李?。ㄉ綎|省鄒平縣畜牧獸醫(yī)局256200）

犬瘟熱病的臨床診療概述

李健（山東省鄒平縣畜牧獸醫(yī)局256200）

犬瘟熱是由犬瘟熱病毒引起的一種急性高度接觸性傳染病，對(duì)我國養(yǎng)犬業(yè)、毛皮動(dòng)物養(yǎng)殖業(yè)和野生動(dòng)物保護(hù)業(yè)危害巨大。我國近年來發(fā)病率有增長的趨勢。本文對(duì)其臨床診斷與治療進(jìn)行了綜述。

1　犬瘟熱病因

犬瘟熱(caninedistemper, CD)是由犬瘟熱病毒(CDV)引起的犬科、鼬科和熊科動(dòng)物的一種高度接觸性傳染病，是當(dāng)前我國對(duì)養(yǎng)犬業(yè)、毛皮動(dòng)物養(yǎng)殖業(yè)危害最大的疫病之一。犬瘟熱病毒為副粘病毒科麻疹病毒屬，呈圓形或不整形。直徑為100～300nm，含有直徑為15～17nm的螺旋狀核衣殼，成分為基因組RNA和許多核衣殼蛋白亞單位，核衣殼外包被的雙層脂質(zhì)囊膜,由細(xì)胞膜和脂類衍生而來。

2　犬瘟熱診斷

2.1根據(jù)本病的典型癥狀可作出初步診斷病初精神萎靡，食欲不振,初期表現(xiàn)鼻炎和結(jié)膜炎癥狀，眼結(jié)膜潮紅，流淚，鼻流清涕。繼而鼻頭干裂，咳嗽，眼、鼻大量膿性分泌物。約經(jīng)2～3d的緩解期，很快又病情惡化,發(fā)展為肺炎，體溫居高不下，呼吸困難，肺部聽診有啰音和捻發(fā)音。神經(jīng)癥狀是CD的典型癥狀，一般在感染3～4周，全身癥狀好轉(zhuǎn)后數(shù)天開始出現(xiàn)，表現(xiàn)為轉(zhuǎn)圈、共濟(jì)失調(diào)、肌肉痙攣、咬肌反復(fù)節(jié)律性顫動(dòng)等。

2.2病毒分離與鑒定病毒材料取自體溫開始上升期的淋巴組織。在體溫開始上升的病毒血癥早期，淋巴組織感染最為嚴(yán)重,因此最好從淋巴細(xì)胞和淋巴結(jié)中分離病毒。急性發(fā)病或死亡病犬，病毒遍布全身，因此脾臟、胸腺、心臟、膀胱、肺等都能獲得病毒。病料處理后，腹腔接種1～2周齡或斷乳15日的易感幼犬5ml，癥狀明顯，常于發(fā)病后2周死亡;或腦內(nèi)接種易感雪貂0.5～1.0ml，8～12d后鼻流水樣分泌物，不久變?yōu)槟撔?，眼瞼水腫、粘連，嘴邊出現(xiàn)水皰和膿瘡，腳腫，兩趾發(fā)紅，病貂蜷縮，拒食，發(fā)病5～6d后死亡;也可接種于犬腎原代細(xì)胞、雞胚成纖維細(xì)胞或仔犬肺泡巨噬細(xì)胞進(jìn)行分離病毒。

2.3電鏡檢查本法是檢查、確定CDV感染最簡便快速的方法。制備電鏡樣品方法有磷鎢酸(PTA)負(fù)染色法、液相免疫電鏡和超薄切片法。電鏡觀察的最佳病料是糞便,該診斷法從制樣到鏡下觀察,整個(gè)過程只需要2～3h,可用于快速檢查CDV粒子。

2.4包涵體檢查在CDV感染的細(xì)胞中出現(xiàn)一種特征性的形態(tài)學(xué)變化一包涵體(inclusionbody)。這是CD感染的重要標(biāo)志之一，可通過診斷病理學(xué)進(jìn)行檢查，這是診斷CD的重要輔助方法。包涵體存在于膀胱、膽管、膽囊、腎盂及肺和支氣管等上皮細(xì)胞內(nèi)。生前采取鼻勃膜、眼結(jié)膜、膀膚刮取物、陰道豁膜或外周血液等制成涂片，檢查細(xì)胞的胞漿內(nèi)包涵體和核內(nèi)包涵體。包涵體經(jīng)H.E.染色后，在光學(xué)顯微鏡下可見其呈紅色圓形或卵圓形，常見于上皮細(xì)胞的胞漿內(nèi)，一個(gè)細(xì)胞內(nèi)可能有1～10個(gè)包函體(平均2～3個(gè))，邊緣清晰。

2.5血清學(xué)檢測中和試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、熒光抗體法、瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、單克隆抗體等都可用于檢測CDV的抗體及抗原。喬貴林采用固定病毒一稀釋血清法以CD弱毒和自制的高免犬血清建立了檢測CDV抗 體的中和試驗(yàn)。本法特異性較強(qiáng)，敏感性較高，.穩(wěn)定性較好，是目前診斷CD和臨床上監(jiān)測犬免疫力的標(biāo)準(zhǔn)方法，但診斷所需要時(shí)間較長。袁書智應(yīng)用直接FA染色法對(duì)CD生前與死后的檢測，并與電鏡、病毒分離及CPE等檢測方法進(jìn)行比較，結(jié)果表明，用此法檢查外周血液白細(xì)胞中的CDV抗原，可作為CDV是否感染的指標(biāo)以及CD生前和死后診斷方法之一。任文陟等用CD雞胚成纖維細(xì)胞弱毒疫苗免疫綿羊制備瓊脂擴(kuò)散抗體，建立瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)方法，檢測CD病死動(dòng)物肝、脾臟器中的病毒抗原，與電鏡檢查結(jié)果比較，總體符合率為90%(9/10)。袁書智等(1994)應(yīng)用直接熒光抗體染色法檢測外周血液白細(xì)胞中的CDV抗原，發(fā)現(xiàn)該方法可作為CDV感染的指標(biāo)及診斷方法之一。Potgieter用間接法檢測循環(huán)抗體，先將CDV抗原吸咐于固相載體上，隨后加入不同稀釋度的被檢血清，再加酶標(biāo)記的兔抗犬IgG，最后加入底物顯色并判定。張鴻等建立的單克隆抗體夾心ELISA法，對(duì)純化的CDV最小檢出濃度為0.01μg/ml，敏感性接近于N-PCR法，兩種方法的符合率為85%。

2.6分子生物學(xué)檢測近年來，隨著分子生物學(xué)的迅速發(fā)展，通過應(yīng)用核酸探針、原位雜交、反轉(zhuǎn)錄—聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)及基因序列分析等方法，可對(duì)病料中是否含有CDV的特異性核酸進(jìn)行鑒定，從而提高了CDV診斷的準(zhǔn)確性、敏感性和特異性。Yeonsil等針對(duì)CDV Onderstepoort株NP基因的兩個(gè)片段設(shè)計(jì)了兩套引物，應(yīng)用RT-PCR技術(shù)，檢測感染CD犬外周血液單核細(xì)胞中的CDVNP基因，效果尚可。

2.7基因芯片技術(shù)張偉等應(yīng)用基因芯片、ELISA診斷試劑、病毒分離和PCR方法，對(duì)258份疑似病料進(jìn)行了檢測效果的對(duì)比研究。研究結(jié)果表明，應(yīng)用基因芯片方法對(duì)CDV檢測率比ELISA法分別高出23.4%。

3　治療及預(yù)防

3.1治療（1）對(duì)癥治療，控制細(xì)菌繼發(fā)感染，維持體液平衡，增強(qiáng)抵抗力，控制神經(jīng)癥狀。良好的護(hù)理是治療成功的關(guān)鍵。病犬及早應(yīng)用大劑量犬瘟熱高免血清，一般用2～3ml/kg 體重，連用3～4d；同時(shí)，應(yīng)用解熱鎮(zhèn)痛藥物(如30 %安乃近、安痛定、柴胡注射液等)及抗病毒藥物(如病毒靈、病毒唑、聚肌胞等)。（2）根據(jù)不同病型的犬瘟熱采取相應(yīng)的對(duì)癥和支持治療。對(duì)肺炎型犬瘟熱以肺部消炎為主，選用先鋒霉素、林可霉素、丁胺卡那霉素等，并配合喘定、地塞米松等。嘔吐和腹瀉的犬，應(yīng)停止飲食、飲水和經(jīng)口投藥;可給予非腸道給藥的止吐藥。根據(jù)脫水狀況用靜脈或皮下給藥法給予含多離子的等滲液，如乳酸林格氏液。給予維生素B以補(bǔ)充維生素的丟失，并可刺激食欲。對(duì)幼犬可給予一定量的維生素A。在癲癇持續(xù)狀態(tài)最好用非胃腸給藥的安定治療(5～10mg，直腸給藥或緩慢的靜脈輸入)。

3.2預(yù)防目前我國已研制出犬瘟熱疫苗、三聯(lián)苗、五聯(lián)苗、六聯(lián)苗、七聯(lián)苗等，一般45日齡健康幼犬免疫3次，每隔半月免疫1次；滿3月齡健康犬免疫2次，每隔半月免疫1次；成年犬每隔半年免疫1次。第一次接種疫苗前最好先用左旋咪唑驅(qū)蟲。每次接種疫苗前后可投服維生素，以有利于動(dòng)物機(jī)體產(chǎn)生抗體。若疫苗質(zhì)量低劣、保管運(yùn)輸不當(dāng)、免疫程序不合理、未完成2～3次免疫的健康犬與病犬接觸等，均會(huì)導(dǎo)致免疫失敗。據(jù)臨床經(jīng)驗(yàn)，多價(jià)苗因病毒之間相互干擾，免疫效果遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于單價(jià)苗。因此，建議預(yù)防犬瘟熱最好選用單價(jià)弱毒疫苗。

[1] 殷震, 劉景華. 動(dòng)物病毒學(xué)[M]. 第2版. 北京: 科學(xué)出版社, 1997. 756-762.

[2] 王春璈, 李建基.犬病診斷與防治彩色圖冊(cè)[M].濟(jì)南:山東科學(xué)技術(shù)出版社, 2001.

[3] 遇秀玲, 鄭振峰, 田克恭等.犬瘟熱臟器組織中的抗原定位及病理形態(tài)學(xué)觀察[J]. 中國獸醫(yī)雜志, 1994, 6: 7-9.

[4] 喬貴林, 夏咸柱, 王度林等.瘟熱病毒抗體檢測方法的比較研究[J]. 中國獸醫(yī)學(xué)報(bào), 1997, 17(1): 26- 291.

[5] 袁書智,夏咸柱.大瘟熱熒光抗體技術(shù)的應(yīng)用研究仁[J].中國獸醫(yī)學(xué)報(bào),1994,14(2):146-149。

[6]任文陟, 陳秀芬, 母連志等.犬瘟熱瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)方法的建立及初步應(yīng)用[J].中國獸醫(yī)學(xué)報(bào), 1994, 14(4): 398-400.

[7] Potgieter L N, Ajidagba P A. Quantitation of canine distemPer virus and antibodies by enzyme 1inked innunosorbent assay us ng Protein and monoelonal antibody capture[J].J Vet Diagn Inuest . 1989(1):110-115.

[8] 張鴻, 胡傳莉, 賀生中. 犬瘟熱病毒單抗夾心ELISA檢測方法的建立[J]. 揚(yáng)州大學(xué)學(xué)報(bào)(農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版). 2011. 32(4): 15-18.

[9] Yeon-sil shin. 用RT-PCR檢測犬外周血液單核細(xì)胞中犬瘟熱病毒核衣殼蛋白基因[J].國外獸醫(yī)學(xué)-畜禽傳染病, 1997,17(1): 26-29.

[10] 張偉, 吳時(shí)友, 尹燕博等.犬常見傳染病診斷基因芯片的研究與應(yīng)用[J]. 中國獸醫(yī)學(xué)報(bào), 2007, 27(4): 481-489.

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（2015–07–21）