血清IL-8、IgE、TNF-α和外周血EOS水平在兒童哮喘中的表達(dá)及意義

曾靜，靳蓉，陳敏，邱杰

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論著·臨床

血清IL-8、IgE、TNF-α和外周血EOS水平在兒童哮喘中的表達(dá)及意義

曾靜，靳蓉，陳敏，邱杰

目的 觀察哮喘患兒血清白介素-8(IL-8)、免疫球蛋白E(IgE)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)和外周血嗜酸性粒細(xì)胞(EOS)水平的變化，并探討其臨床意義。方法 對2013年8月—2014年8月收治的52例兒童哮喘患者(哮喘組)的血清IL-8、IgE、TNF-α和外周血EOS水平進(jìn)行檢測,同時選擇52例健康兒童(健康對照組)進(jìn)行同期檢測，比較哮喘組患兒治療前、治療3個月后及與健康對照組血清IL-8、IgE、TNF-α水平及外周血EOS計(jì)數(shù)，并分析不同病理階段、不同病程血清IL-8、IgE、TNF-α水平和外周血EOS計(jì)數(shù)差異。結(jié)果 哮喘組治療前血清IL-8、IgE、TNF-α水平和外周血EOS計(jì)數(shù)均明顯高于健康對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=3.027、2.896、2.273、2.196,P<0.05)；哮喘組治療后血清IL-8、IgE、TNF-α水平和外周血EOS計(jì)數(shù)均明顯低于治療前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.992、2.735、2.254、2.201,P<0.05)；哮喘發(fā)作組的IL-8、IgE、TNF-α水平和EOS計(jì)數(shù)均高于哮喘緩解組(t=2.886、2.205、2.153、2.124,P均<0.05)；哮喘持續(xù)發(fā)作組IL-8、IgE、TNF-α、EOS計(jì)數(shù)等指標(biāo)均明顯高于其他哮喘發(fā)作組和哮喘緩解組，且差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(其他哮喘發(fā)作組：t=2.836、3.124、2.995、2.854；哮喘緩解組：t=3.735、4.002、3.834、3.656，P均<0.05)；且其他哮喘發(fā)作組患兒的IL-8、IgE、TNF-α、EOS水平也均高于哮喘緩解組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.267、2.894、2.241、2.207,P均<0.05)；病程>1年組IL-8、IgE、TNF-α、EOS計(jì)數(shù)水平均明顯高于病程≤1年組，且差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.349、3.122、2.126、2.858，P<0.05)。結(jié)論 血清IL-8、TNF-α、IgE和外周血EOS水平在支氣管哮喘發(fā)病中起著重要作用。

哮喘，兒童；白介素-8；腫瘤壞死因子-α；免疫球蛋白E；嗜酸性粒細(xì)胞

哮喘是兒童時期最常見的慢性疾病，以反復(fù)發(fā)作性的呼吸困難為主要臨床表現(xiàn)。雖經(jīng)有效的積極治療后絕大多數(shù)患者預(yù)后良好，但臨床上常出現(xiàn)急性加重的情況，如不及時處理可在短時間內(nèi)迅速惡化，甚至威脅患兒生命[1]。據(jù)估計(jì)，全世界每年因哮喘死亡的患者高達(dá)10萬之多，既往研究發(fā)現(xiàn)，哮喘患兒血嗜酸性粒細(xì)胞(EOS)顯著升高，EOS 陽離子蛋白(ECP) 作為EOS 活性和轉(zhuǎn)歸標(biāo)志，已經(jīng)廣泛用于與EOS 密切相關(guān)疾病(如哮喘、變應(yīng)性鼻炎) 的診斷和療效判定[2]。另外，臨床普遍認(rèn)為腫瘤壞死因子(TNF-α)與IgE在哮喘的發(fā)生中發(fā)揮著重要的作用[3]。所以，本文探討兒童哮喘患者血清白介素-8(IL-8)、TNF-α、免疫球蛋白E(IgE)和外周血EOS水平變化的臨床意義，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2013年8月—2014年8月在我院進(jìn)行治療的52例兒童哮喘患者作為哮喘組，所有患者均符合中華醫(yī)學(xué)會兒科學(xué)分會呼吸學(xué)組2008 年修訂的“兒童哮喘診斷標(biāo)準(zhǔn)”[4]，其中男29例，女23例，年齡2～13 (7.2±2.1)歲；均為首次發(fā)病，急性發(fā)作者40例，緩解期者12例；病程≤1年者41例，>1年者11例。選擇門診體檢的健康兒童52例作為健康對照組，其中男28例，女24例，年齡2～13 (6.9±3.0)歲。2組患兒的性別、年齡等資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性?；純杭覍倬橥獠⒑炇鹜鈺?。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合“兒童哮喘診斷標(biāo)準(zhǔn)”;(2)年齡2～13歲，男女均可，為以往未經(jīng)規(guī)范治療的初診哮喘患兒，病情評價(jià)為輕、中度; (3)家長同意配合；(4)隨訪1 年。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)其他疾病所引起的喘息、咳嗽；(2)既往診斷過敏性疾病者；(3)既往有哮喘病史或服用過抗哮喘藥物者；(4)近期使用過抗白三烯及糖皮質(zhì)激素類藥物者；(5)年齡<2歲。

1.3 治療方法 常規(guī)應(yīng)用氨茶堿、激素、β2受體激動劑、抗過敏藥等藥物，并加用孟魯司特鈉(順爾寧，杭州默沙東公司生產(chǎn))口服，用法為2～5歲4 mg，5～13歲5 mg，每晚1 次，療程2 周。自試驗(yàn)第1天始皮下注射胸腺肽治療,每次肌肉注射0.05～0.1 mg/kg,每周2次,一般經(jīng)3～6個月病情穩(wěn)定后改為每周1次。

1.4 觀察指標(biāo)與方法 觀察哮喘組患兒治療前、治療3個月后血清IgE、IL-8、TNF-α及外周血EOS水平，并分析不同病理階段、不同病程血清IgE、IL-8與TNF-α水平差異。與健康對照組進(jìn)行比較：(1)血清IgE、IL-8與TNF-α水平測定：采集外周靜脈血2～3 ml 于普通玻璃管中，以3 000 r/min 離心10 min，取上清加于小離心管中，置-20 ℃保存( 凝血不良或溶血標(biāo)本除外)，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)，試劑盒由海南華美生化有限公司提供，MRm型酶標(biāo)儀測定由美國Hyperion生產(chǎn)，測量器采用EJ-2003型全自動6-免疫計(jì)數(shù)器(由西安262廠生產(chǎn)提供)，嚴(yán)格按產(chǎn)品說明書操作，每項(xiàng)實(shí)驗(yàn)每次均同步制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。(2)外周血EOS測算：各采清晨空腹肘靜脈血5 ml，測定外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類，從而計(jì)算出外周血EOS 絕對和相對計(jì)數(shù)( 正常參考值：相對范圍0.5%～5.0%，絕對值< 0.5×109/L)。

2 結(jié) 果

2.1 治療前后血清IL-8、IgE、TNF-α水平和外周血EOS的水平變化 哮喘組治療前血清IL-8、IgE、TNF-α水平和外周血EOS計(jì)數(shù)均明顯高于健康對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=3.027、2.896、2.273、2.196,P>0.05)；哮喘組治療后血清IL-8、IgE、TNF-α水平和外周血EOS計(jì)數(shù)均明顯低于治療前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.992、2.735、2.254、2.201,P<0.05)。見表1。

表1 2組血清IL-8、IgE、TNF-α水平和外周血EOS計(jì)數(shù)變化

注：與健康對照組比較，aP<0.05；與哮喘組治療前比較，bP<0.05

2.2 哮喘發(fā)作組、緩解組血清IL-8、IgE、TNF-α水平和外周血EOS計(jì)數(shù)的比較 哮喘發(fā)作組的IL-8、IgE、TNF-α水平和EOS計(jì)數(shù)均高于緩解組 (t=2.886、2.205、2.153、2.124,P均<0.05)。見表2。

表2 哮喘發(fā)作組、緩解組血清IL-8、IgE、TNF-α水平和外周血EOS計(jì)數(shù)比較

2.3 哮喘持續(xù)狀態(tài)者與其他哮喘發(fā)作者、哮喘緩解組IL-8、IgE、TNF-α、EOS計(jì)數(shù)等指標(biāo)的比較 哮喘持續(xù)狀態(tài)組IL-8、IgE、TNF-α、EOS計(jì)數(shù)等指標(biāo)均明顯高于其他哮喘發(fā)作組和哮喘緩解組，且差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(其他哮喘發(fā)作組：t=2.836、3.124、2.995、2.854；哮喘緩解組：t=3.735、4.002、3.834、3.656，P均<0.05)；而且其他哮喘發(fā)作組患兒的IL-8、IgE、TNF-α、EOS水平也均高于哮喘緩解組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.267、2.894、2.241、2.207,P均<0.05)。見表3。

表3 哮喘持續(xù)狀態(tài)組與其他哮喘發(fā)作組、哮喘緩解組各指標(biāo)水平的比較

注：與哮喘持續(xù)狀態(tài)組比較，aP<0.05;與哮喘緩解組比較，bP<0.05

2.4 不同病程哮喘血清IL-8、IgE、TNF-α、EOS計(jì)數(shù)比較 病程>1年組IL-8、IgE、TNF-α、EOS計(jì)數(shù)水平均明顯高于病程≤1年組，且差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表4。

表4 兒童哮喘不同病程血清各指標(biāo)水平比較

3 討 論

1 胡亞美,江載芳,諸福棠.實(shí)用兒科學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2002:1204-1205.

2 沈華浩.哮喘手冊[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2004:6-7.

3 翁艷.102例支原體感染患兒血嗜酸性粒細(xì)胞和IgE分析[J].浙江臨床醫(yī)學(xué),2006,8(2):172-173.

4 龍振洲．醫(yī)學(xué)免疫學(xué)[M]．北京，人民衛(wèi)生出版社，1995：154．

5 喬紅梅,龐煥香,張?jiān)品?等.肺炎支原體肺炎患兒IL-6、IL-10、TNF-α的變化[J].臨床兒科雜志,2012,30(1):59-61.

6 陶紹華.嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白在支氣管哮喘中的研究[J].四川解剖學(xué)雜志,2012,20(1):39-42.

7 尹嘉寧,劉麗,成煥吉,等.半胱氨酰白三烯、白介素10和腫瘤壞死因子α在肺炎支原體肺炎發(fā)病機(jī)制中的作用[J].臨床兒科雜志,2011,29(8):708-710.

8 Dorigo-Zetsma JW,Zaat SA,Vriesenm AJ,et al.Demonstration by a nested PCR for Mycoplasma pneumoniae that M.pneumoniae load in the throat is higher in patients hospitalised for Mpneumoniae infection than in nonhospitlisedsuhjects[J].J Med Miembiol,1999,48(12):1115-1122.

9 Di Lorenzo G,Pacor ML,Morici G,et al.Measurement of inflammatory mediators of eosinophils and lymphocytes in blood in acute asthma: Serum levels of ECP influence the bronchodilator response[J].Int Arch Allergy Immunol,2002,127(4):308-315.

10 徐琳玲,華雪玲,陳曉東,等.兒童哮喘血漿腫瘤壞死因子活性觀察[J].中華結(jié)核和呼吸雜志,1995,18(3):135.

11 Najam FI,Giasuddin AS,Shembesh AN.Tumour necrosis factors in childhood asthma[J].Indian J Pediatr,2001,68(3):217-222.

12 周月朋,李俊杰,李曉東，等.支氣管哮喘患兒外周血 IL-27、IL-35及 EBI3的表達(dá)變化及意義[J].解放軍醫(yī)藥雜志,2014,26(7):71-74.

13 高虹,劉艷琳,陳燊,等.哮喘兒童呼出氣一氧化氮與肺功能、激發(fā)試驗(yàn)、哮喘控制測試評分相關(guān)性研究[J].中國中西醫(yī)結(jié)合兒科學(xué),2014,6(2):119-122.

14 劉金鳳.哮喘患兒嗜酸性粒細(xì)胞、IL-4及IFN-γ檢測的臨床意義[J].中國兒童保健雜志,2014,22(1):96-98.

15 李曉嬙,胡文芳,孫子輝,等.哮喘高危兒臍血哮喘基因和IgE檢測的意義[J].中國當(dāng)代醫(yī)藥,2014,21(6):60-61.

16 曹奇峰,張宇虹.孟魯司特對咳嗽變異性哮喘患者超敏C反應(yīng)蛋白、白介素4和腫瘤壞死因子-α水平的影響及療效觀察[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2013,10(26):87-89.

The expression of IL-8,TNF-α, IgE and peripheral blood EOS level in children with asthma

ZENGJing*,JINRong,CHENMin,QIUJie.*Grade2012PostgraduateofGuiyangMedicalCollege,Guiyang550002,China

Objective To observe the changes of serum interleukin 8 (IL-8),tumor necrosis factor-α(TNF-α), immunoglobulin E (IgE) and peripheral blood eosinophils (EOS) level in asthma children, and investigate its clinical significance.Methods From August 2013 to August 2014, 52 cases of children with asthma (asthma group) were enrolled, serum IL-8, TNF-α, IgE and peripheral blood EOS levels were detected, at the same time, selected 52 cases of healthy children as healthy control group, the same item were detected, before and three months after therapy, serum IL-8, TNF-α, IgE levels and peripheral blood EOS count were compared between asthma group and healthy control group, and analyzed the differences of serum IL-8,TNF-α,IgE levels and peripheral blood EOS count in different pathological stages, different course.Results Before treatment, asthma group’s serum IL-8, IgE, TNF-α levels and peripheral blood EOS counts were significantly higher than the control group, the difference was statistically significant (t=3.027,t=2.896,t=2.273,t=2.196,P<0.05); after treatment, asthma group’s serum IL-8, IgE, TNF-α levels and peripheral blood EOS counts were significantly lower than before treatment, the difference was statistically significant (t=2.992,t=2.735,t=2.254,t=2.201,P<0.05);IL-8,IgE,TNF-α level and EOS counts in the asthma episode group were higher than asthma release group (t=2.886,t=2.205,t=2.153,t=2.124,P<0.05); asthma persistent attack group’s IL-8, IgE, TNF-α, EOS count are significantly higher than other asthma episode groups and asthma release group, and the differences were statistically significant (other asthma episode group:t=2.836,t=3.124,t=2.995,t=2.854; asthma release group:t=3.735,t=4.002,t=3.834,t=3.656,P<0.05); and other asthma episode group’s IL-8, TNF-α levels were also higher than asthma release group, the difference was statistically significant (t=2.267,t=2.894,t=2.241,t=2.207,P<0.05);duration> 1 year group’s IL-8, IgE, TNF-α, EOS counts were significantly higher than that of the duration ≤1 year group, and the differences were statistically significant (t=2.349,t=3.122,t=2.126,t=2.858,P<0.05).Conclusion Serum IL-8, TNF-α, IgE levels and peripheral blood EOS plays an important role in the pathogenesis of asthma.

Asthma; Children;Interleukin-8;Tumor necrosis factor-α;Immunoglobulin E; Peripheral blood eosinophils

550002 貴陽醫(yī)學(xué)院2012級研究生(曾靜)； 貴陽市婦幼保健院兒科(靳蓉、陳敏、邱杰)

10.3969 / j.issn.1671-6450.2015.06.016

2014-11-26)