中藥含藥血清實(shí)驗(yàn)動(dòng)物灌胃給藥劑量探討

張宏1，王旭昀2，劉美奇1，秦靈靈3,4,5,孫文3,4,5,劉銅華3,4,5*

(1.北京中醫(yī)藥大學(xué)東方醫(yī)院，北京100078;2.首都醫(yī)科大學(xué)潞河教學(xué)醫(yī)院，北京 101149;

3.北京中醫(yī)藥大學(xué)，北京 100029；4.教育部中醫(yī)養(yǎng)生學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100029；

5.中醫(yī)養(yǎng)生學(xué)北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100029)

摘要：目的探討使用中藥含藥血清進(jìn)行體外實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物灌胃給藥劑量的計(jì)算方法。方法目前關(guān)于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物灌胃給藥劑量的計(jì)算方法有很多種，尚無(wú)統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)合近年相關(guān)文獻(xiàn)中藥含藥血清制備的體外實(shí)驗(yàn)操作中的動(dòng)物灌胃給藥劑量現(xiàn)狀，如按成人、按體重、按固定劑量等計(jì)算方法，探討相對(duì)合理和有效的計(jì)算方法。結(jié)果給藥量計(jì)算應(yīng)參考成人用量、體質(zhì)量、血清濃度等因素計(jì)算。結(jié)論具體計(jì)算公式的選擇要根據(jù)不同的研究?jī)?nèi)容而定。

關(guān)鍵詞：中藥；含藥血清；給藥劑量；計(jì)算方法；動(dòng)物；體外實(shí)驗(yàn)

DOI::10.13463/j.cnki.jlzyy.2015.06.029

中圖分類(lèi)號(hào)：R285.5文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A

文章編號(hào)：1003-5699(2015)06-0623-03

作者簡(jiǎn)介:張宏(1983-)，女，博士研究生，主治醫(yī)師，主要從事內(nèi)分泌、風(fēng)濕免疫疾病的中西醫(yī)治療及實(shí)驗(yàn)研究。

收稿日期:(責(zé)任編輯：趙玉芝2014-09-15)

*通信作者:劉銅華，電話(huà)-13801020306，電子信箱-thliu@tom.com

Analysis of traditional Chinese medicated serum intragastric dose

ZHANG Hong1,WANG Xuyun2,LIU Meiqi1,QIN Lingling3,4,5,SUN Wen3,4,5,LIU Tonghua3,4,5*

(1.Dongfang Hospital of Beijing University of Chinese Medicine,Beijing 100078,China;

2.Luhe Teaching Hospital of Capital Medical University,Beijing 101149,China;

3.Peking University of Chinese Medicine,Beijing 100029,China;

4.Chinese Medicine Key Laboratory of Ministry of Education,Beijing 100029,China;

5.Chinese Medicine Key laboratory of Beijing,Beijing 100029,China)

Abstract:ObjectiveTo discuss the method of caculating Traditional Chinese medicated serum dosage.MethodsAt present about experimental animals to fill the stomach to dose calculation method has a lot of kinds,there is no unified standard.In combination with related literature in recent years of the preparation of traditional Chinese medicine medicated serum in vitro experiments of animals to fill the stomach to dose the status quo,such as weight,according to adults,according to fixed dose calculation method,discusses relatively reasonable and effective calculation method.ResultsWe designed one method of caculating dosage by referencing to age,weight,serum concentration.ConclusionThe specific calculation formula should be selected according to the different research content.

Keywords:traditional Chinese medicine;medicated serum;dosage;computational method;animal;in vitro experiments

中藥或其復(fù)方的含藥血清是指將藥物口飼動(dòng)物后從受體獲得的血清，是屬于中藥血清藥理學(xué)的范疇。中藥血清藥理學(xué)，是指將中藥或中藥復(fù)方經(jīng)口給動(dòng)物灌胃一定時(shí)間后采血、分離血清，并用此含有藥物成分的血清體外實(shí)驗(yàn)的一種實(shí)驗(yàn)技術(shù)。目前采用中藥或其復(fù)方的含藥血清代替原藥物的粗提物作為供試材料進(jìn)行體外實(shí)驗(yàn)的研究方法愈來(lái)愈受到諸多中醫(yī)科研學(xué)者的青睞，然而目前關(guān)于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物灌胃給藥劑量的計(jì)算方法有很多種，各有優(yōu)缺點(diǎn)，尚無(wú)統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)。本文主要討論近年中藥含藥血清體外實(shí)驗(yàn)操作動(dòng)物灌胃給藥劑量現(xiàn)狀，并對(duì)其進(jìn)行歸納總結(jié)，以期為該項(xiàng)試驗(yàn)技術(shù)的應(yīng)用提供參考。

1中藥含藥血清實(shí)驗(yàn)操作動(dòng)物灌胃給藥劑量計(jì)算方法現(xiàn)狀

1.1按固定容量和固定藥物質(zhì)量給藥李潔等[1]制備白花蛇舌草含藥血清時(shí)按固定容量給藥，4 mL/次；黃楓等[2]制備補(bǔ)腎方含藥血清則按固定藥物質(zhì)量給藥，補(bǔ)腎方1.15 kg/L,補(bǔ)腎方藥液2.5 mL相當(dāng)于給藥2.875 g。另有一部分學(xué)者既參考規(guī)定容量給藥法又參考規(guī)定質(zhì)量給藥法，如朱華宇等[3]制備鶴蟾片含藥血清時(shí),鶴蟾片組大鼠按4 mL/kg灌胃，而鶴蟾片混懸液1.365 6 g/kg相當(dāng)于70 kg成年人每日服用鶴蟾片5.098 5 g等效量的3倍。

1.2按單位體質(zhì)量藥物給藥量給藥如張亞杰等[4]制備狼瘡方含藥血清時(shí)按照生藥10 g/(kg·d)灌胃給藥；張士軍等[5]制備復(fù)方六月雪含藥血清時(shí)予復(fù)方六月雪高劑量組6.6 mg/(kg·d)，中劑量組3.3 mg/(kg·d)，低劑量組1.7 mg/(kg·d)；楊柯等[6]在制備廣西藤茶提取物含藥血清時(shí)均根據(jù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體質(zhì)量計(jì)算給藥量，實(shí)驗(yàn)藥物組給予TTF600 mg/kg和陽(yáng)性對(duì)照組給予拉米夫定80 mg/kg；其他學(xué)者如李剛等[7]制備藤茶總黃酮含藥血清時(shí)給藤茶總黃酮組600 mg/kg；司亮等[8]制備胰敏顆粒含藥血清時(shí)，胰敏顆粒組給予胰敏顆?；鞈乙?0 mL/kg(含生藥1.6 g/mL)。

1.3按人體等效劑量倍數(shù)給藥何婉婉等[9]制備補(bǔ)腎健脾方含藥血清時(shí)分別按30.2,60.4,120.8 g/kg劑量灌胃(分別相當(dāng)于50 kg成人所用劑量的5,10,20倍)；陳彩霞等[10]制備金欣口服液含藥血清時(shí)予金欣口服液36 g/(kg·d)(相當(dāng)于人臨床等效劑量的4倍)。還有的學(xué)者按體表面積折算的等效劑量給藥。如陸為民等[11]制備益氣清熱方及其拆方的含藥血清時(shí)按體質(zhì)量表面積折算動(dòng)物的等效劑量，阿莫西林組0.125 g/kg，益氣清熱方組10 g/kg，黃芪組1.25 g/kg，黃芩組0.83 g/kg；常德有等[12]制備阿膠含藥血清時(shí)，按人鼠體表面積法換算,以成人臨床等效劑量的7倍為低劑量組(1 g/kg)，低劑量組的2倍為中劑量組(2 g/kg)，低劑量組的4倍為高劑量組(4 g/kg)。

1.4按臨床成人用量的倍數(shù)給藥如張敏鷗等[13]在制備加味當(dāng)歸補(bǔ)血湯含藥血清予生藥含量相當(dāng)于成人劑量20倍；陸海英等[14]在制備中藥抗纖靈方含藥血清時(shí)灌胃量取10倍于人的有效劑量，即每只大鼠每天灌服藥液3 mL，含生藥6 g，1次/d，共4次;李相輝等[15]在制備復(fù)方鰲甲軟肝方含藥血清時(shí)給藥劑量按人體劑量的3.5,7,14倍配成低、中、高劑量組灌胃給藥。還有學(xué)者按成人給藥中劑量給藥，計(jì)算公式為臨床常用量×動(dòng)物等效面積系數(shù)×培養(yǎng)基內(nèi)血清稀釋度，高、低劑量分別為中劑量的2倍及1/2。如呂曉云等[16]在制備扶正解毒湯(FJD)血清凍干粉時(shí)每次低、中、高劑量FJD血清組分別灌胃以FJD 12,6,3 g/(kg·d)。

1.5其他計(jì)算方法譬如按單位體質(zhì)量容量給藥，頓愛(ài)社等[17]制備蟾酥膠囊含藥血清時(shí)給藥予蟾酥膠囊水溶液6 mL/kg體質(zhì)量劑量灌胃；韓海嘯等[18]制備赤芍水提物藥物血清時(shí)給藥劑量為2 mL/kg(相當(dāng)于人體用量的10倍)；還有按照中藥血清藥理學(xué)研究的通法給藥，給藥劑量為臨床常用量×動(dòng)物有效劑量系數(shù)×培養(yǎng)基內(nèi)的稀釋度。如劉津羽軍等[19]制備紅藤含藥血清時(shí)每日灌胃給予按照臨床給藥量換算好的大鼠給藥劑量給藥。

綜上可以看出現(xiàn)在使用的給藥劑量計(jì)算方法有很多中，其中：1)采用按固定容量給藥、按單位體質(zhì)量容量給藥、按固定藥物質(zhì)量給藥、按單位體質(zhì)量藥物質(zhì)量給藥、既規(guī)定容量又規(guī)定質(zhì)量給藥按等效劑量倍數(shù)給藥的方法只需要規(guī)定容量或質(zhì)量或單位體質(zhì)量容量或單位體質(zhì)量質(zhì)量便可方便進(jìn)行操作，但其依據(jù)性不強(qiáng)，容易出現(xiàn)錯(cuò)誤，不能較準(zhǔn)確反映人與動(dòng)物血清不同之處及效量關(guān)系不同之處[20-21]；2)按等效劑量倍數(shù)給藥、按體表面積折算的等效劑量給藥、按給藥中劑量=臨床常用量×動(dòng)物等效面積系數(shù)×培養(yǎng)基內(nèi)血清稀釋度、按中藥血清藥理學(xué)研究的通法給藥(給藥劑量=臨床常用量×動(dòng)物有效劑量系數(shù)×培養(yǎng)基內(nèi)的稀釋度)、灌胃劑量根據(jù)60 kg體質(zhì)量成人的用藥劑量/體表面積,乘以大鼠相應(yīng)體表面積進(jìn)行計(jì)算的方法給出給藥的計(jì)算公式，相對(duì)有一些依據(jù)，臨床可重復(fù)性操作水平提高，可以相對(duì)有效的評(píng)估反應(yīng)系的效量關(guān)系；3)按給藥相當(dāng)于臨床劑量具體質(zhì)量給藥、按臨床成人用量的倍數(shù)給藥參照臨床實(shí)際用量，給予臨床劑量的成倍，一般10～20倍給藥，相對(duì)計(jì)算明確，但亦容易出現(xiàn)誤差。以上體外實(shí)驗(yàn)操作中給藥劑量計(jì)算方法都需結(jié)合臨床預(yù)實(shí)驗(yàn)情況，進(jìn)一步評(píng)定是否是合適藥量。

2總結(jié)

采用中藥或其復(fù)方的含藥血清代替原藥物的粗提物作為供試材料加入反應(yīng)體系中，進(jìn)行體外實(shí)驗(yàn)，可以提高中藥或其復(fù)方體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果的科學(xué)性、可信性。其優(yōu)點(diǎn)在于：1)進(jìn)行體外實(shí)驗(yàn)的相對(duì)可控性強(qiáng)，藥物效應(yīng)易于檢測(cè)；2)能夠一定程度上避免中藥粗制劑本身的理化性質(zhì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾；3)實(shí)驗(yàn)條件更接近于藥物在體內(nèi)產(chǎn)生效應(yīng)的內(nèi)環(huán)境，可以比較真實(shí)地反映中藥的藥效，深入揭示藥物的作用機(jī)制。但同時(shí)也存在一些缺點(diǎn)：血清藥理學(xué)只有20余年的發(fā)展史，相對(duì)開(kāi)展時(shí)間短暫，缺乏很好的規(guī)范性，制備含藥血清的操作方法不統(tǒng)一，尤其是含藥血清體外實(shí)驗(yàn)操作中動(dòng)物灌胃給藥劑量不統(tǒng)一，沒(méi)有一個(gè)很好的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，相當(dāng)多實(shí)驗(yàn)可重復(fù)性不強(qiáng)。因此含藥血清體外實(shí)驗(yàn)操作中動(dòng)物灌胃給藥劑量的計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)成為挾制其發(fā)展的重要因素。

筆者參考上述方法，結(jié)合前期所作實(shí)驗(yàn)研究推薦使用如下公式作為灌胃給藥量參考：每日給藥量=成人日用量/成人標(biāo)準(zhǔn)體質(zhì)量×人與動(dòng)物等效劑量換算倍數(shù)/培養(yǎng)基中含藥血清濃度。人與大鼠等效劑量換算為人∶大鼠=1∶5～7(多選1∶6)。如：人日用量為1 g/kg體質(zhì)量，大鼠6 g/kg體質(zhì)量即為等效劑量。具體計(jì)算公式的選擇要根據(jù)不同的研究?jī)?nèi)容而定。

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