島266109;2.青島市畜牧獸醫(yī)研究所,山東青島266100)
酵母培養(yǎng)物對奶牛尿中嘌呤衍生物排出量和產(chǎn)奶性能及氮排泄的影響
王 玲1,孫友德2,劉錫武2,孫國強1*
(1.青島農(nóng)業(yè)大學動物科技學院,山東青島266109;2.青島市畜牧獸醫(yī)研究所,山東青島266100)
本試驗旨在研究酵母培養(yǎng)物(YC)對奶牛尿中嘌呤衍生物排出量、產(chǎn)奶性能及氮排泄的影響。選取年齡、體重、產(chǎn)奶量及泌乳期(135±15)d相近的荷斯坦奶牛40頭,分為4組,對照組和3個試驗組每頭每天分別添加0、20、25、30 g酵母培養(yǎng)物,隨全混合日糧(TMR)飼喂,測定尿中嘌呤衍生物排出量、產(chǎn)奶量、乳成分及氮排泄等指標。結果表明:日糧中添加YC可顯著提高干物質采食量(<0.05);試驗組尿中嘌呤衍生物排出量極顯著高于對照組(<0.01),分別比對照組提高22.60%、34.43%、26.65%;試驗組日均產(chǎn)奶量極顯著高于對照組(<0.01),分別比對照組提高12.75%、12.69%、10.25%;YC能顯著提高乳脂率和乳蛋白率(<0.05),顯著降低牛奶體細胞數(shù)(<0.05);試驗組氮排泄量顯著低于對照組(<0.05),比對照組分別降低7.02%、11.06%、9.25%。由此可見,在本試驗條件下,綜合考慮奶牛尿中嘌呤衍生物排出量、產(chǎn)奶性能及氮排泄等指標,YC添加量以每頭每天25 g為最佳。
酵母培養(yǎng)物;尿中嘌呤衍生物;奶牛;產(chǎn)奶性能;氮排泄
奶牛飼養(yǎng)規(guī)?;⒓s化程度的提高導致大量未被利用養(yǎng)分排泄到環(huán)境中,遠超出周邊土地的環(huán)境承載力,其中奶牛所產(chǎn)生的糞污中大量的氮元素被公認為是導致環(huán)境污染的重要因素之一。雖然對家畜糞污的無害化處理可以減輕氮素對環(huán)境的污染,但其高昂的成本使該方法難以在奶牛養(yǎng)殖企業(yè)中全面推廣應用,而通過營養(yǎng)調控手段提高氮素利用率、減少氮排泄是解決奶牛養(yǎng)殖過程中氮素對環(huán)境污染的成本較低且具有推廣意義的途徑。酵母培養(yǎng)物(yeast culture,YC)是酵母菌在特定培養(yǎng)基上經(jīng)充分厭氧發(fā)酵后生產(chǎn)的微生態(tài)制品,該產(chǎn)品再經(jīng)厭氧發(fā)酵后含有豐富的維生素、礦物質、酶、未知生長因子及一些重要的輔助因子。孫滿吉等[1]直接飼喂奶牛YC后發(fā)現(xiàn)瘤胃揮發(fā)性脂肪酸、瘤胃液中細菌總數(shù)等瘤胃內環(huán)境指標顯著提高。吳小燕等[2]研究發(fā)現(xiàn),在日糧中添加YC等微生物能顯著提高牛奶乳脂率和乳蛋白率、提高奶牛產(chǎn)奶性能。目前,YC在奶牛上的研究主要在提高產(chǎn)奶性能方面,而尚未見就YC對奶牛尿中嘌呤衍生物排出量、產(chǎn)奶性能和氮排泄的影響同時進行研究的報道。本試驗擬通過在奶牛飼糧中添加不同水平YC,探討YC對奶牛尿中嘌呤衍生物排出量、產(chǎn)奶性能、氮排泄的影響,以期在提高奶牛產(chǎn)奶性能的同時提高奶牛微生物蛋白產(chǎn)量、節(jié)省蛋白質飼料資源和降低奶牛氮排泄,為實現(xiàn)奶牛業(yè)的健康可持續(xù)發(fā)展提供技術參考。
1.1 試驗設計 本試驗采用單因素隨機區(qū)組設計,選用青島奧特奶牛原種場體況良好、日均產(chǎn)奶量、胎次、體重、泌乳天數(shù)(135±15)d相近的40頭荷斯坦奶牛,分為4組,每組10頭。對照組和3個試驗組每頭每天分別添加0、20、25、30 g酵母培養(yǎng)物,隨全混合日糧(TMR)飼喂,整個試驗為70 d,其中預試期14 d,正試期56 d。試驗所用酵母培養(yǎng)物購自北京某公司。
1.2 飼養(yǎng)管理 試驗牛采用舍飼飼養(yǎng),采用利拉伐擠奶設備日擠奶2次(3∶30、15∶00),日飼喂TMR飼糧3次(04∶00、11∶00、16∶00),確保奶牛每天必須有20 h以上可以接觸到TMR料。奶牛采食后在運動場自由運動和飲水,常規(guī)光照、驅蟲和管理。TMR組成及其營養(yǎng)成分見表1。
表1 TMR料組成和營養(yǎng)成分(干物質基礎)
1.3 試樣采集及指標測定
1.3.1 尿樣 分別在預試期開始、正試期第28天、試驗結束時采樣3次,均于清晨采用人工接尿的方式采集尿樣,按一定比例加98%濃H2SO4以調整尿液pH值低于3,-20℃保存,以備用凱氏定氮法分析尿中總氮含量、比色法測定嘌吟衍生物含量、苦味酸法測定尿肌酐含量,試劑盒均購自南京建成生物有限公司。以每頭牛每天1 kg體重排出約29 mg尿肌酐測定奶牛排尿量[3]。
1.3.2 飼料樣及糞樣 分別在預試期開始、正試期第28天、正試期結束時采集3次糞樣,均于上午、下午各采集1次混勻,每百克糞樣加10%硫酸25 mL處理樣品后放入烘箱中65℃烘干備用。按四分法收集TMR料樣和犢牛料樣,65℃烘箱中烘干,制成風干樣,粉碎后備用。日糧及糞樣中養(yǎng)分含量測定參照張麗英[4]《飼料分析及飼料質量檢測技術》中的方法。正試期每隔10 d稱1次剩料量,根據(jù)TMR投料量和剩料量計算采食量,通過4N鹽酸不溶灰分法結合采食量測定奶牛的日排糞量。
1.3.3 產(chǎn)奶量與乳成分 產(chǎn)奶量用利拉伐魚骨式擠奶機測定,電子顯示奶量。預試期,正試期每隔5 d記錄1次奶量,每次連記2 d,用其平均值作為該階段日均產(chǎn)奶量。
預試期開始,正試期每隔15 d采樣一次,按早、晚產(chǎn)奶量的比例共收集65 mL乳樣,其中50 mL乳樣加入重鉻酸鉀防腐劑(0.6 mg/mL)混合均勻,4℃冷藏于次日送山東省DHI測定中心,用FOSS乳成分分析儀進行乳糖、乳蛋白、乳脂、乳體細胞數(shù)測定。
1.4 統(tǒng)計分析 正試期內各次采樣所測得的該指標的平均數(shù)為正試期該指標的數(shù)據(jù)。試驗數(shù)據(jù)用Excell軟件進行數(shù)據(jù)的基本處理。采用SPSS 17.0軟件進行單因素方差分析,Duncan′s多重比較進行組間差異顯著性檢驗,以P<0.01和P<0.05作為差異顯著性判斷標準,結果均以平均值±標準誤表示。
瘤胃微生物蛋白(MCP)產(chǎn)量計算公式[5]∶
MCP(g/d)=6.25×(70X)/(0.83×0.116×1000)=6.25×0.727X式中,X為小腸吸收外源性嘌吟的數(shù)量(mmol/d), 70為每mmol嘌吟含氮量(mg/mol),0.83為微生物核酸嘌吟的消化率,0.116為瘤胃微生物總氮中嘌吟氮的比例;6.25為氮換算為蛋白質的平均系數(shù)。小腸吸收外源性嘌吟數(shù)量X的計算公式為∶
式中,Y為尿中嘌吟衍生物的排出量(mmol/d),0.85為牛腸道中吸收的嘌吟轉化為尿中PD的回收率, 0.385BW0.75為PD的內源成分。
2.1 不同水平YC對主要養(yǎng)分采食量的影響 由表2可知,預試期內各組干物質采食量差異不顯著(P>0.05);正試期結束時試驗2組干物質采食量、有機物采食量顯著高于對照組(P<0.05),各試驗組間和試驗1組、3組與對照組間差異均不顯著(P>0.05);試驗2組和3組粗蛋白采食量顯著高于對照組(P<0.05),各試驗組間差異不顯著(P>0.05),試驗1組與對照組無顯著差異(>0.05);各試驗組中性洗滌纖維采食量顯著高于對照組(<0.05),各試驗組間差異不顯著(>0.05);YC對酸性洗滌纖維(ADF)、鈣(Ca)、磷(P)采食量均無顯著影響(>0.05)。
2.2 不同水平YC對尿中嘌吟衍生物(PD)排出量的影響 由表3可知,在PD排出量方面,預試期內各組之間差異不顯著(>0.05),正試期結束時各試驗組的PD排出量極顯著高于對照組(<0.01),各試驗組PD排出量分別比對照組提高22.60%、34.43%、試驗2組顯著高于試驗1組(<0.05),試驗3組與其他兩組差異不顯著(>0.05);各試驗組尿囊素排出量顯著高于對照組(<0.05),試驗3組極顯著高于對照組(<0.01),顯著高于試驗1組(<0.05);各試驗組尿酸排出量顯著高于對照組(<0.05),其中試驗2組極顯著高于對照組(<0.01),顯著高于試驗3組(<0.05);試驗組MCP產(chǎn)量極顯著高于對照組(<0.01),試驗2組極顯著高于試驗1組(<0.01),試驗3組顯著高于試驗1組(<0.05)。
2.3 不同水平YC對奶牛日均產(chǎn)奶量的影響 由表4可知,正試期結束時各試驗組日均產(chǎn)奶量極顯著高于對照組(<0.01),分別比對照組提高12.75%、12.69%、10.25%;各試驗組間差異不顯著(>0.05)。
2.4 不同水平YC對奶牛乳成分的影響 由表5可見,正試期結束時試驗2組乳脂率極顯著高于對照組(<0.01),試驗3組顯著高于對照組(<0.05),各試驗組間無顯著差異(>0.05)。試驗2組乳蛋白率極顯著高于對照組(<0.01),顯著高于試驗1組(<0.05),試驗3組顯著高于對照組(<0.05),試驗3組與1組、2組間無顯著差異(>0.05),試驗1組與對照組間無顯著差異(>0.05)。試驗2組乳體細胞數(shù)顯著低于對照組(<0.05),各試驗組間差異不顯著(>0.05),試驗1組和3組與對照組差異不顯著(>0.05)。YC對乳糖率無顯著影響(>0.05)。
表2 不同水平YC對主要養(yǎng)分采食量的影響kg·d-1
表3 不同水平YC對尿中嘌呤衍生物(PD)排出量的影響
2.5 不同水平YC對奶牛氮排泄的影響 由表6可知,正試期各試驗組氮的總排泄水平顯著低于對照組(<0.05),分別比對照組減少7.02%、11.06%、9.25%,試驗2組氮的總排泄量極顯著低于對照組(<0.01),顯著低于試驗3組與試驗1組(<0.05),試驗3組與試驗1組差異不顯著(>0.05)。氮存留率以試驗2組為最高。
3.1 不同水平YC對營養(yǎng)物質采食量的影響 王聰?shù)龋?]研究發(fā)現(xiàn),YC可以明顯提高營養(yǎng)物質采食量,與本試驗結果一致。酵母經(jīng)發(fā)酵后制成的YC具有芳香的氣味和良好的適口性,有利于提高奶牛采食量;其次YC可以提高纖維的消化率,增加胃腸排空速率,也有利于營養(yǎng)物質采食量的提高。
3.2 不同水平YC對尿中嘌吟衍生物(PD)排出量的影響 小腸中吸收的核酸大部分來自瘤胃微生物蛋白。微生物蛋白在小腸中被降解為嘌吟核酸和堿基,經(jīng)小腸吸收進入血液的嘌吟堿基被合成體組織核酸,未被利用的嘌吟轉化為嘌吟衍生物,隨尿排出體外。尿中排出的嘌吟衍生物數(shù)量和瘤胃微生物核酸數(shù)量、小腸微生物核酸數(shù)量和血液嘌吟衍生物數(shù)量均呈高度相關性。嘌吟代謝的衍生物(尿囊素和尿酸)已被廣泛作為估測瘤胃微生物蛋白合成量的指標[7]。Tripathi等[8]報道,YC可以增強瘤胃內氨氮的利用和MCP合成,能明顯增加進入后段消化道的MCP數(shù)量和小腸中非氨態(tài)氮的吸收利用率。本試驗結果與上述結論一致。MCP能提供反芻動物蛋白質需要量的60%~65%,維持微生物生長最主要的是能量和氮源。因此,能量和氮源的水平、來源對保障瘤胃微生物生長非常重要,其中氨態(tài)氮是瘤胃微生物合成MCP的最主要氮源。Moya等[9]研究發(fā)現(xiàn),YC能降低瘤胃內氨氮濃度,而其濃度的降低并不是由于蛋白質降解或脫氨作用降低引起的,而是YC能刺激瘤胃微生物菌群攝取氨氮并合成蛋白質引起的。YC中的大量營養(yǎng)活性成分可以改變瘤胃發(fā)酵和微生物區(qū)系、瘤胃中有益細菌數(shù)量的增加,瘤胃微生物活力的增強,使得氨氮的利用速度提高,可以利用更多的氨氮合成微生物蛋白,從而使MPC產(chǎn)量增加;微生物活力的增強有利于分解碳水化合物產(chǎn)生更多的能量,而能氮平衡是提高MCP產(chǎn)量的決定因素之一,因此飼喂YC后MCP產(chǎn)量得到顯著提高。
表4 不同水平YC對日均產(chǎn)奶量的影響
表5 不同水平YC對乳成分含量的影響
表6 不同水平YC對氮排泄的影響
3.3 不同水平YC對奶牛日均產(chǎn)奶量的影響 Liu等[10]研究發(fā)現(xiàn),YC可以顯著提高奶牛的產(chǎn)奶量,與本試驗結果一致。YC中含有的釀酒酵母在發(fā)酵的過程中能產(chǎn)生芬芳的氣味,加之良好的適口性有利于提高奶牛采食量。采食量的提高能為奶牛提供更多的可消化營養(yǎng)物質,有利于產(chǎn)奶量的提高。酵母為好氧菌,有利于維持厭氧環(huán)境更有利于其他菌群的活動和瘤胃發(fā)酵,同時YC能刺激瘤胃中纖維分解菌和乳酸利用菌的增殖。纖維分解菌的增殖有利于消化粗纖維,增加瘤胃內乙酸濃度。乳酸利用菌的大量增殖能減緩由于采食引起的瘤胃內pH的急速降低,能更好地維持瘤胃內環(huán)境穩(wěn)定,從而改善瘤胃發(fā)酵,提高營養(yǎng)物質消化利用率,促進泌乳量提高;瘤胃菌群的變化可明顯增加瘤胃內短鏈脂肪酸的濃度、增加血液中的葡萄糖濃度和乙酸濃度,各種乳成分合成前體物的增加對產(chǎn)奶量提高起到積極作用;瘤胃微生物利用氨氮速度的增加,提高了MCP產(chǎn)量,到達小腸中的MCP數(shù)量增加,為奶牛泌乳提供更多的可消化氮源,對產(chǎn)奶量的提高起到積極作用。
3.4 不同水平YC對奶牛乳成分的影響 劉國娟等[11]用YC飼喂奶牛后發(fā)現(xiàn)產(chǎn)奶量得到顯著提高,乳體細胞數(shù)顯著降低,乳脂和乳蛋白差異不顯著。張連忠[12]用YC飼喂泌乳中期奶牛42 d后發(fā)現(xiàn),產(chǎn)奶量提高12.8%,乳蛋白率、乳糖率、乳非脂固形物率、乳密度分別極顯著提高8.2%、6.8%、7.9%、11.7%。大量的研究表明,YC對乳品質的影響結果不盡相同。本試驗結果表明,奶牛飼喂YC后能提高牛奶的乳脂率和乳蛋白率、降低乳體細胞數(shù)。酵母菌在特定培養(yǎng)基上經(jīng)充分厭氧發(fā)酵后含有豐富的B族維生素、氨基酸、有機酸、寡糖、酶、揮發(fā)性脂肪酸、未知生長因子及一些重要的輔助因子,這些物質對補充、改善飼糧的營養(yǎng)價值,起到積極作用。芳香的氣味和良好的適口性,能提高奶牛的采食量,對乳品質改善和生產(chǎn)性能提高起到積極作用;瘤胃內纖維分解菌數(shù)量的增多和活性的增強,能分解產(chǎn)生更多的乙酸,乙酸是乳脂合成的前提,為乳脂的合成提供更多的原料; YC中大量的營養(yǎng)活性成分能改變微生物區(qū)系、增強微生物活力,提高微生物攝取利用氨氮的速度,瘤胃微生物利用氨氮速度的提高能合成更多的MCP,提高了進入小腸中的蛋白數(shù)量,為乳蛋白的合成提供了更多的前提物質。此外,MCP中的氨基酸模式與牛奶中蛋白質中的相似,含有豐富的賴氨酸等必需氨基酸,使得小腸中的氨基酸組成更加平衡,有利于提高蛋白利用率,也有利于乳蛋白的生成。乳體細胞數(shù)是奶牛乳腺健康水平的重要標志,體細胞數(shù)越少,奶牛乳房健康狀況越好,奶牛被細菌感染的可能性越小,奶牛乳房炎的發(fā)病率越低。飼喂YC后,乳體細胞數(shù)下降,說明奶牛乳房健康水平提高。YC中含有β-葡聚糖和甘露聚糖2種活性多糖,能增強機體的免疫力,降低炎癥的發(fā)生,提高乳房健康水平。
3.5 不同水平YC對奶牛氮素表觀消化率及氮排泄的影響 在本試驗中,飼喂YC后奶牛糞尿中的氮含量降低,氮素排泄量降低,氮的有效利用提高。YC能提高瘤胃微生物利用氨氮合成MCP的速度和能力,能把更多的氨態(tài)氮轉化為MCP,減少了瘤胃內氨態(tài)氮的損失,從而減少尿氮的排泄量;酵母菌在瘤胃中的活動能消耗氧氣,從而更好地維持瘤胃的厭氧環(huán)境有利于瘤胃的發(fā)酵,能更好地消化吸收飼料中的粗蛋白成分,提高粗蛋白的消化利用率,利于降低糞中的氮含量;YC中大量的有機酸、維生素、鈣、磷、未知生長因子等營養(yǎng)成分,在瘤胃中能對微生物起到營養(yǎng)作用,從而促進瘤胃微生物的生長繁殖、提高瘤胃內有益菌群的數(shù)量,有利于瘤胃微生物的發(fā)酵,加大發(fā)酵力度,提高飼糧中蛋白的消化、吸收、利用率,減少蛋白的損失;產(chǎn)奶量和乳蛋白率的提高,增加了乳氮的排出量,使更多的蛋白用于生產(chǎn)需要,減少了飼糧中未被利用的蛋白通過糞、尿排出體外而造成的損失。因此,MCP產(chǎn)量的提高、瘤胃微生物生長繁殖的加快,都有利于提高飼糧中粗蛋白的消化率、吸收率和利用率,減少氮排泄量,從而減少氮素對環(huán)境帶來的污染。
在本試驗條件下,綜合考慮奶牛尿中嘌吟衍生物排出量、生產(chǎn)性能及氮排泄等指標,YC添加量以每頭每天25 g為最佳。
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Effects of Yeast Culture on Purine Derivatives Excretion,Milk Performance and Nitrogen Excretion
WANG Ling1,SUN You-de2,LIU Xi-wu2,SUN Guo-qiang1*
(1.College of Animal Science and Technology,Qingdao Agricultural University,Shandong Qingdao 266109,China; 2.Institute of Animal Husbandry and Veterinary Medicine of Qingdao,Shandong Qingdao 266109,China)
This experiment was conducted to determine the effects of yeast culture(YC)on purine derivatives excretion, milk performance and nitrogen excretion.A total of 40 Holstein lactating cows with similar age,weight,milk yield and lactation stage(135±15 day in milk)were divided 4 groups.The supplement of YC in the control and 3 treatment groups was 0,20,25 and 30 g/head/day,respectively.The YC was fed with the total mixed ration(TMR).Purine derivatives excretion,milk yield,milk composition,nitrogen excretion was analyzed.The results showed that the dry matter intake in treatment groups were increased(P<0.01).The purine derivatives excretion in treatment groups was increased by 22.60%,34.43%,26.65%compared to the control group(P<0.01).The cows in treatment groups had 12.75%,12.69%,10.25%greater daily yields of milk than those cows in the control(P<0.01).YC significantly increased milk fat and protein percentage(P<0.05),and reduced somatic cell(P<0.05).The supplernentation of YC in TMR dairy cow reduced nitrogen excretion by 7.02%,11.06%,9.25%compared to control group(P<0.05).Based on the data of purine derivatives,milk yield,milk composition,nitrogen excretion,it could be concluded that the suitable supplement of YC in dairy cow diets was 25 g/head/day for the present study.
yeast culture;purine derivatives;dairy coe;milk performance;nitrogen excretion
S823.5
A文獻標識碼:0258-7033(2015)11-0044-06
2014-11-12;
2015-01-03
山東省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術體系牛產(chǎn)業(yè)創(chuàng)新團隊(SDAIT-12-011-08)
王玲(1990-),女,山東淄博人,碩士研究生,研究方向為反芻動物營養(yǎng),E-mail:xiagnang_66@163.com
*通訊作者:孫國強(1961-),男,教授,碩士生導師,E-mail:qdnydxsgq@126.com