化學發(fā)光法與PCR法聯(lián)合檢測孕婦單純皰疹病毒感染率分析

倪雪梅，朱巧英，李 寧，成春嵐

(四川省婦幼保健院檢驗科，四川成都 610036)

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·論 著·

化學發(fā)光法與PCR法聯(lián)合檢測孕婦單純皰疹病毒感染率分析

倪雪梅，朱巧英，李 寧，成春嵐

(四川省婦幼保健院檢驗科，四川成都 610036)

目的 對化學發(fā)光法與聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)聯(lián)合檢測孕婦單純皰疹病毒(HSV)的感染率進行分析，為臨床診斷提供依據(jù)。方法 采集該院孕期常規(guī)建卡的孕婦血清，用化學發(fā)光法檢測血清HSVIgM與IgG抗體水平；對其中任一項結(jié)果陽性者取宮頸分泌物進行HSVDNA定性檢測。結(jié)果HSV1DNA陽性率為0.5%(7/1 422)，HSV2DNA陽性率為1.1%(16/1 422)。HSVIgM和IgG同時陽性者HSV1DNA陽性率為0.4%(4/1 008)，HSV2DNA陽性率為0.6%(6/1 008)；僅HSVIgM陽性者HSV1DNA陽性率為0.8%(1/130)，HSV2DNA陽性率為3.1%(4/130)；僅HSVIgG陽性者HSV1DNA陽性率為0.7%(2/284)，HSV2DNA陽性率為2.1%(6/284)。3種情況HSV抗體陽性者HSV1DNA陽性率比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，而HSV2DNA陽性率比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。結(jié)論 在孕期對HSV抗體進行常規(guī)檢查，對抗體陽性者進行DNA檢測，能提高診斷準確率。盡量做到早期篩查、早期發(fā)現(xiàn)、及早對孕婦進行治療。

化學發(fā)光測定法； 聚合酶鏈反應(yīng)； 單純皰疹病毒屬/分離和提純； 孕婦

單純皰疹病毒(HSV)屬皰疹病毒科，有包膜雙鏈的DNA病毒。HSV有2種血清型，即HSV1和HSV2，其所致感染極為常見，且癥狀多樣。HSV1潛伏于三叉神經(jīng)節(jié)內(nèi)的神經(jīng)元細胞中。其原發(fā)或激活感染主要為腰以上部位，由口腔、呼吸道傳播。而HSV2主要潛伏于脊骶神經(jīng)節(jié)內(nèi)的神經(jīng)元細胞內(nèi)，主要感染生殖器和腰以下部位，傳播途徑以性傳播為主。

HSV的宿主范圍較廣，幾乎可以感染各種胚胎和新生動物來源的上皮細胞和成纖維細胞。HSV感染后常潛伏于神經(jīng)節(jié)中，極易復發(fā)和傳播，近年來其感染趨勢在全球迅速增加。隱性患者及無癥狀者是該病的主要傳染源，及時發(fā)現(xiàn)并采取措施是預(yù)防該病傳播和及時治療的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。特別是孕婦HSV的早期檢測可預(yù)防因感染而導致的新生兒死亡或神經(jīng)系統(tǒng)功能受損[1]。孕期HSV抗體檢測很有必要，作者對2014年1～12月于本院產(chǎn)科建卡的孕婦進行HSV抗體檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)，HSV IgM或IgG抗體陽性標本1 422例，取宮頸分泌物進行HSV DNA檢測，并進行陽性率分析，旨在了解孕期HSV感染情況并為臨床診斷提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 對2014年1～12月于本院產(chǎn)科建卡的孕婦進行HSV抗體檢測，將檢測結(jié)果為HSV IgM或IgG 陽性者1 422例作為研究對象。其中HSV IgM和IgG同時陽性者1 008例，僅HSV IgM陽性者130例，僅HSV IgG陽性者284例。

1.2 方法 采用索林(Dia Sorin)LIAISON 儀器，應(yīng)用化學發(fā)光法檢測血清HSV IgM 和IgG 抗體，其中任一項抗體為陽性者取宮頸分泌物采用羅氏 Light Cycler儀器檢測 HSV DNA。

1.3 統(tǒng)計學處理 應(yīng)用SPSS20.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)資料以率或構(gòu)成比表示，組間比較采用χ2檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié) 果

HSV1 DNA陽性率為0.5%(7/1 422)，HSV2 DNA陽性率為1.1%(16/1 422)。HSV IgM和IgG同時陽性者HSV1 DNA陽性率為0.4%(4/1 008)，HSV2 DNA陽性率為0.6%(6/1 008)；僅HSV IgG陽性者HSV1 DNA陽性率為0.7%(2/284)，HSV2 DNA陽性率為2.1%(6/284)；僅HSV IgM陽性者HSV1 DNA陽性率為0.8%(1/130)，HSV2 DNA陽性率為3.1%(4/130)。3種情況HSV抗體陽性者HSV1 DNA陽性率比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，而HSV2 DNA陽性率比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 HSV抗體陽性與HSV DNA陽性結(jié)果比較[n(%)]

*：P<0.05，與HSV-IgM和IgG同時陽性比較。

3 討 論

HSV1感染一般發(fā)生于眼唇、口腔、腦和腰部以上皮膚，HSV2感染較常見于子宮頸、外生殖器及腰部以下皮膚[2]。孕婦感染HSV可使胎兒產(chǎn)生先天性感染，誘發(fā)流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎、畸形等[3-4]。因此，懷孕期間應(yīng)將HSV作為常規(guī)檢測項目，對陽性患者早做處理，即產(chǎn)前診斷很有必要。產(chǎn)前診斷是指在出生前對胚胎或胎兒的發(fā)育狀態(tài)、是否患有疾病等進行檢測診斷，產(chǎn)前診斷是圍生期保健的重要組成部分，是有效提高我國人口素質(zhì)、減少各種缺陷性疾病發(fā)生的重要手段[5]。

HSV主要經(jīng)產(chǎn)道感染胎兒黏膜進而感染胎兒。胎兒及新生兒感染HSV后預(yù)后較差，有研究表明，在原發(fā)感染HSV胎兒中40%出現(xiàn)嚴重圍產(chǎn)期死亡，而繼發(fā)感染病例圍生期死亡率顯著降低[6]。

孕婦若發(fā)生感染大約在4～7 d時能檢測出IgM抗體，是早期發(fā)生感染的指標；IgG抗體大約在感染15 d后才出現(xiàn)[7-8]。聯(lián)合IgM和IgG檢測有利于幫助孕婦查明是最近感染、再次感染、還是既往感染：(1)IgG(+)、IgM(-)說明是既往發(fā)生的感染，孕婦具有一定免疫力；(2)IgG(-)、IgM(+)說明是最近發(fā)生的感染；(3)IgG(+)、IgM(+)說明是既往感染或再次感染；(4)IgG(-)、IgM(-)說明無免疫力，能夠進行免疫接種。其中(2)項和(3)項均可表明是最近可能發(fā)生感染，確認需要做進一步實驗[9]。

母體HSV1抗體對胎兒的保護效應(yīng)顯著弱于HSV2抗體的保護，妊娠期間激活的HSV1抗體傳播給胎兒的風險顯著高于HSV2[10]。由于化學發(fā)光法檢測的HSV抗體不能區(qū)分HSV1還是HSV2，本院采用PCR檢測患者宮頸分泌物中HSV DNA，對HSV種類進行鑒別。因采用的標本是宮頸分泌物，可能對HSV1的檢測陽性率會偏低一些，但是HSV是作用于神經(jīng)節(jié)，而且主要經(jīng)產(chǎn)道感染胎兒，所以足以達到檢測目的。

綜上所述，在臨床工作中對HSV應(yīng)早期篩查、早期發(fā)現(xiàn)，及早對孕婦進行治療很有必要。如孕婦早期或中期檢測出HSV DNA陽性時最好立即終止妊娠；而孕婦處于妊娠晚期或不愿終止妊娠時應(yīng)主動配合檢查，同時結(jié)合超聲波、羊水穿刺等方式進行動態(tài)監(jiān)測，及時采取適當措施。

[1]烏蘭，唐紅，王麗.血清學指標檢測在單純皰疹病毒感染患者中的臨床價值探討[J].醫(yī)學信息，2014，27(4)：193.

[2]張英偉.單純皰疹病毒感染臨床特點分析[J].轉(zhuǎn)化醫(yī)學電子雜志，2014，1(5)：103.

[3]邊靜，陳兆芳.優(yōu)生優(yōu)育五項檢測的臨床意義探討[J].臨床合理用藥雜志，2013，6(32)：22.

[4]賀元川，魯增輝，趙宗杰，等.樟芝提取物體外抗單純皰疹病毒Ⅱ型的初步研究[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2014，26(12)：2058-2061.

[5]李紅.孕婦血液學檢查在產(chǎn)前診斷中的臨床應(yīng)用分析[J].中國實用醫(yī)藥，2015，10(2)：106-107.

[6]孫玲玲，鄧學東，梁泓，等.產(chǎn)前超聲在妊娠期多病原體感染胎兒診斷中的應(yīng)用[J/CD].中華醫(yī)學超聲雜志：電子版，2014，11(7)：41-45.

[7]顧雷君，王曄愷，陳萍.2010-2013年舟山地區(qū)TORCH三項血清檢測結(jié)果分析[J].中國鄉(xiāng)村醫(yī)藥，2014，21(8)：53-54.

[8]高文靜，喬杰，莫順華，等.東莞市城區(qū)孕婦TORCH感染情況調(diào)查分析[J].中國民族民間醫(yī)藥，2014，23(9)：106-107.

[9]曾莎，曹龍濱，李軍.孕婦血清TORCH檢查中IgM及IgG的臨床分析[J].醫(yī)學信息，2014，27(10)：24.

[10]林曉萍，劉建軍，邱惠萍，等.皰疹病毒感染與不良妊娠結(jié)局相關(guān)性的研究進展[J].中華微生物學和免疫學雜志，2014，34(4)：319-322.

The detection of herpes simplex virus infection rate by jointly using chemiluminescence assay and PCR

NiXuemei，ZhuQiaoying，LiNing，ChengChunlan

(DepartmentofClinicalLaboratory，Maternal&ChildHealthHospitalofSichuanProvince，Chengdu，Sichuan610036,China)

Objective Detect the infection rate of herpes simplex virus (HSV) by jointly using chemiluminescence assay and PCR,and provides reference for clinical diagnosis.Methods The serum samples were collected from the pregnant women who had routine examination records in the hospital.Chemiluminescence assay was used to detect HSV IgM and IgG in those samples.Cervical secretions were collected from pregnant women with positive results and qualitatively tested for HSV DNA.Results The positive rate of HSV1 DNA was 0.5%(7/1 422)，the positive rate of HSV2 DNA was 1.1% (16/1 422).For pregnant women whose HSV IgM and IgG were both positive，positive rate of HSV1 DNA was 0.4% (4/1 008) and that of HSV2 DNA was 0.6%(6/1 008);for those who only had HSV IgM positive，the positive rate of HSV1 DNA was 0.8%(1/130)，and that of HSV2 DNA was 3.1% (4/130);for those who only had HSV IgG positive，the positive rate of HSV1 DNA was 0.7%(2/284)，that of HSV2 DNA was 2.1%(6/284).Among those three HSV antibody positive cases,the difference in HSV1 DNA positive rate was not statistically significant(P>0.05)，while the difference in HSV2 DNA positive rate was statistically significant(P<0.05).Conclusion The test of HSV antibodies during pregnancy can be used as a routine test，and HSV DNA test can be used as further test for those with HSV antibody positive，which could improve the accuracy of diagnosis.Early screening，detection，and treatment are important for pregnant women with HSV infection.

chemiluminescent measurements； polymerase chain reaction； simplexvirus/isolation & purification； pregnant women

倪雪梅，女，主管技師，主要從事臨床及免疫學檢驗的研究。

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.02.006

A

1673-4130(2016)02-0157-02

2015-08-17)