王志江　梁麗麗（山東中醫(yī)藥高等?？茖W(xué)校，山東 煙臺 264199）

氣相色譜-質(zhì)譜與化學(xué)計量學(xué)相結(jié)合進行中藥揮發(fā)油成分的分析

王志江梁麗麗
（山東中醫(yī)藥高等專科學(xué)校，山東 煙臺 264199）

本文對采用氣相色譜-質(zhì)譜與化學(xué)計量學(xué)相結(jié)合進行中藥揮發(fā)油成分分析的主要步驟及相應(yīng)方法進行研究，并將該方法應(yīng)用于單味中藥和桃仁-紅花藥對揮發(fā)油的分析，取得了較為理想的效果。

氣相色譜-質(zhì)譜；中藥揮發(fā)油；化學(xué)計量學(xué)；桃仁；紅花

由于中藥揮發(fā)油的揮發(fā)性，導(dǎo)致我國中藥藥效存在不穩(wěn)定性，針對上述問題，我國對中藥揮發(fā)油成分的分析研究必不可少，并應(yīng)用相關(guān)的化學(xué)計量方法保證分析的正確性。

一﹑中藥揮發(fā)油的氣相色譜-質(zhì)譜技術(shù)與化學(xué)計量學(xué)方法

1 非迭代計量法。非迭代計量法采取漸進的形式，通過子窗口的信息，可處理迭代計量法中面臨的真值難以收斂的難題。其種類有多種，比較常見的有漸進因子分析法﹑窗口因子分析法以及直觀推導(dǎo)式演進特征投影法等。

2 迭代計量法。迭代計量法需要選定一組最為關(guān)鍵的光譜，比如初代矩陣轉(zhuǎn)換﹑自動窗口因子分析計量法等交替正交投影法以及最小二乘法等。在這種方法使用時，會遇到真值難以收斂的情況。

二﹑中藥揮發(fā)油研究的主要步驟

1提取揮發(fā)油成分。中藥揮發(fā)油成分的提取可使用水蒸氣蒸餾法。在提取時，常使用正己烷﹑二甲苯等做溶劑。對于提取一些易氧化與熱不穩(wěn)定的物質(zhì)，可以選擇采取超臨界流體萃取方法。例如，可以使用此方法萃取紫蘇梗的揮發(fā)油成分。

2設(shè)定氣相色譜-質(zhì)譜的色譜條件。設(shè)定儀器和色譜柱等條件穩(wěn)定，主要考慮程序的升溫條件。通常采取單階與多階段程序升溫。在揮發(fā)油分析時，一般情況下，單階程序升溫將60℃設(shè)為起始的溫度，將280℃作為終點溫度，設(shè)置升溫速率為4℃/min.而多階程序溫度通常適合寬沸程的試樣。

3使用化學(xué)計量學(xué)方法分析色譜重疊峰。使用氣相色譜-質(zhì)譜得到總離子流圖，對于完全分離的色譜峰，可直接使用檢索儀器并使用保留時間信息確定中藥揮發(fā)油的成分結(jié)構(gòu)。而在出現(xiàn)未完全分離的色譜峰時，不能單使用檢索儀器，應(yīng)結(jié)合利用化學(xué)計量方法對其進行定性定量的解析，如圖1所示。

由于譜圖疊合比較嚴(yán)重，我們直接從二維圖中也找不到清晰的選擇性區(qū)域，此時利用秩圖和特征投影圖給出的信息，可以發(fā)現(xiàn)這是一個兩組分重疊的數(shù)據(jù)，并能從秩圖上只有一個特征值大于噪聲水平的區(qū)域以及特征投影圖中從原點出發(fā)的直線段中找到兩個組分的選擇性區(qū)域。

圖1

三﹑在實際揮發(fā)油研究中的具體應(yīng)用

1在單味中藥材揮發(fā)油研究的應(yīng)用。在用化學(xué)計量方法對揮發(fā)油進行輔助研究時，一般使用直觀推導(dǎo)式演進特征投影法即HELP的色譜重疊峰解析方法。比如李雅文分析仙鶴草中揮發(fā)油成分時，使用固定尺寸移動窗口因子分析方法﹑主成分分析方法等方法分別對重疊色譜峰的背景秩和進行了分析和扣除，并利用HELP方法，借助NIST質(zhì)譜庫，運用總體積積分法進行分析，鑒定出了仙鶴草揮發(fā)油的50個組分，主要是單萜和醇類化合物，其含量達到了揮發(fā)油總含量的90.53%。

2在藥對揮發(fā)油研究的應(yīng)用。藥對作為單味藥到復(fù)方的連線，具備了中藥配伍的基本特點。在煎煮時，藥對容易發(fā)生還原﹑氧化﹑水解﹑縮合等復(fù)雜化學(xué)反應(yīng)，以及容易發(fā)生增溶作用等物理變化，導(dǎo)致某些單味藥的藥量增加，而某些單味藥的藥量減少或者消失。以下是對桃仁，紅花這兩種單味藥的配伍后揮發(fā)油成本變化的實驗研究：（1）儀器和試劑的選擇。采用日本島津公司的QP2010型的相色譜儀-質(zhì)譜儀；采用河南南陽藥材公司的桃仁﹑紅花兩種單味藥；使用北京化工廠提供的正己烷。（2）提取藥對揮發(fā)油。將各100g的紅花與桃仁取出來，然后與水成1：7方式混合，加熱煮沸后，將沸騰時間保持40min，然后依據(jù)我國藥典中揮發(fā)油的測定方法采用甲法對其進行提取，最后將取出來的揮發(fā)油與正己烷相溶后放入冰箱中保存。同時用此方法來對單味藥的揮發(fā)油進行提取。（3）設(shè)置氣相色譜-質(zhì)譜的條件。設(shè)定色譜柱為OV-130m0.25mm，色譜柱的起始溫度設(shè)定為40℃，以2℃/min的加熱速度加熱到120℃，然后再以10℃/min的加熱速度加熱到230℃，在230℃保持加熱時間20min。設(shè)定進口溫度為250℃﹑界面溫度為280℃﹑He載氣流為1.0ml/min﹑EI源電子能為量70ev，以及對其它相關(guān)條件進行相應(yīng)設(shè)定。

結(jié)語

通過實際應(yīng)用可以發(fā)現(xiàn)，利用相色譜-質(zhì)譜與化學(xué)計量學(xué)相結(jié)合的方法，可以成功的完成對中藥揮發(fā)油成分的分析。利用化學(xué)計量學(xué)方法對重疊色譜峰進行解析，可以保證揮發(fā)油成分分析的準(zhǔn)確性和定量性，保證研究結(jié)果的正確性。

[1]騰海英，曲麗萍，李曉林，等．氣相色譜-質(zhì)譜結(jié)合化學(xué)計量學(xué)方法分析中藥揮發(fā)油成分的研究進展[J]．藥學(xué)實踐雜志，2010，28（04）．

[2]李曉如，梁逸曾，郭方遒，等．氣相色譜/質(zhì)譜-化學(xué)計量學(xué)法分析測定藥對桃仁-紅花揮發(fā)油[J]．分析化學(xué)，2007，35（04）．

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宋麗麗，女，山東中醫(yī)藥高等專科學(xué)校，講師，郵編：264199