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      光合色素的提取與分離改進實驗

      2015-08-15 00:44:39韋勝秀
      新課程(中學) 2015年2期
      關鍵詞:細線培養(yǎng)皿層析

      韋勝秀

      (浙江省寧波市鄞州區(qū)姜山中學)

      一、本實驗在教材中所處的地位與作用

      本實驗是浙科版高中生物必修一《分子與細胞》中的一節(jié)內容,是高中生物教學中的一個重要實驗。光和色素在光合作用中起著吸收、傳遞與轉化光能的作用,通過光合色素的提取和分離實驗,有助于學生理解光合色素的種類和作用、加強學生對光合作用的理解和掌握,培養(yǎng)學生提取、分離光合色素的技能。

      二、對教材實驗的教學思考

      結合筆者多年的教學實踐和學生操作反饋的實驗結果可以發(fā)現(xiàn),即使完全按照課本所提供的材料和實驗方案進行規(guī)范操作,光合色素提取和分離的效果也不是很理想。主要體現(xiàn)在以下三個方面:(1)教材中提取光合色素使用研磨法,步驟較為繁瑣,藥品種類較多。雖然浙科版已經改用烘干的菠菜葉干粉作材料,降低了研磨操作的難度,但是所用到的藥品種類還是比較多(包括二氧化硅和碳酸鈣等),且用量不好控制,用量過多影響色素的濃度,用量過少則得不到很好的研磨效果。另外,研磨時要求迅速、充分研磨成勻漿,學生難以把握好勻漿的程度,而且提取液中色素含量不高,導致色素分離不明顯。(2)教材中畫濾液細線時使用毛細吸管吸取濾液直接畫線,毛細吸管很細、易斷,而且畫濾液細線時,線畫得較粗且不直,操作上很難符合要求。(3)分離光合色素,用到的工具是濾紙條,且放置于裝有層析液的試管中層析,由于試管口徑較小,所制備的濾紙條也相應較小,濾紙條上即使在畫濾液細線時重復多次,濾紙上色素含量也不多,導致分離出來的色素帶不是很明顯;另外,操作上也很容易使濾液細線觸及層析液,導致實驗失敗。

      三、實驗改進之處

      1.光合色素提取的改進——酒精隔水加熱提取色素

      將原實驗中的研磨法改為酒精隔水加熱法。直接將菠菜葉片的綠葉剪碎加入無水乙醇,進行隔水加熱,所得的溶液就是色素溶液,省去了添加二氧化硅和碳酸鈣、過濾的步驟,操作簡單,也能使學生明確色素不溶于水,極易溶于有機溶劑的知識點。

      2.畫濾液細線方法的改進

      將教材實驗中畫濾液細線工具毛細吸管改為自制畫線器,如,筆帽、大號移液槍頭等空心圓柱材料,直接在裝有色素溶液的培養(yǎng)皿中蘸取,印上濾紙圓心處即可,這樣操作更為便利。

      3.光合色素分離的改進——燈芯法分離色素

      將教材中的濾紙條分離改為用圓形濾紙分離,以酒精燈燈芯作為介質,將層析液引導至圓形濾紙片上,得到的層析結果是同心圓色素帶,直接而美觀,避免了濾液細線觸及層析液的易錯步驟。

      四、實驗器材

      新鮮的菠菜綠葉,無水乙醇、層析液、天平、剪刀、培養(yǎng)皿、鑷子、玻璃棒,燒杯、試管、試管夾、三腳架、石棉網(wǎng)、酒精燈、火柴、大號移液槍槍頭、干燥的定性濾紙、量筒、酒精燈芯。

      五、實驗原理

      光合色素不溶于水,極易溶于有機溶劑,故可用無水乙醇來提取色素,且高溫能破壞葉肉細胞的生物膜,使葉綠體中色素釋放出來,因此,可以通過酒精隔水加熱法提取光合色素。光合色素在層析液中的溶解度不同:溶解度高的層析液在濾紙上擴散得快;反之則慢。因此,可用層析液來分離色素。

      六、實驗過程

      1.提取綠葉中的色素

      取5 g 菠菜葉葉片剪碎,裝入試管中,加入5 ml 無水乙醇,在沸水浴中加熱3~5 分鐘,即可得到深綠色的色素溶液,用橡皮塞塞好稍冷備用。

      2.制備圓形濾紙片

      取一干燥的圓形定性濾紙,圓心打一小孔(可用鑷子或剪刀操作),取酒精燈燈芯約5 cm,一端打結,沿剛打的濾紙片圓心孔穿入,打結一端留在濾紙上方,制備好后備用。

      3.畫色素細線

      將步驟1 所得到的色素溶液倒入培養(yǎng)皿中,用大號移液槍頭的圓形開口在培養(yǎng)皿蘸取色素溶液,印在制備好的濾紙片圓心處,待稍干后再進行2~3 次。

      4.色素的分離

      將適量層析液倒入培養(yǎng)皿中,用剛才經過畫線的濾紙片蓋在培養(yǎng)皿上,將打結的一面(畫色素細線一面)朝上,層析5~10 分鐘。

      5.觀察與記錄濾紙片上的色素帶

      可觀察圓形濾紙上出現(xiàn)由內而外的四個由不同顏色組成的同心圓,記錄實驗結果。

      七、實驗效果

      實驗改進后步驟簡單、操作方便,提取液色素含量高,色素溶液色澤鮮艷,實驗易于成功;用自制畫線器畫出的色素細線均勻,且操作方便,更符合要求;燈芯法分離色素,效果明顯、直接美觀,增加了實驗的趣味性。

      八、總結與體會

      在提取色素方法上,人教版教材實驗直接用新鮮菠菜葉作為材料研磨,而浙科版教材實驗是用菠菜葉烘干后研磨,對比之下,浙科版教材操作稍微方便。相比之下,筆者所用的酒精隔水加熱提取色素,操作更是簡單。在色素溶液的效果上,前兩者所得色素溶液效果相差不大,而筆者的方法更為理想。然而,浙科版教材實驗需要烘干的過程中,筆者的改進實驗需要隔水加熱,兩者均用到了高溫處理。高溫是否會破壞了色素結構,導致色素溶液出現(xiàn)色差。這個問題還有待驗證。

      筆者的改進方法,學生有可能對教材實驗要求的一些基本知識,如,一些藥品的作用和紙層析法操作的關鍵步驟得不到很好的強化,這可能導致做練習或考試中會引起偏差,因此,筆者的改進實驗更適合在興趣小組或選修課中開展。

      《義務教育生物學課程標準》明確提出:“生物教學要加強對實驗和其他實踐活動的教學,加強對學生觀察能力、實驗能力、思維能力和自學能力等能力的培養(yǎng);要關注教學資源的開發(fā),如,利用替代物品、藥劑、儀器等,爭取創(chuàng)造性地增加低成本的實驗和其他實踐活動,消除生物實驗的安全隱患,促進學生的健康成長與發(fā)展?!币虼?,筆者認為,可以以本實驗的改進為出發(fā)點,以小見大,培養(yǎng)學生敢于質疑、敢于創(chuàng)新的能力。

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