姜國(guó)志，李軍山，陳 鐘，孫勝斌

神威藥業(yè)集團(tuán)有限公司，河北 石家莊 051430

GC-MS分析高良姜配方顆粒中桉葉油醇和莰烯含量*

姜國(guó)志，李軍山，陳 鐘，孫勝斌

神威藥業(yè)集團(tuán)有限公司，河北 石家莊 051430

目的：利用GC-MS聯(lián)用技術(shù)分析高良姜配方顆粒中桉葉油醇和莰烯含量。方法：用水蒸汽蒸餾法從高良姜配方顆粒中提取揮發(fā)油，經(jīng)氣質(zhì)分析儀分析，NIST08庫(kù)定性分析桉葉油醇和莰烯，用外標(biāo)法定量。結(jié)果：桉葉油醇含量0.075%，相對(duì)偏差5.4%，莰烯含量0.018%，相對(duì)偏差6.6%。結(jié)論：此方法穩(wěn)定、可靠,重現(xiàn)性好,適用于高良姜配方顆粒中桉葉油醇和莰烯含量的分析。

GC-MS；高良姜；配方顆粒；桉葉油醇；莰烯

高良姜配方顆粒為姜科植物高良姜Alpinia officinarum Ha n ce的干燥根莖經(jīng)加工制成的配方顆粒，有溫胃止嘔，散寒止痛的作用［1-3］。目前質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)僅限于高良姜素的測(cè)定且揮發(fā)油含量的文獻(xiàn)只針對(duì)于藥材及飲片的研究［4-7］，缺少對(duì)制劑及配方顆粒中揮發(fā)油特定的代表成分的研究。本研究擬用G C-M S聯(lián)用技術(shù)檢測(cè)高良姜配方顆粒中桉葉油醇和莰烯兩種揮發(fā)油含量。

1 儀器與材料

1.1 儀器 Ag i l e n t 7890A型氣相色譜儀(上海屹利科學(xué)儀器有限公司提供)、5975C型質(zhì)譜儀(深圳市仁瑞電子科技有限公司)、7693A自動(dòng)進(jìn)樣器(上海燦孚機(jī)電有限公司)，色譜柱HP-5M S毛細(xì)柱（30m×0.25mm×0.25μm)（安捷倫科技有限公司）。

1.2 試藥 高良姜配方顆粒 (批號(hào)：120612、120614、120616、120618、120620、120622)；桉葉油醇和莰烯對(duì)照品(德國(guó)M erc k公司)。試驗(yàn)用水為純化水，其他試劑為分析純。

1.3 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取桉葉油醇和莰烯對(duì)照品適量，用石油醚配置成每1m L含桉葉油醇14mg/m L、莰烯3mg/m L的溶液。

1.4 對(duì)照品溶液的制備 取本品粉末200 g置于1 000m L燒瓶中，加純化水500m L與玻璃珠數(shù)粒，振搖混合，按照2010年版《中國(guó)藥典》揮發(fā)油水蒸汽蒸餾法提取揮發(fā)油，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥后，用石油醚洗硫酸鈉并溶解濾油，轉(zhuǎn)移至10m L量瓶中，定容、搖勻即得。

1.5 測(cè)定條件 程序升溫：70℃保持3分鐘，以3℃/m in升至100℃保溫2分鐘，再以10℃/m in升至120℃，再以2℃/m in升至140℃保溫3分鐘，再以10℃/m in升至220℃；進(jìn)樣口溫度230℃；載氣為He；柱流速為1m L/m in；分流比為20∶1；進(jìn)樣量為1μL。質(zhì)譜條件：接口溫度280℃；電離源為EI；電子能量70e V；掃描質(zhì)量范圍為50～600am u。色譜圖見1—2。

圖1 對(duì)照品總離子色譜圖

圖2 樣品總離子色譜圖

1.6 方法學(xué)考察

1.6.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制及線性范圍的考察 精密吸取對(duì)照品溶液0.1、0.5、1、2、5μL，按上述色譜條件測(cè)定，結(jié)果見表1，以峰面積積分值為縱坐標(biāo)，對(duì)照品進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，見圖3—4，計(jì)算回歸方程為：

桉葉油醇y=8 643.33x+443 786(r=0.999 2)

莰烯y=16 876.1x+311 812(r=0.999 1)

由此表明桉葉油醇和莰烯分別在1.4～70μg和0.3～15μg進(jìn)樣范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

表1 桉葉油醇和莰烯線性關(guān)系

圖3 桉葉油醇標(biāo)準(zhǔn)曲線

1.6.2 精密度 精密稱取120612批樣品連續(xù)測(cè)定6次，6次結(jié)果分別為結(jié)果桉葉油醇分別為0.075 3%，0.075 5%，0.075 9%，0.074 7%，0.075 3%，0.075 2%，R S D為0.52%；莰烯分別為0.017 2%，0.017 2%，0.0171%，0.017 2%，0.017 1%，0.017 0%，R S D為0.48%，表明本法精密度良好。

圖4 莰烯標(biāo)準(zhǔn)曲線

1.6.3 重復(fù)性 精密稱取6批樣品，每份按上述方法連續(xù)測(cè)定6次，6次結(jié)果桉葉油醇分別為0.0757%，0.0732%，0.0733%，0.0747%，0.0748%，0.0756%，R S D為 1.5%；莰烯分別為 0.0172%，0.0174%，0.0171%，0.0172%，0.0169%，0.0169%，R S D為1.1%，表明本法重復(fù)性良好。

1.6.4 回收率 采用加樣回收法，取已知含量的樣品(批號(hào)：130612)，分別桉葉油醇和莰烯對(duì)照品，按上述色譜條件進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果見表2—3。

1.6.5 穩(wěn)定性 精密稱取130612批5份，每份重量為200 g，分別按“2.3”項(xiàng)方法制供試溶液，分別在0、4、8、16、24小時(shí)時(shí)測(cè)定桉葉油醇和莰烯含量，結(jié)果見表4，表明本法穩(wěn)定性良好。

1.6.6 樣品的檢測(cè) 按上述色譜條件檢測(cè)6批樣品含量，結(jié)果見表5。

表2 桉葉油醇回收率測(cè)定結(jié)果

表3 莰烯回收率測(cè)定結(jié)果

表4 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表5 樣品檢測(cè)含量結(jié)果

3 討論

利用G C-M S檢測(cè)高良姜配方顆粒中桉葉油醇和莰烯含量，先利用NI ST08庫(kù)對(duì)樣品成分進(jìn)行對(duì)比確認(rèn)，確保其純度，排除雜質(zhì)或色譜柱分離度等干擾。通過(guò)方法學(xué)考察，證明此法可行，結(jié)果準(zhǔn)確、可靠，重現(xiàn)性好，可用于高良姜配方顆粒中桉葉油醇和莰烯含量的檢測(cè)。同時(shí)，我們利用質(zhì)譜圖的定性優(yōu)勢(shì)，鑒定其中高良姜油獨(dú)有的γ-杜松烯、4-萜烯醇、蒎烯、α-香檸檬烯、萜品油烯等成分，防止高良姜揮發(fā)油的偽品加入或未加入。

［1］ 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典：一部［M］.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：270-271.

［2］ 努爾阿尼也·熱合曼，熱娜·卡斯木，早然木·尼亞孜，等.高良姜揮發(fā)油成分氣相色譜-質(zhì)譜分析［J］.新疆醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2008(4)：441-442.

［3］ 黃慧珍，楊丹.高良姜的化學(xué)成分及其藥理活性研究進(jìn)展［J］.廣東化工，2009，36(189)：77-80.

［4］ 馬麗萍，丘小惠，閔江.高良姜飲片HPLC指紋圖譜及良姜素含量測(cè)定研究［J］.中成藥，2008，30(11)：1565-1569.

［5］ 高則睿，陰耕云.高良姜的揮發(fā)性成分研究［J］.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2012，40(24)：12247-12249.

［6］ 呂瑋，蔣伶活.高良姜的化學(xué)成分及藥理作用［J］.中國(guó)藥業(yè)，2006，15(3)：19-21.

［7］ 周改蓮，辛寧，黃陸良.高良姜的化學(xué)成分研究［J］.時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2008，19(6)：1376-1378.

ContentDeterm ination of Eucalyptoland Cam phene in Galangal Form ulaGranulesby GC-MS

JIANGGuozhi,LIJunshan,CHEN Zhong,SUN Shengbin
China Shineway Pharmaceutical Group,Shijiazhuang 051430,China

Objective:To analyze the content of eucalyptol and camphene in galangal formula granules by GC-MS.Methods:Volatile oil was extracted from galangal formula granules by steam distillation method. Qualitative analysis of eucalyptol and camphene was carried out by using GC-MS and NIST08,themass spectra library.Externalstandardmethod was adopted for quantification.Results:The contentpercentage of eucalyptolwas 0.075%and the relative deviation was 5.4%.The percentage of the content of camphene was 0.018%and the relative deviation was 6.6%.Conclusion:Thismethod is stable,reliable and has good reproducibility so that it is suitable for the analysisof the contentofeucalyptoland camphene in galangal formula granules.

GC-MS;galangal;formula granules;eucalyptol;camphene

R259

A

1004-6852(2015)04-0018-03

2014-12-14

國(guó)家中醫(yī)藥科學(xué)技術(shù)研究專項(xiàng)課題(編號(hào)：國(guó)中醫(yī)科2013ZX07)。

姜國(guó)志(1981—)，男，工程師。研究方向：藥品工藝、質(zhì)量研究及產(chǎn)業(yè)化。