蔣太白，危 莉，王道平，蔣小虎，危 英＊

（1.貴陽中醫(yī)學(xué)院 藥學(xué)系，貴州 貴陽550002；2.貴州省中國科學(xué)院天然產(chǎn)物化學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，貴州 貴陽550002）

禿葉黃檗（Phellodendron chinese Schneid.var.glabriusculum Schneid.）為蕓香科黃檗屬（Phellodendron）植 物，是 川 黃 檗 （P.chinese Schneid）的變種，兩者的樹皮常作為黃柏藥材使用。該植物多生于海拔800～1 500m山地疏林或密林中，在四川、貴州、湖南等南方地區(qū)均有分布［1］。其味苦、性寒，具有清熱燥濕，瀉火除蒸，解毒療瘡的功效，主要用于治療濕熱瀉痢，熱淋澀痛，骨蒸勞熱，盜汗，遺精，瘡瘍腫毒等病癥［2］。據(jù)《中華本草》記載，黃檗果實(shí)揮發(fā)油及其單體香葉烯具有一定的鎮(zhèn)咳作用［3］。蘇榮輝［4］等發(fā)現(xiàn)，黃皮樹干果的提取物有滅殺家蠅和白蟻拒食的活性。晏晨［5－6］等研究發(fā)現(xiàn)，禿葉黃檗果95%乙醇提取物的酸水解產(chǎn)物中含有大量三萜類和生物堿類化合物。目前，禿葉黃檗除了樹皮作為藥用來源外，其果實(shí)的利用未見報(bào)道。為綜合開發(fā)利用禿葉黃檗資源，筆者采用頂空固相微萃取－氣質(zhì)聯(lián)用法，首次對(duì)禿葉黃檗新鮮果實(shí)揮發(fā)性化學(xué)成分進(jìn)行定性、定量分析。

1 材料與方法

1.1 藥材與儀器

藥材：禿葉黃檗果實(shí)于2012年9月采集于貴州省貴陽市藥用植物園，經(jīng)貴陽中醫(yī)學(xué)院陳德媛教授鑒定，試驗(yàn)樣本（No.05／2012／PCS）保存于貴陽中醫(yī)學(xué)院植化教研室。

儀器：HP6890／5975CGC／MS聯(lián)用儀（美國安捷倫公司），手動(dòng)固相微萃?。⊿PME）裝置（美國Supelco公司），StableFlex復(fù)合萃取纖維頭：2cm－50／30μm DVB／CAR／PDMS（美國Supelco公司）。

1.2 揮發(fā)性物質(zhì)的提取

取樣品約5.0g，置于15mL固相微萃取儀采樣 瓶 中，插 入 裝 有 2cm－50／30μm DVB／CAR／PDMS StableFlex纖維頭的手動(dòng)進(jìn)樣器，在85℃左右頂空萃取30min取出，快速移出萃取頭并立即插入氣相色譜儀進(jìn)樣口（溫度250℃）中，熱解析3min進(jìn)樣。

1.3 氣相色譜－質(zhì)譜條件

HP－5MS彈性石英毛細(xì)管柱（30m×0.25mm×0.25μm）；載氣為高純 He（99.999%）；載氣流量1.0mL／min；汽化室溫度250℃；色譜柱初始溫度45℃（保留2min），以4℃／min升溫至220℃，保持2min；柱前壓7.62psi，不分流進(jìn)樣；溶劑延遲時(shí)間：1.5min。質(zhì)譜條件：電離方式為EI源，離子源溫度230℃，電子能量70eV，四極桿溫度150℃，接口溫度280℃，發(fā)射電流34.6μA；倍增器電壓1 125V，質(zhì)量掃描范圍20～450amu。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析

所得總離子流圖中的各峰經(jīng)計(jì)算機(jī)用HP chemstation檢索及核對(duì)Nist 05標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖庫和Wiley275標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖，確認(rèn)揮發(fā)性化學(xué)成分，用峰面積歸一化法測(cè)定各化學(xué)成分的相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)。

2 結(jié)果與分析

通過檢測(cè)獲得禿葉黃檗新鮮果實(shí)揮發(fā)性成分的總離子流圖（圖示），結(jié)合定性分析軟件和定量分析軟件對(duì)圖進(jìn)行分析，確認(rèn)其中大部分化學(xué)成分和相對(duì)百分含量（表）。由表可知，從新鮮禿葉黃檗果實(shí)揮發(fā)性成分中分離并鑒定出45種化合物，占總揮發(fā)性成分的99.95%，主要揮發(fā)性成分為烯烴類，含量為97.5%，其中相對(duì)百分含量大于1.5%的成分有β－月桂烯、β－欖香烯、大根香葉烯D、β－欖香烯和β－水芹烯，其含量分別為66.9%、14.5%、6.8%、1.7%和1.6%。

圖示 禿葉黃檗果實(shí)揮發(fā)性成分的總離子流圖Fig. Total ion chromatogram of volatile oil from P.Chinese fruit

表 禿葉黃檗新鮮果實(shí)的揮發(fā)性成分Table Volatile constituents from fresh fruit of P.chinese

3 結(jié)論與討論

試驗(yàn)采用頂空固相微萃?。℉S－SPME）技術(shù)首次對(duì)禿葉黃檗新鮮果實(shí)揮發(fā)性成分進(jìn)行萃取、富集，用氣相色譜－質(zhì)譜（GC－MS）法分析和鑒定其化學(xué)成分，從中分離鑒定出45個(gè)化學(xué)成分，其相對(duì)含量占揮發(fā)油總量的99.95%，烯烴類的揮發(fā)性成分含量高達(dá)97.5%，其中單萜類成分β－月桂烯和β－欖香烯含量較高，分別為66.7%和14.5%。說明，在禿葉黃檗新鮮果實(shí)中的主要揮發(fā)性成分以烯烴類的β－月桂烯和β－欖香烯為主，其他成分如醇類、醛酮類、酯類、有機(jī)酸含量較少。

侯冬巖［7］等曾采用GC－MS法分析同屬植物黃柏果實(shí)的揮發(fā)油，發(fā)現(xiàn)有23種成分，其主要成分為月 桂 烯 （36.3%）、β－香 茅 醇 （25.3%）、α－蒎 烯（14.1%）。通過對(duì)比禿葉黃檗果實(shí)與黃柏果實(shí)揮發(fā)油測(cè)定結(jié)果發(fā)現(xiàn)，兩者所含主要揮發(fā)性成分有一定差異，但含量最多的成分均為月桂烯，且新鮮禿葉黃檗果實(shí)中β－月桂烯含量為黃柏果實(shí)的2倍。β－月桂烯常作為精油合成的中間體，廣泛應(yīng)用于化妝品、肥皂、洗滌劑生產(chǎn)中。此外，β－月桂烯有多種藥理活性，我國學(xué)者李云龍?jiān)缙谘芯堪l(fā)現(xiàn)，β－月桂烯具有鎮(zhèn)咳祛痰作用［8］。同時(shí)，其具有抗腫瘤譜廣、毒副作用低的優(yōu)點(diǎn)，目前已開發(fā)為二類非細(xì)胞毒性的廣譜抗腫瘤新藥，在臨床上廣泛用于肺癌、消化道腫瘤及其他淺表性腫瘤的治療，具有良好的發(fā)展前景［9－10］。β－月桂烯藥理研究發(fā)現(xiàn)，該化合物具有抗氧化和抗?jié)兓钚?，能顯著減少胃和十二指腸病變以及增加胃黏液產(chǎn)生進(jìn)而保護(hù)胃粘膜［11］。但是，β－月桂烯除了有鎮(zhèn)咳、抗氧化、抗腫瘤、抗?jié)兓钚酝?，還具有致癌作用。國外研究者發(fā)現(xiàn)，口服大劑量β－月桂烯將誘發(fā)鼠的腎、鼻和肝臟非腫瘤性病變［12－13］。β－欖香烯在抗腫瘤活性方面有良好的表現(xiàn)，對(duì)肺癌A459細(xì)胞、乳腺癌MCF－7細(xì)胞和膀胱癌BIU－87細(xì)胞有顯著的抑制作用并且能誘導(dǎo)其凋亡［14－16］。因此，β－月桂烯和β－欖香烯無論是在醫(yī)藥和日化產(chǎn)品領(lǐng)域的開發(fā)都有一定的潛力。

試驗(yàn)對(duì)禿葉黃檗新鮮果實(shí)中的揮發(fā)性成分進(jìn)行詳細(xì)分析發(fā)現(xiàn)，果實(shí)中富含β－月桂烯和β－欖香烯2種揮發(fā)性成分，兩者都具有抗腫瘤活性，并且已經(jīng)用于臨床的抗腫瘤治療。β－月桂烯還廣泛作為生產(chǎn)日化產(chǎn)品的工業(yè)原料。此外，禿葉黃檗果實(shí)的水解產(chǎn)物中富含三萜類化合物，其衍生物具有抗HIV－1蛋白酶作用。由此可知，對(duì)禿葉黃檗新鮮果實(shí)揮發(fā)性成分的研究，為其綜合利用以及拓寬黃檗的藥用提供了科學(xué)依據(jù)。

［1］ 中國植物志編委會(huì).中國植物志：第42卷［M］.北京：科學(xué)出版社，2004.

［2］ 中華人民共和國藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典［S］.北京：人民衛(wèi)生出版社：2010.

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