林清彩等

摘要：

以在果樹上廣泛應(yīng)用的6種殺蟲劑為供試藥劑，采用胃毒觸殺聯(lián)合毒力測定方法測定了鈴木氏果蠅實驗室種群及山東濟南、泰安、萊蕪、煙臺、云南富民和浙江溫州等6個地區(qū)田間種群成蟲對這幾種藥劑的敏感性。毒力測定結(jié)果表明，吡蟲啉和阿維菌素的相對毒力低于甲維鹽、多殺霉素、印楝素、高效氯氟氰菊酯。除萊蕪種群對印楝素LC50抗性倍數(shù)為3.28，敏感性較低外，其它種群對幾種藥劑均處于敏感階段。

關(guān)鍵詞：鈴木氏果蠅；殺蟲劑；相對毒力

中圖分類號：S433文獻標(biāo)識號：A文章編號：1001-4942（2015）03-0092-04

Susceptibility of Drosophila suzukii to Six Common Insecticides

Lin Qingcai1，2， Zhai Yifan1， Zhou Xianhong1， Zhang Xiaoyan1， Zhuang Qianying1， Zhou Chenggang2*， Yu Yi1*

（ 1. Institute of Plant Protection， Shandong Academy of Agricultural Sciences， Jinan 250100， China；

2. College of Plant Protection， Shandong Agricultural University， Taian 271018， China）

AbstractUsing 6 kinds of pesticides that are widely used in fruit tree management as the test agents， the susceptibility of Drosophila suzukii laboratory population and 6 field populations inside and outside the region of Shandong Province to agents were measured using stomach-tag combined with toxicity test method. The results showed that the relative toxicities of imidacloprid and avermectin were lower than those of emamectin benzoate， spinosad， azadirachtin and cyhalothrin. Except that the LC50 resistance ratio of Drosophila suzukii population from Laiwu to azadirachtin was 3.28， which showed low sensitivity， the other populations were all sensitive to the 6 kinds of pesticides.

Key wordsDrosophila suzukii； Insecticides； Relative toxicity

鈴木氏果蠅（Drosophila suzukii），又稱櫻桃果蠅、斑翅果蠅，隸屬雙翅目（Diptera）環(huán)裂亞目（Cyclorrhapha）果蠅科（Drosophilidae）果蠅屬（Drosophila）水果果蠅亞屬（Sophophora）。目前在藍莓、黑莓、櫻桃、草莓、李子、桃子、葡萄、無花果、獼猴桃和梨等水果上均有危害[1]。鈴木氏果蠅喜為害將要成熟的櫻桃[2]，其產(chǎn)卵器呈鋸齒狀且有一定硬度，可以輕易刺破果皮，將卵產(chǎn)于完好果實內(nèi)部，外表上唯一可見的損害狀僅有微小產(chǎn)卵痕，卵孵化后幼蟲蛀食為害，使果實完全軟化、變褐以致腐爛，大大降低水果的產(chǎn)量和質(zhì)量。自2012年以來，山東大部分櫻桃種植地區(qū)均受到嚴重的果蠅危害，據(jù)調(diào)查如果不加強果園管理及時采取防治措施，特別是中晚熟品種果園內(nèi)櫻桃受害率達到95%。

阿維菌素是一種天然產(chǎn)物，可以從土壤微生物中分離出來，對昆蟲和螨類具有觸殺和胃毒作用[3]，其滲透力強，且殘效期長[4，5]，目前正在蔬菜、果樹、水稻等農(nóng)作物上大量使用。甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽（簡稱甲維鹽，Emamectin benzoate）是以土壤微生物阿維鏈霉菌發(fā)酵產(chǎn)物阿維菌素B1為母體化合物，進行衍生、優(yōu)化合成的一種新型高效抗生素類殺蟲、殺螨劑[6，7]，具有生物源、無公害等特點，因而被廣泛應(yīng)用于綠色農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)。多殺菌素（Spinosad）是由土壤放線菌（Saccharopolyspora spinosa）經(jīng)有氧發(fā)酵產(chǎn)生的胞內(nèi)次級代謝產(chǎn)物，以spinosyA和spinosyD為主要成分，屬于大環(huán)內(nèi)酯類化合物。由于其對靶標(biāo)害蟲高效、對非靶標(biāo)生物安全、低殘留、降解快等優(yōu)點，自成功實施商業(yè)化的第二年即獲得美國“總統(tǒng)綠色化學(xué)品挑戰(zhàn)獎”。印楝素主要通過擾亂昆蟲內(nèi)分泌激素的平衡，影響新陳代謝，破壞正常的生長發(fā)育[8]；直接或間接破壞昆蟲口器的化學(xué)感受器使之產(chǎn)生拒食作用[9]；通過對中腸消化酶的作用使得食物的營養(yǎng)轉(zhuǎn)換不足，影響昆蟲的生長發(fā)育；Robert和Denis（1993）[10]發(fā)現(xiàn)印楝素對小菜蛾有直接毒殺和殺卵作用。高效氯氟氰菊酯（簡稱功殺）是一種廣譜、高效的速效性擬除蟲菊酯類殺蟲劑，以觸殺和胃毒作用為主，可防治果樹、蔬菜、糧食作物上的多種害蟲，同時，其作為第3代擬除蟲菊酯類藥劑具有對害蟲抗性發(fā)展較慢的特點。吡蟲啉作用于昆蟲中樞神經(jīng)系統(tǒng)的乙酰膽堿受體，具有內(nèi)吸、廣譜、高效、高持效性、對哺乳動物低毒等優(yōu)良特性，對多種刺吸式口器和部分嚼吸式口器害蟲具有良好的防治效果[11，12]，廣泛用于作物、果蔬、花卉、林木等害蟲防治，是目前世界范圍內(nèi)主要使用的農(nóng)藥之一?；谝陨蠋追N殺蟲劑的廣譜、高效、低毒、低殘留等特點，所以選擇這幾種藥劑進行生物測定試驗。endprint

為防止果蠅危害、提高水果品質(zhì)、減少經(jīng)濟損失、滿足綠色水果生產(chǎn)的需要，筆者采集了山東省內(nèi)外6個櫻桃和楊梅重要種植地的鈴木氏果蠅，對阿維菌素、甲維鹽、多殺霉素、印楝素、高效氯氟氰菊酯和吡蟲啉等6種常用高效低毒殺蟲劑進行室內(nèi)毒力測定試驗，以分析了解不同地區(qū)鈴木氏果蠅對6種殺蟲劑的敏感性及是否產(chǎn)生抗性。

1材料與方法

1.1試蟲來源

實驗室種群：2011年4月在泰安采集的鈴木氏果蠅，用市場購置的葡萄進行飼養(yǎng)，期間未接觸任何藥劑，用于毒力測定時已飼養(yǎng)27代，養(yǎng)蟲室內(nèi)溫度（25±1）℃、相對濕度（70±5）%、光周期16L∶8D、光照度10 000 lx。

田間種群：2013年5～7月先后在云南富民、浙江溫州和山東濟南、泰安、萊蕪、煙臺等楊梅或櫻桃種植地大量采集有鈴木氏果蠅幼蟲的病果，在實驗室待幼蟲發(fā)育并大量羽化到成蟲，用其羽化3～5天的成蟲進行毒力測定和酶活測定試驗。

1.2供試藥劑

10%吡蟲啉可濕性粉劑、1.8%阿維菌素乳油、2.2%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽微乳劑（甲維鹽），浙江海正化工股份有限公司；25 g/L高效氯氟氰菊酯乳油（功殺），廣東立威化工有限公司；25 g/L多殺霉素懸浮劑（菜喜），美國陶氏益農(nóng)公司；5‰印楝素乳油，云南光明印楝素產(chǎn)業(yè)開發(fā)股份有限公司。

1.3毒力測定方法

參考慕衛(wèi)等（2004）[13]的胃毒觸殺聯(lián)合毒力測定方法。用清水將各供試藥劑分別稀釋成6～7個質(zhì)量濃度梯度。在直徑10 cm培養(yǎng)皿底部平鋪一張中速定性濾紙（杭州特種紙業(yè)有限公司），吸取已配好的相應(yīng)質(zhì)量濃度的待測藥液0.4 mL滴加在濾紙表面，使之正好完全潤濕。將大小約2 cm×2 cm×3 mm的蘋果片在不同濃度的待測藥液中浸漬1 min后取出，置于鋪有相同藥液處理濾紙的培養(yǎng)皿內(nèi)。饑餓處理2 h的試蟲用CO2氣體麻醉 5 s后移入培養(yǎng)皿中。每個濃度處理25頭，重復(fù)3次，以清水為對照。處理后置于（25±1）℃、相對濕度（70±5）%、光周期16L∶8D的光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，藥后24 h檢查記錄試蟲死亡情況，以鈴木氏果蠅蟲體僵硬或不能正常爬行為死亡標(biāo)準。

1.4數(shù)據(jù)分析

試驗結(jié)果用POLO軟件進行統(tǒng)計分析，得出致死LC50以及95%置信區(qū)間，酶活性測定數(shù)據(jù)用SPSS14.0軟件進行處理，并用Duncans新復(fù)極差法檢驗差異顯著性（P<0.05）。根據(jù)致死中濃度LC50，以吡蟲啉為標(biāo)準殺蟲劑，計算其余5種殺蟲劑對實驗室種群的相對毒力指數(shù)。以各殺蟲劑對不同地區(qū)種群的LC50值除以該殺蟲劑對實驗室種群的LC50值，得到抗性倍數(shù)?？剐运絼澐謽?biāo)準參照沈晉良等（1991）[14]的方法：<3倍為敏感，3～5倍為敏感性下降，5～10倍為低水平抗性，10～40倍為中水平抗性，40～160倍為高水平抗性，>160倍為極高水平抗性。

2結(jié)果與分析

2.16種殺蟲劑對鈴木氏果蠅實驗室種群毒力比較

所用實驗室果蠅種群已經(jīng)飼養(yǎng)多年，將其視為敏感種群。表1顯示，甲維鹽、印楝素、多殺霉素和高效氯氟氰菊酯的毒力相對較高，而吡蟲啉和阿維菌素的毒力較低。

殺蟲劑斜率 ± 標(biāo)準差LC50（mg/L）（95%置信區(qū)間）相對毒力指數(shù)抗性倍數(shù)

吡蟲啉 2.126±0.993111.230（89.507～138.225）1.001.00

阿維菌素 2.395±0.03868.884（58.065～81.718）0.621.00甲維鹽 1.937±0.0385.706（4.804～6.779）0.051.00

印楝素 1.978±0.0552.116（1.653～2.708）0.021.00

多殺霉素 2.866±0.04110.428（8.662～12.554）0.091.00

高效氯氟氰菊酯 2.368±0.0351.798（1.536～2.103）0.021.00

2.2鈴木氏果蠅田間種群對6種殺蟲劑的敏感性

由表2可見，甲維鹽、印楝素、多殺霉素及高效氯氟氰菊酯對濟南和煙臺種群，甲維鹽、印楝素及高效氯氟氰菊酯對泰安、萊蕪、溫州、富民種群相對毒力指數(shù)均小于0.1，毒性較強；甲維鹽對各田間種群，阿維菌素對煙臺、泰安、萊蕪、富民種群及多殺霉素對泰安、萊蕪、溫州、富民種群的相對毒力指數(shù)均小于1，毒性較強；而阿維菌素對濟南和溫州種群相對毒力指數(shù)≥1，毒性相對較低。

除萊蕪種群對印楝素的抗性倍數(shù)處于3～5，屬于敏感性降低，其它地區(qū)田間種群對6種殺蟲劑的抗性倍數(shù)均小于3，根據(jù)沈晉良等（1991）[14]抗性水平劃分標(biāo)準，均未產(chǎn)生抗性（表2）。

3討論與結(jié)論

殺蟲劑對害蟲毒力的測定和抗性現(xiàn)狀的調(diào)查結(jié)果是害蟲綜合防治中殺蟲劑選用的重要依據(jù)。黑腹果蠅毒力測定方法有幼蟲胃毒觸殺聯(lián)合毒力法[15]；Bruck等（2011）[16]對鈴木氏果蠅室內(nèi)毒力測定時對成蟲直接噴藥。鈴木氏果蠅為害藍莓、櫻桃等漿果及核果類水果，這類水果不宜直接對其噴灑農(nóng)藥，應(yīng)在每株樹下的地面或雜草上噴藥或采用誘餌施放法。綜合考慮安全與實際應(yīng)用，本試驗采用的成蟲胃毒觸殺聯(lián)合毒力法更更貼近田間實際用藥的情況，可以為田間防治提供更準確的信息。

Bruck等（2011）[16]研究發(fā)現(xiàn)與其它類型的觸殺劑相比新煙堿類的殺成蟲功效并不理想，基于小漿果對農(nóng)藥的零耐受力及農(nóng)藥的獨立效果，新煙堿類目前不推薦用于鈴木氏果蠅的防治。本研究發(fā)現(xiàn)吡蟲啉與其它幾種藥劑相比毒力相對較低，但與實驗室種群相比其它幾個地區(qū)種群對吡蟲啉仍然比較敏感，可在果實采收完后在果園內(nèi)使用該種農(nóng)藥控制種群基數(shù)。

但阿維菌素和甲維鹽的過量使用使其在農(nóng)產(chǎn)品中高殘留，害蟲已產(chǎn)生抗藥性，因此各國都已限量使用。本研究發(fā)現(xiàn)各地區(qū)種群鈴木氏果蠅對阿維菌素的敏感性普遍低于對甲維鹽的敏感性，但各地區(qū)種群對這兩種藥劑仍屬于敏感階段。endprint

在多殺霉素引入市場的幾年后即有文獻報道實驗室和田間出現(xiàn)抗性昆蟲。Zhao等（2002）[17]報道美國夏威夷小菜蛾田間種群已對多殺霉素產(chǎn)生了316倍的抗性；Shono等 （2003）[18]研究的家蠅也對多殺霉素產(chǎn)生了>150倍的抗性；Bielza 等（2007）[19]報道了西班牙阿爾梅里亞田間采集的西花薊馬對多殺霉素的抗性倍數(shù)為13 500倍。高效氯氟氰菊酯又叫功夫菊酯，長期使用易對其產(chǎn)生抗性。高效氯氟氰菊酯類和多殺霉素類殺蟲劑對鈴木氏果蠅高度有效，阿維菌素和印楝素對鈴木氏果蠅雄成蟲有較高的致死率[16]。本研究發(fā)現(xiàn)甲維鹽、多殺霉素、功殺和印楝素的相對毒力指數(shù)分別為0.05、0.09、0.02和0.02，對鈴木氏果蠅都有很好的防治效果，而阿維菌素和吡蟲啉的相對毒力指數(shù)分別是0.62和1.00，其毒力相對較低，防治效果可能稍弱。

本試驗發(fā)現(xiàn)濟南、泰安和萊蕪地區(qū)種群對印楝素的抗性倍數(shù)比其它地區(qū)種群大，特別是萊蕪地區(qū)達到敏感性降低階段。印楝素處理黑腹果蠅幼蟲顯著影響成蟲的羽化率，部分試蟲羽化為畸形成蟲，表現(xiàn)為翅扭曲，不能展開，不能飛翔，此外，印楝素還可能會影響能夠羽化的雌蠅生殖力，主要表現(xiàn)在每雌產(chǎn)卵量隨印楝素含量的升高而迅速下降[20]。在實際操作中可選擇在鈴木氏果蠅危害的不同時期使用印楝素，充分利用印楝素的各種殺蟲作用機理，更有效地防治果蠅。

各地區(qū)田間種群對吡蟲啉、阿維菌素、甲維鹽、印楝素、多殺霉素和高效氯氟氰菊酯的敏感性仍處于較高水平，但實際應(yīng)用時應(yīng)嚴格規(guī)范操作，科學(xué)使用，防止鈴木氏果蠅對其產(chǎn)生高度抗性，造成嚴重后果。

參考文獻：

[1]

Dreves A J， Walton V M， Fisher G C. A new pest attacking healthy ripening fruit in Oregon： spotted wing Drosophila： Drosophila suzukii （Matsumura）[EB/OL].http：//www.researchgate.net.2014-8-27.

[2]Van de Linde K， Steck G J， Hibbard K， et al. First records of Zaprionus indianus （Diptera： Drosophilidae）， a pest species on commercial fruits from Panama and the United States of America[J]. Florida Entomologist， 2006， 89（3）： 402-404.

[3]Zhao J， Madson M A， Whistler R. Cavities in porous corn starch provide a large storage space[J]. Cereal Chem.， 1996，73（3）： 379-380.

[4]張紅艷，王玉紅，趙玉珍，等.反相高效液相色譜法測定黃瓜和梨中阿維菌素 B1a 殘留[J]. 農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報，2007，26（3）：1085-1087.

[5]韓麗娟，顧中言，周士良，等.阿維菌素復(fù)配劑防治水稻二化螟田間應(yīng)用評價[J]. 農(nóng)藥，2004，42（6）：29-30.

[6]Yen T H， Lin J L. Acute poisoning with emamectin benzoate[J]. Clin. Toxicol.， 2004， 42（5）： 657-661.

[7]Ioriatti C， Anfora G， Angeli G， et al. Toxicity of emamectin benzoate to Cydia pomonella （L.） and Cydia molesta （Busck）（Lepidoptera： Tortricidae）： laboratory and field tests[J]. Pest Manag. Sci.， 2009，65（3）： 306-312.

[8]李曉東，趙善歡.印楝素對昆蟲的毒理作用機制[J]. 華南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，1996， 17（1）：118-122.

[9]Schmutterer H. Properties and potential of natural pesticides from the neem tree， Azadirachta indica[J]. Annu. Rev. Entomol.， 1990， 35（1）： 271-297.

[10]Robert H J V， Denis J W. Biological activity of neem seed kernel extracts and synthetic azadirachtin against larvae of Plutella xylostella L.[J]. Pesticide Science， 1993， 37：83-91.

[11]Boucias D G. Imidacloprid-chemical synergist for microbial control agents of termites[J]. Abstracts of Papers of the American Chemical Society， 1996， 212：19-23.

[12]Tomizawa M， Casida J E. Selective toxicity of neonicotinoids attributable to specificity of insect and mammalian nicotinic receptors[J]. Annual Review of Entomology， 2003， 48（1）： 339-364.endprint

[13]慕衛(wèi)，劉峰，賈忠明，等. 殺蟲劑對韭菜遲眼蕈蚊毒力與藥效相關(guān)性研究[J]. 農(nóng)藥學(xué)學(xué)報，2004， 6（3）：53-55.

[14]沈晉良，譚建國，肖斌，等.我國棉鈴蟲對擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的抗性監(jiān)測及預(yù)報[J].昆蟲知識，1991， 28（6）：337-340.

[15]趙曉娜，廖慧東，羅佳，等.殺蟲劑對黑腹果蠅毒力測定及對香菇和秀珍菇菌絲生長的影響[J]. 江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2011， 33（2）：283-286.

[16]Bruck D J， Bolda M， Tanigoshi L， et al. Laboratory and field comparisons of insecticides to reduce infestation of Drosophila suzukii in berry crops[J]. Pest Management Science， 2011， 67（11）： 1375-1385.

[17]Zhao J， Li Y， Collins H， et al. Monitoring and characterization of diamondback moth （Lepidoptera： Plutellidae） resistance to spinosad[J]. J. Econ. Entomol.， 2002， 95（2）： 430-436.

[18]Shono T， Scott J G. Spinosad resistance in the housefly， Musca domestica， is due to a recessive factor on autosome 1[J]. Pestic Biochem. Physiol.， 2003，75（1）： 1-7.

[19]Bielza P， Quinto V， Contreras J， et al. Resistance to spinosad in the western flower thrips， Frankliniella occidentalis （Pergande）， in greenhouses of south-eastern Spain[J]. Pest Manag. Sci.， 2007， 63（7）： 682-687.

[20]任太軍，戚曉嫻，程功，等.印楝素可能通過干擾細胞凋亡抑制果蠅生長發(fā)育[J]. 湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報： 自然科學(xué)版，2009， 35（1）：92-95.endprint