熊永旺　孫德興

摘 要：通過對(duì)鴨綠沙塘鱧（odontobuds yaluensis）親魚培育、人工催產(chǎn)和孵化技術(shù)的初步研究，旨在完善其規(guī)模化人工繁殖及育苗技術(shù)，為大規(guī)模人工繁殖和養(yǎng)殖奠定基礎(chǔ)。結(jié)果表明，人工催產(chǎn)顯著提高了鴨綠江沙塘鱧的產(chǎn)卵率，即采用兩次肌肉注射，催產(chǎn)劑為促黃體素釋放激素A2（ LHRH 一A2） ，地歐酮（DOM）及絨毛膜促性腺激素（HCG）； 最佳劑量第一次注射：LHRH-A2 4.0 μg/kg、DOM 2.0 mg/kg、HCG 300 IU/kg；第二次注射：LHRH-A2 8.0 μg/kg、DOM 5.0 mg/kg、HCG 1 500 IU/kg，產(chǎn)卵率 20%，產(chǎn)出卵受精率達(dá)61%。采用不間斷充氣和定期換水孵化，孵化率和仔魚成活率分別為40%和53%。

關(guān)鍵詞：鴨綠沙塘鱧；人工繁殖；仔魚培育

鴨綠沙塘鱧（odontobuds yaluensis）是僅分布于鴨綠江水系的一種瀕危名貴魚類，遼寧岫巖縣境內(nèi)河流是該魚主要棲息繁殖地[1-2]，它肉多、刺少、味鮮，歷來被列為高檔水產(chǎn)品[3]。通過市場(chǎng)調(diào)查，近年鴨綠沙塘鱧市場(chǎng)價(jià)格為240～300元/kg，而且供不應(yīng)求。自然環(huán)境中生長(zhǎng)繁殖的鴨綠沙塘鱧，由于人們過度捕撈及水域環(huán)境污染使得鴨綠沙塘鱧的數(shù)量急劇下降，所以鴨綠沙塘鱧人工繁殖勢(shì)在必行。近幾年來，人們才剛剛注意到鴨綠江沙塘醴的研究[4]，國(guó)內(nèi)學(xué)者對(duì)鴨綠沙塘鱧生物學(xué)習(xí)性等雖有初步研究，但對(duì)人工繁殖、孵化技術(shù)研究不多，人工繁殖技術(shù)存在問題也很多，比如：催產(chǎn)劑量、人工孵化條件及提高孵化率等方面。2014年4-6月我們利用塑料大棚開展了鴨綠沙塘鱧的人工催產(chǎn)及孵化試驗(yàn)，旨在探索鴨綠沙塘鱧繁殖方法，為鴨綠沙塘鱧規(guī)?；B(yǎng)殖奠定基礎(chǔ)[5]。

1 材料和方法

1.1 親魚的選擇、培育及雌雄鑒別

1.1.1 親魚的選擇、培育 試驗(yàn)用親魚2013年9月分兩次購入。一分部從本溪市一農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)購入，另一部分從瓦房店市一養(yǎng)殖戶魚池購入，采用充氧運(yùn)輸，運(yùn)回后放入土池塘培育和越冬，親魚體重 80～150 g/尾。2014年4月份采取充氣、升溫方式暫養(yǎng)。試驗(yàn)用魚選擇性腺成熟度較好、無病無傷、體質(zhì)健壯活潑親魚。催產(chǎn)前將親魚在鋪上塑料布的水泥池中培育，培育水溫從自然水溫始每日緩慢升溫，每日投喂少量的小魚，并經(jīng)常巡塘，適當(dāng)加注新水。

1.1.2 親魚的雌雄鑒別 雌魚個(gè)體明顯小于雄魚；雌魚具有圓形的泌尿孔和杏仁形的生殖孔，成熟時(shí)腹部膨大而柔軟，生殖孔微紅外翻；雄魚只有一個(gè)泄殖孔[6]。

1.2 產(chǎn)卵條件及魚巢

產(chǎn)卵池采用水泵抽水產(chǎn)生微水流，并用加熱棒加熱到20 ℃的水進(jìn)行產(chǎn)卵。每隔兩天一換水，保證水質(zhì)良好。產(chǎn)卵用繁殖池：采用長(zhǎng)方形水泥池（將魚巢放入水泥池中進(jìn)行繁殖）[7]。面積2262 m2/池，深1.5 m，用塑料布鋪底，防止這類底棲魚類表皮受傷。魚巢的制作；取長(zhǎng)30 cm，寬25 cm，高12 cm的長(zhǎng)方形遮光塑料槽子，在較小一面做出魚洞，使魚能夠自由進(jìn)出，另一面去掉。做一個(gè)斜面的蓋子與底部夾角約為30°到45°之間。魚巢起到為魚卵附著和隱蔽的作用。所以魚巢材料一定要選用著卵部位略微粗糙且避光的材料。

1.3 人工催產(chǎn)方法

親魚的雌雄比例按1∶1.2 配組[8]。人工進(jìn)行沙塘鱧的產(chǎn)卵：在4 月中旬水溫達(dá)12 ℃，為了讓沙塘鱧提前產(chǎn)卵，人工進(jìn)行沙塘鱧水體升溫，并注射激素使沙塘鱧提前性成熟，并將池水呈微流以刺激親魚發(fā)情，讓其在魚巢中自然產(chǎn)卵。催產(chǎn)劑注射：促黃體素釋放激素A2（ LHRH-A2），地歐酮（DOM）及絨毛膜促性腺激素（HCG） ，分2 次注射，注射部位為背鰭基部。4月17日水溫14 ℃時(shí)，取♀35尾，♂42尾進(jìn)行自然產(chǎn)卵和催產(chǎn)劑產(chǎn)卵對(duì)比，如表1。注射后將雄魚放入魚巢后放入產(chǎn)卵池中，雌魚直接放入產(chǎn)卵池中，用微流水刺激親魚發(fā)情，讓其自然產(chǎn)卵。

1.4 日常管理

用深水溫度計(jì)測(cè)定親魚培育池、產(chǎn)卵池和孵化池水溫；使用水質(zhì)分析盒測(cè)定水質(zhì)并記錄；每2 d換1/3水量保證水質(zhì)條件良好，換水時(shí)根據(jù)測(cè)定溫度調(diào)整水溫，避免溫差較大，造成親魚應(yīng)激反應(yīng)。同時(shí)記錄并算出成熟系數(shù)、產(chǎn)卵率、受精率、孵化率及仔魚成活率。具體公式如下：

成熟系數(shù)=性腺重（g）/體重（除去內(nèi)臟）×100%

產(chǎn)卵率=產(chǎn)卵親魚數(shù)/催產(chǎn)親魚數(shù)×100%

受精率=受精卵數(shù)/產(chǎn)卵數(shù)×100%

孵化率=破膜數(shù)/受精率數(shù)×100%

仔魚成活率=成活仔魚數(shù)/破膜數(shù)×100%。

2 結(jié)果

2.1 親魚的培育情況

試驗(yàn)用親魚是2013年9月分兩次購運(yùn)放入土池塘培育和越冬。到2014年4月中旬，雌親魚性腺均為第IV期，性腺發(fā)育良好。解剖雌親魚15尾，性腺成熟系數(shù)為18%～24%，詳見表2。

2.2 催產(chǎn)及產(chǎn)卵情況

自2014年4月 17 日到5月 2 日，共進(jìn)行了 4 次人工催產(chǎn)，催產(chǎn)雌親魚210 尾，雄親魚 252 尾，共獲受精卵約5萬粒。人工催產(chǎn)及產(chǎn)卵情況見表3。

為了探索鴨綠沙塘鱧人工催產(chǎn)方法，我們采用了不同催產(chǎn)劑及劑量的對(duì)比試驗(yàn)，參照表1，結(jié)果詳見表4。

鴨綠江沙塘鱧（odontobuds yaluensis）產(chǎn)出卵為球型，粘在魚巢上板的背面，立即吸水膨脹變成兩頭尖的紡錘形[9]，淡綠色、卵膜透明，黏性較強(qiáng)[10]（見圖1）。

將產(chǎn)出卵連同附著板移至水槽中，采用微流水和充氣孵化。水溫20 ℃，發(fā)育至原腸中期，統(tǒng)計(jì)受精率。對(duì)比試驗(yàn)產(chǎn)出卵總的受精率情況。見表5。

2.3 人工孵化及仔魚成活情況

鴨綠沙塘鱧雄魚有守巢護(hù)卵習(xí)性，須盡量減少干擾[11]，進(jìn)行自然孵化，由于產(chǎn)完卵的產(chǎn)卵池中水質(zhì)太差，以致親魚大量得水霉，死亡數(shù)量很大。為了不讓水霉傳染給魚卵，我們采用將卵取出放進(jìn)干凈的玻璃鋼槽子中進(jìn)行微流水和充氣的集中孵化。24～36 h后，未受精成功或已死亡的受精卵在魚巢蓋子上呈不透明的白色，并失去了粘性，而正常受精卵為透明的綠色，此時(shí)可將壞卵洗去（在水中振動(dòng)魚巢蓋子） [12]。孵化水溫 20 ℃，孵化期為21 d，即 514 h。受精卵孵化率見表6。

孵出仔魚10日齡左右，體側(cè)出現(xiàn)明顯三條灰色的條紋，卵黃基本消失，能攝食食物。立即將該仔魚移入玻璃鋼水槽中，采用微流水、定期換水和充氣培養(yǎng)。投喂磨碎的水絲蚓，仔魚成活率情況見表6。

3 討論

3.1 關(guān)于親魚

親魚是用于人工繁殖的雌魚和雄魚。在遼寧省東部地區(qū)自然水體中的鴨綠沙塘鱧 2冬齡性成熟，懷卵量約1 200粒。研究表明，在適宜繁殖年齡組范圍內(nèi)，養(yǎng)殖魚類的懷卵量隨年齡和體重的增加而增大。根據(jù)資料顯示鴨綠沙塘鱧的最適宜的繁殖年齡是3冬齡[13]，體重為100～200 g為最好。在天然水體中，鴨綠沙塘鱧多分布于靜水區(qū)近岸多水草、瓦礫、石隙的陰涼處且屬于肉食性魚類，根據(jù)它的一些習(xí)性，我們采取模仿自然水環(huán)境運(yùn)用土池進(jìn)行人工飼養(yǎng)。池塘宜選池深為1.5 m左右、沙質(zhì)底、淤泥較少、排灌方便的地方。池底放瓦、管或樹枝供魚棲息隱蔽，投喂雜魚飼養(yǎng)。實(shí)踐證明，我們采用土池塘飼養(yǎng)，投喂活雜魚，性腺發(fā)育良好。

3.2 關(guān)于人工催產(chǎn)

人工催產(chǎn)是一方面滿足養(yǎng)殖魚類繁殖所需的生態(tài)條件，另一方面是采用生理措施促使其排卵和產(chǎn)卵，完成受精的過程。鴨綠沙塘鱧自然水域中2～3冬齡性成熟，產(chǎn)卵繁殖的適宜水溫為 16～24 ℃[14]。人工催產(chǎn)第一次注射LHRH-A2 4.0 μg/kg、DOM 2.0 mg/kg、HCG 300 IU/kg；第二次注射LHRH-A2 8.0 μg/kg、DOM 5.0 mg/kg、HCG 1 500 IU/kg，注射后按 1∶1.2雌雄比例配組放入產(chǎn)卵池中，催產(chǎn)池保持微流水，在產(chǎn)卵效應(yīng)時(shí)間到來前開始沖水或加大流量刺激親魚發(fā)情。同時(shí)，在催產(chǎn)池四周放置洗凈的魚巢，魚巢間距 100～150 cm。

在本實(shí)驗(yàn)中，采用催產(chǎn)劑催產(chǎn)和自然相對(duì)比，催產(chǎn)劑采用LHRH-A2、DOM和HCG。雖然催化劑催產(chǎn)效果比自然產(chǎn)的要好，但是劑量一直也是在探索中，試驗(yàn)劑量都是仿其他類似魚類的催產(chǎn)劑量。由于沒有大規(guī)模生產(chǎn)，人工繁殖技術(shù)還在探究中，劑量各有差別具體哪個(gè)劑量更合適還在探索中。人工繁殖還沒有到規(guī)模，所以藥量的探究更加迫在眉睫。規(guī)模生產(chǎn)的藥量的探究也更加具有意義。

3.3 關(guān)于人工孵化

根據(jù)有關(guān)資料：沙塘鱧的膜內(nèi)胚胎期長(zhǎng)[15-17]，當(dāng)水溫達(dá)到20 ℃時(shí)，沙塘鱧胚胎孵化時(shí)間為20 d左右。胚胎發(fā)育的速度與水溫的高低密切相關(guān)。水溫愈高，發(fā)育的速度愈快。所以我們采用微流水人工加熱的方式進(jìn)行人工孵化。

鴨綠江沙塘鱧的雄魚在雌魚產(chǎn)完卵后具有護(hù)巢的習(xí)性[18]，試驗(yàn)中有親魚看護(hù)的鴨綠沙塘鱧卵幾乎不感染水霉病[19]。但是試驗(yàn)過程中由于孵化時(shí)間過長(zhǎng)，鴨綠江沙塘鱧要求水質(zhì)很高，管理不方便，看護(hù)過程中雄魚魚體大量得水霉，死亡率很高。所以采用人工看護(hù)方法進(jìn)行孵化。

水霉的防治是影響孵化率的主要原因，我們采取微水流沖卵，發(fā)現(xiàn)壞卵及時(shí)剔除的物理方法防治水霉效果還是有一定成效的。但是對(duì)于大規(guī)模生產(chǎn)不適用，人為的剔除壞卵操作過于費(fèi)時(shí)費(fèi)力。所以化學(xué)方法處理水霉有待人們進(jìn)一步探究。

3.4 關(guān)于仔魚培育

鴨綠沙塘鱧屬底棲性魚類，白天棲息于底部，晚上活動(dòng)覓食，伏擊式捕食，能作短距離游動(dòng)，食用活體餌料。餌料的可得性主要受餌料密度、活餌料的運(yùn)動(dòng)速度及魚類的攝食方式影響。所以試驗(yàn)飼養(yǎng)的仔魚采用剁碎的水絲蚓進(jìn)行喂養(yǎng)。水絲蚓經(jīng)剁碎后，在水體中分布均勻，短時(shí)間也能在水中保持運(yùn)動(dòng)，具有誘食作用，利于沙塘鱧仔魚捕食。

鴨綠沙塘鱧是動(dòng)物食性魚類，由攝食天然餌料到攝食人工飼料有一個(gè)食性馴化過程。因此，根據(jù)沙塘鱧仔魚的攝食習(xí)性和營(yíng)養(yǎng)需求，選擇適合仔魚的人工開口餌料進(jìn)行馴化，是鴨綠沙塘鱧擴(kuò)繁養(yǎng)殖的關(guān)鍵。

4 結(jié)論

結(jié)果表明，鴨綠江沙塘鱧的人工繁殖技術(shù)是可行的，取得了初步性的成功。本試驗(yàn)中，催產(chǎn)藥物的劑量，有待進(jìn)一步研究。由于藥物的劑量處在試驗(yàn)階段，產(chǎn)卵量以及孵化率較其他技術(shù)成熟的魚類相對(duì)較小，對(duì)于規(guī)?；a(chǎn)養(yǎng)殖還有一定的局限性，但這次試驗(yàn)可以為以后規(guī)?；a(chǎn)養(yǎng)殖提供一定的基礎(chǔ)。

參考文獻(xiàn)：

[1]楊彩根，王永玲，宋學(xué)宏，等.沙塘鱧人工繁殖及魚苗培育實(shí)驗(yàn)[J].水利漁業(yè)， 2005， 25（ 6）：49-112

[2] 王吉橋，王聲權(quán)，巴桂香，等. 鴨綠江沙塘鱧人工繁殖技術(shù)的研究[J].北京水產(chǎn)，2006（1）：10-12

[3] 王吉橋，王聲權(quán)，許重，等.沙塘鱧屬魚類的生物學(xué)[J].水產(chǎn)科學(xué)，2005， 24（10）：32-34

[4] HOUDE E D；SCHEKTER R C Feeding by marine fish larvae：developmental and functional responses 1980（04）

[5] 楊長(zhǎng)根，江志棟，宋長(zhǎng)太，等.沙塘鱧人工繁殖與培育技術(shù)[J].水產(chǎn)養(yǎng)殖，2003，24（2）：19-20

[6] 韓玉章.沙塘鱧的生物學(xué)及繁養(yǎng)技術(shù)[J].漁業(yè)致富指南，2005（20）：36-38

[7] 楊長(zhǎng)根，江志棟，宋長(zhǎng)太，等.沙塘鱧人工繁殖與苗種培育技術(shù)試驗(yàn)[J].江西水產(chǎn)科技，2003，93（1）：35-39

[8] 熊良偉，陶桂慶，王帥兵，等.沙塘醴室內(nèi)繁殖研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)。2010，38（6）：2880-2882

[9] 王吉橋，許重，程駿馳，等.鴨綠沙塘醴仔魚、稚魚和幼魚的形態(tài)觀察.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2007，29（2）：207-212

[10] 王吉橋，史建國(guó)，姜玉聲，等.鴨綠沙塘醴胚胎殼膜結(jié)構(gòu)的電鏡觀察.水產(chǎn)學(xué)雜志，2009，22（2）：1-5

[11] 胡廷尖，章文敏，周穎.沙塘醴的生物學(xué)習(xí)性與繁養(yǎng)技術(shù)的研究[J].北京水產(chǎn)，2004（5）：50

[12] 張德志，鄭衛(wèi)東.沙塘鱧胚胎和仔魚發(fā)育的初步研究[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科學(xué)，2008，15（2）：44-46

[13] 齊振雄，楊干榮. 沙塘醴的早期階段發(fā)育[J].淡水漁業(yè)，1995，25（2）：10-13

[14] 王吉橋，史建國(guó)，姜玉聲，等.鴨綠沙塘醴繁殖習(xí)性的觀察及性腺發(fā)育周期的組織學(xué)研究[J].水產(chǎn)科學(xué)，2008，27（8）：379-385

[15] Gould S J.Ontogeny and phylogeny[M].Cambridge： Belknap Press of Harvard University Press，1977，246-263

[16] Hall B K.Evolutionary developmental biology[M].London：Chapman & Hall，1992，123-141

[17] Kimmel C B，Ballard W W，Kimmel S R，et al. Stages of embry-onic development of the Zebrafish[J].Dev Dyn，1995，203：253-310

[18] 楊長(zhǎng)根，江志棟，宋長(zhǎng)太，等.沙塘醴人工繁殖與苗種培育技術(shù)[J].水產(chǎn)養(yǎng)殖，2003，24（2）：19-20

[19] 黃鮮明，朱衛(wèi)斌，葉新根，等.沙塘醴池塘養(yǎng)殖技術(shù)的初步研究[J].水利漁業(yè)，2008，28（2）：57-90

（收稿日期：2015-01-30；修回日期：2015-02-15）