高致病性豬繁殖與呼吸障礙綜合征弱毒疫苗在規(guī)模化豬場中的臨床應(yīng)用與分析

淵新疆天康畜牧技術(shù)股份有限公司，新疆烏魯木齊 830032）

陳紅玲 黎作華 萬春燕 周緒斌*

隨著我國規(guī)?；图瘓F化豬場近幾年來的快速發(fā)展以及豬群養(yǎng)殖密度的提高，豬場的疫病控制工作面臨越來越大的挑戰(zhàn)，這其中就包括養(yǎng)豬從業(yè)者們經(jīng)常討論的熱點話題，豬繁殖與呼吸障礙綜合征（PRRS，藍耳?。┑木C合防控，此病自1987年首發(fā)于美國以來，已經(jīng)給全球養(yǎng)豬業(yè)造成巨大的經(jīng)濟損失，然而至今仍不清楚其致病機理，PRRS也是阻礙我國養(yǎng)豬業(yè)健康發(fā)展的頭號疾病之一。因此，如何有效做好豬藍耳病的防控工作已成為廣大養(yǎng)殖戶和從業(yè)者亟待解決的問題。

高致病性豬繁殖與呼吸障礙綜合征（Highly pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome，HP-PRRS），俗稱高致病性豬藍耳病，是由豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒變異株引起的豬的一種急性、熱性和高致死性傳染病[1]，此病對養(yǎng)豬生產(chǎn)的危害較大，可引起不同年齡、品種和性別的豬發(fā)病，是造成哺乳仔豬、保育豬、生長（育肥）豬發(fā)病的主要原因，臨床癥狀以妊娠母豬的早產(chǎn)、流產(chǎn)、死胎、木乃伊胎、產(chǎn)弱仔和仔豬咳嗽、呼吸困難、呼吸急促等為主要特征，可造成高發(fā)病率和高死亡率[2-4]。

目前，對于高致病性豬藍耳病的防控仍是對全球養(yǎng)豬業(yè)的挑戰(zhàn)，PRRS的防控必須采取綜合措施，疫苗免疫是防控措施中重要的手段之一[5]。據(jù)有關(guān)資料報道，藍耳病弱毒疫苗的免疫效果明顯好于滅活疫苗，其原因主要是兩種疫苗的免疫機制有差異，弱毒疫苗能夠同時誘導(dǎo)體液免疫和細胞免疫，而滅活疫苗只能誘導(dǎo)產(chǎn)生體液免疫[6-7]?，F(xiàn)市場上商品化的針對高致病性豬藍耳病的弱毒疫苗主要有JXA1株、HuN4-F112株和TJM-F92株三種毒株類型，不同的毒株在殘余毒力、安全性以及免疫抑制作用方面都存在一定的差異，而TJMF92毒株是由高致病性豬藍耳病病毒變異毒株傳代致弱92代而研制成的，在傳代過程中發(fā)生了重要的毒力相關(guān)基因缺失，保留了較好的免疫原性，并且由于其在Nsp2基因上發(fā)生了360個核苷酸的自然缺失，使得其具有較好的安全性以及獨特的分子特征和遺傳標記，并可用于病毒的鑒別診斷。

筆者將高致病性豬藍耳病弱毒疫苗（TJM-F92株）“天藍凈”（新疆天康畜牧生物技術(shù)股份有限公司生產(chǎn)）在江蘇某規(guī)模化豬場中應(yīng)用時，通過調(diào)整其免疫方案使得豬的育肥期成活率明顯提高的案例總結(jié)、分析如下，以期供大家借鑒和參考。

1 材料和方法

1.1 豬場情況介紹

江蘇某規(guī)?；i場，存欄基礎(chǔ)母豬約1 000頭，主要生產(chǎn)商品化肉豬，為高致病性豬藍耳病陽性場，自2013年9月份開始，在種豬群使用TJM-F92株弱毒疫苗天藍凈，從起始至2014年7月近一年的時間里，豬群健康度明顯好轉(zhuǎn)，之后從8月中旬開始，仔豬14日齡免疫1頭份天藍凈，保育豬的健康度也比較理想，但是保育轉(zhuǎn)至育肥階段之后的育肥前中期（70日齡左右），育肥豬表現(xiàn)出咳嗽、毛松、消瘦、眼屎淚斑多、腹式呼吸等癥狀，死淘率約10%。

1.2 檢測方案

鑒于豬場存在育肥期死淘率偏高的問題，根據(jù)臨床癥狀和病理解剖情況可初步判斷，發(fā)病可能與70日齡前存在藍耳病野毒感染有較大關(guān)系。因此，一方面采集血樣（1～6胎母豬各2～3頭，仔豬10、20、30、50、70日齡生長豬各10頭左右）進行藍耳病抗體檢測；另一方面采集發(fā)病豬只的淋巴結(jié)和肺臟等病料進行藍耳病抗原的鑒定，以確診發(fā)病原因。

根據(jù)免疫方案調(diào)整以前的藍耳病抗體檢測結(jié)果分析并結(jié)合臨床發(fā)病情況以及藍耳病抗原鑒定情況，制定出科學(xué)的藍耳病疫苗免疫調(diào)整方案。建議在執(zhí)行免疫調(diào)整方案之后間隔2個月，再采集血樣（1～6胎母豬各2～3頭，仔豬10、30、60、70、100日齡各10頭左右）進行藍耳病抗體的跟蹤檢測和對比分析。

1.3 檢測方法

1.3.1 藍耳病抗體檢測

采用PRRS ELISA（IDEXX）診斷試劑盒進行檢測。檢測結(jié)果判定標準為：S/P值≥0.4，樣品判定為“+”陽性，表示有豬藍耳病抗體存在；S/P值＜0.4，樣品判定為“-”陰性，表示無豬藍耳病抗體存在。

1.3.2 藍耳病抗原檢測

采集育肥期70日齡左右發(fā)病豬只的肺臟、淋巴結(jié)等病料，經(jīng)RT-PCR方法檢測確定是否存在PRRSV，并進行序列測定以鑒定PRRSV的類型（由天津市畜牧獸醫(yī)研究所檢測）。

1.4 生產(chǎn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

該豬場日常生產(chǎn)管理比較規(guī)范，數(shù)據(jù)、報表統(tǒng)計也較為詳細，筆者認真查看了育肥階段的相關(guān)生產(chǎn)報表，并對育肥成活率數(shù)據(jù)進行了統(tǒng)計。統(tǒng)計時間為2014年8～12月（免疫方案調(diào)整前）和2015年1～4月（免疫方案調(diào)整后）。

2 結(jié)果

2.1 免疫方案調(diào)整前藍耳病抗體檢測結(jié)果

檢測結(jié)果顯示（表1）：1～6胎母豬及50日齡前的仔豬抗體陽性率均達到國家要求標準（70%以上）[8]，而70日齡仔豬的抗體陽性率下降為60%，且此時的藍耳病S/P平均值與離散度均較50日齡有明顯上升，個別豬的S/P值超過2.5，提示可能存在藍耳病野毒的感染。

表1 PRRS免疫方案調(diào)整前后的藍耳病抗體檢測結(jié)果統(tǒng)計表

2.2 免疫方案調(diào)整前藍耳病抗原檢測結(jié)果

將發(fā)病豬只的病料經(jīng)RT-PCR檢測，發(fā)現(xiàn)來自發(fā)病豬只病料的樣品1和樣品2其擴增片段大小均與高致病性豬藍耳病變異毒株（Nsp2基因特異性缺失）陽性對照相等（如圖1所示）。經(jīng)進一步序列測定發(fā)現(xiàn)，在Nsp2基因上存在90個堿基的缺失，與高致病性豬藍耳病變異毒株序列相符。

圖1 藍耳病抗原檢測結(jié)果圖

2.3 藍耳病疫苗免疫調(diào)整方案的制定

根據(jù)藍耳病抗體檢測情況結(jié)合臨床表現(xiàn)和藍耳病抗原檢測結(jié)果確定，育肥期70日齡左右豬只表現(xiàn)出的呼吸道病相關(guān)癥狀確實與感染高致病性豬藍耳病變異毒株有較大關(guān)系。因此，將豬場仔豬的藍耳病疫苗免疫方案調(diào)整為：仔豬14日齡免疫TJM-F92株弱毒苗“天藍凈”1頭份/頭，之后在40～45日齡左右再加強免疫一次（劑量：1頭份/頭）。此免疫調(diào)整方案從2014年12月底開始執(zhí)行。

2.4 免疫方案調(diào)整后藍耳病抗體檢測結(jié)果

在開始執(zhí)行藍耳病疫苗免疫調(diào)整方案之后的2個月，按照1.2.2中制定的檢測方案對1～6胎母豬和不同日齡仔豬的血樣再次進行藍耳病抗體的檢測，結(jié)果顯示：母豬群和10、30日齡仔豬的藍耳病抗體陽性率、S/P平均值、離散度與調(diào)整前的情況沒有明顯差異，但從60日齡開始，之后70和100日齡的藍耳病抗體陽性率均較調(diào)整前的50和70日齡有明顯提升，S/P平均值也有所提高，但個體豬的S/P值均未超過2.0；另外在離散度方面也比調(diào)整前有緩慢下降，100日齡已逐漸降至44.8%（表1）。

2.5 免疫不良反應(yīng)觀察記錄

按照調(diào)整后的免疫方案，在仔豬14日齡和40～45日齡左右分別免疫TJM-F92株弱毒苗“天藍凈”1頭份之后，經(jīng)對豬群仔細觀察，沒有發(fā)現(xiàn)采食下降、發(fā)燒等明顯不良反應(yīng)癥狀。

圖2 免疫方案調(diào)整前后豬群健康度對比

2.6 免疫方案調(diào)整前后生產(chǎn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析及健康度變化

對育肥期成活率的生產(chǎn)數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計發(fā)現(xiàn)：調(diào)整前的2014年8～12月，育肥期成活率平均為90.64%；免疫方案調(diào)整后的2015年1～4月，育肥期成活率平均為95.33%，比調(diào)整前提升了4.69個百分點（表2）。另外，豬群健康度方面也較調(diào)整前有明顯改觀（圖2）。

3 分析與討論

⑴藍耳病自1987年首發(fā)于美國至今已有近30年的歷史[9]，但對該病的防控仍未有特效方法。藍耳病感染的最大特征是會引起免疫抑制，因而引起嚴重的繼發(fā)感染，治療措施也主要針對繼發(fā)感染。目前，對于藍耳病陽性感染場來說，疫苗免疫仍是主要的防控方法。本文通過科學(xué)調(diào)整豬群藍耳病疫苗免疫方案，使得育肥期成活率比調(diào)整前明顯提升了4.69個百分點，健康度也有了明顯改觀，從而說明了此調(diào)整方案對該場育肥期（70日齡左右）出現(xiàn)的呼吸道病相關(guān)問題確實起到明顯的防控效果。

⑵從免疫方案調(diào)整后豬群的藍耳病血清抗體檢測結(jié)果來看，60、70、100日齡豬只的藍耳病抗體陽性率均比調(diào)整前（50、70日齡）有一個緩慢上升的過程，同時對應(yīng)日齡的S/P平均值也呈現(xiàn)出同樣變化，且所有個體的S/P值和整體的平均值均未超過2.0，說明藍耳病抗體陽性率和S/P值的升高是疫苗免疫后產(chǎn)生的有效反應(yīng)，這一點也可從離散度的變化上看出來，調(diào)整前50、70日齡的離散度相對30日齡前有一個快速、明顯的升高，而調(diào)整后60、70、100日齡的離散度相對調(diào)整前的50、70日齡呈現(xiàn)出一個逐漸下降和趨于穩(wěn)定的過程，說明藍耳病在豬群中已逐漸處于一個穩(wěn)定的狀態(tài)，這與育肥期豬群在實際生產(chǎn)中的健康度好轉(zhuǎn)以及成活率逐漸提高的變化是基本相一致的。

表2 免疫方案調(diào)整前后育肥期成活率對比分析

⑶本文在規(guī)?；i場使用TJM-F92株弱毒疫苗“天藍凈”的過程中，通過對豬群進行藍耳病抗體和抗原的檢測，并結(jié)合豬群在實際生產(chǎn)中的臨床表現(xiàn)和發(fā)病日齡，科學(xué)制定了仔豬藍耳病疫苗的免疫調(diào)整方案，并在實際生產(chǎn)中產(chǎn)生了較好的效果和應(yīng)用價值，這也充分提示我們：在實際生產(chǎn)中，豬藍耳病疫苗的免疫不是一成不變的，它需要根據(jù)豬群的健康度變化以及抗原、抗體的檢測結(jié)果來適時地進行靈活調(diào)整，從而制定出一定時間內(nèi)相對較適合的免疫方案。

⑷關(guān)于高致病性豬藍耳病弱毒疫苗（TJM-F92株）的免疫，許多專家所持的觀點不盡相同，但筆者認為：豬場在選擇使用哪種類型的疫苗前，最好能夠進行藍耳病毒株類型的鑒定，如條件限制不能鑒定則要盡量選擇與當(dāng)?shù)亓餍卸局晗嗥ヅ涞囊呙?，這樣針對性強，免疫效果也會較好。另外，鑒于豬藍耳病病毒存在抗體依賴增強作用 （Antibody Dependent Enhancement，ADE）[10,11]，所以在規(guī)模化豬場中，我們建議母豬藍耳病疫苗的免疫是保證一年有四次免疫，原因主要是藍耳病疫苗免疫后的間隔期超過3個月時，抗體水平就會下降至比較低的水平，這時如注射藍耳病疫苗就有可能出現(xiàn)抗體依賴增強作用，從而使得病毒復(fù)制數(shù)量急劇增加，導(dǎo)致發(fā)生藍耳病，給豬場造成不必要的損失。

4 總結(jié)

雖然疫苗免疫是豬藍耳病防控措施中最經(jīng)濟、有效的方法，但是僅僅依靠疫苗就能很好地解決或控制住藍耳病的相關(guān)問題也是不太可能的，它還需要采取其他補充措施，如加強生物安全、關(guān)注后備豬的隔離馴化、提高日常飼養(yǎng)管理水平、做好環(huán)境控制、減少霉菌毒素污染、合理的藥物保健、做好其他重要疾病如豬瘟、圓環(huán)病毒病、偽狂犬病等免疫抑制性疾病的基礎(chǔ)免疫、定期的抗體監(jiān)測及良好的人員管理制度等[12-16]，只有這樣藍耳病疫苗的免疫才能真正體現(xiàn)出其優(yōu)異的免疫效果。因此，對于疫苗免疫我們需要客觀、正確地看待，既不要完全依賴，也不要盲目反對，唯有采取綜合防控措施，把基礎(chǔ)性工作做好了，才能有效做好豬場疾病的防控。

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