頂空進樣法測定白酒中的氰化物

王海濤　顏世昕　劉奉申等

摘 要：隨著國家食藥總局加大食品安全的監(jiān)管力度，白酒中氰化物含量的檢測就顯得格外重要，本文根據GBXXX-210X食品中氰化物測定（征求意見稿）所提供的檢測方法，結合本公司實際，充分利用現(xiàn)有資源，建立了一套準確檢測白酒中的氰化物的方法。本方法相關系數為0.9998，回收率為93%-110%。

關鍵詞：白酒；氰化物；頂空進樣器；氣相色譜儀

1 概述

食品安全是國家和公眾近年來普遍關注的問題，氰化物是嚴重危害食品安全的劇毒化合物，因此氰化物是酒類產品的一項重要的食品安全檢測指標。由于白酒中的氰化物主要來自原料，以木薯和木薯類的原料釀造的酒，因它們含有氰苷類在生產過程中會水解產生氫氰酸。雖然大部分氫氰酸在原料蒸煮時可揮發(fā)，但有少量殘留在酒中。

2 實驗部分

2.1 原理

食品中的氰化物在酸性條件下用氯胺T將其衍生為氯化氰，頂空進樣，氣相色譜法檢測，外標法定量。

2.2 試劑和材料

除另有規(guī)定外，所用試劑均為分析純，水為二次蒸餾水。

（1）氯胺T（C7H7ClNNaO2S.3（H2O））：保存于干燥器中。

（2）濃磷酸（H3PO4）。

（3）氯胺T溶液1%：稱取0.5 g氯胺T（1），用蒸餾水定溶至50 mL（現(xiàn)用現(xiàn)配）。

（4）磷酸溶液（1+5，V/V）：量取10mL濃磷酸（2），加50蒸餾水，混合均勻。

（5）氰化物標準溶液（分子式：KCN，）：1000mg/L（市售為KCN的0.1mol/lNaOH溶液）。

2.3 標準溶液配制

（1）氰化物（以CN計）標準中間溶液：準確移取1.00mL的氰化物標準溶液（5）于100 mL的容量瓶，0.1mol/l的標準NaOH溶液定容，此溶液濃度為10mg/L，在0℃～4℃冰箱中保存， 可使用3個月。

（2）0.01mg/l標準使用液配制：準確吸取10mg/l的標準中間液（1）0.1ml于100ml容量瓶中，用二次蒸餾水定容?，F(xiàn)用現(xiàn)配。

2.4 儀器與設備

（1）氣相色譜：美國安捷倫6820配有電子捕獲檢測器（ECD）；

（2）頂空進樣器：上海思達精密儀器有限責任公司HS-16A；

（3）頂空瓶：美國安捷倫20 mL；

（4）渦流混合器；

（5）分析天平：感量0.0001 g；

（6）超聲波清洗器：天津奧特賽恩斯儀器有限公司AS3120。

2.5 分析步驟

2.5.1 酒樣樣制備

取0.2ml酒樣中加入9.8ml二次蒸餾水水于20ml頂空瓶中，搖勻后加入0.2ml1：5的磷酸溶液，搖勻后再加入0.2ml現(xiàn)配的氯胺T溶液，迅速封好頂空瓶蓋，搖勻放入頂空進樣器備檢。

2.5.2 儀器參考條件

2.5.3 氣相色譜參考條件

（1）色譜柱：安捷倫CP-WAX57CB毛細管柱，50m×0.25 mm（內徑）×0.2μm（膜厚）；

（2）色譜柱溫度：40℃保持5 min，以50℃/min速率升至 200℃保持10min；

（3）載氣：氮氣，純度不低于99.999%；

（4）進樣口溫度：200℃；

（5）檢測器溫度：260℃；

（6）分流比：5：1；

（7）柱流速：2.0 mL/min；

2.5.4 頂空進樣器條件選擇

根據GBXXX-210X食品中氰化物測定（征求意見稿）提供的頂空進樣器條件對標樣進行實驗性檢測，發(fā)現(xiàn)靈敏度達不到檢測要求，我們分析認為，安捷倫6820氣相色譜儀使用年限較長，靈敏度可能會有一定程度的降低，同時發(fā)現(xiàn)頂空進樣器的個別條件的變化對靈敏度的影響較為明顯，因此我們進行了一系列的實驗，對頂空進樣器的條件進行了進一步優(yōu)化（見表1）。

上表列出實驗過程中比較有代表性的5組數據，從靈敏度分析，進樣時間對出峰高度和面積影響較大，經過數據對比和穩(wěn)定性、線性關系測試，最終確定4#實驗條件為最佳條件，由此可確定頂空進樣器的最優(yōu)條件為：

（1）頂空進樣器針頭載氣流速：16ml/min（3.8圈）；

（2）頂空平衡溫度：50℃；

（3）取樣針溫度：55℃；

（4）傳輸線溫度：100℃；

（5）分析周期：30min；

（6）頂空加熱時間（平衡時間）：10min；

（7）加壓時間：0.1min；

（8）充樣時間：0.2min；

（9）充樣平衡時間：0.05min；

（10）進針（進樣）時間：0.1min；

（11）清掃時間：2min。

2.6 外標樣檢測及定性、定量方法的建立

外標樣的制作：準確移取0.01mg/l標準使用液10ml于20ml的頂空瓶中，加入0.2ml1：5的H3PO4溶液，混勻后加入1%的氯氨T0.2ml立即封蓋，搖勻后備檢。以此為外標樣。

待氣相色譜儀穩(wěn)定后（測試發(fā)現(xiàn)使用ECD的氣相色譜儀需要按照2.5.3設置的條件至少運行三個空白才能進入穩(wěn)定狀態(tài)），將此樣品放入頂空進樣器，設置好頂空程序后開始測試，得到圖1所示的標準色譜圖。

根據圖1得出的譜圖、出峰時間、峰面積等信息建立定性、定量方法。

綜合2.5.3氣相色譜條件、2.5.4頂空進樣條件和2.6外標定性、定量方法，至此已經建立起一整套完整、穩(wěn)定、優(yōu)化的氰化物檢測方法。

2.7 酒樣檢測

按照2.5.1的步驟對酒樣進行預處理，放入頂空進樣器中進行檢測，氣相色譜軟件將根據2.6建立的定性、定量方法得出被測酒樣中氰化物的含量。如圖2。

2.8 精密度

在重復試驗條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的20%。

2.9 注意事項

（1）市售標樣都是KCN的0.1mol/lNaOH溶液的溶液，在稀釋過程中中間液需用0.1mol/lNaOH作為溶劑稀釋，便于長時間保存，作為外標的樣品可用二次蒸餾水稀釋，現(xiàn)用現(xiàn)配；

（2）ECD檢測器靈敏度比較高，開機后穩(wěn)定需要比較長的時間；

（3）因檢測氰化物使用外標法，酒樣檢測時可在酒樣前后各加一個標樣，確保數據的穩(wěn)定性。

2.10 樣品空白測定方法

在將樣品溶液裝于頂空瓶中加入0.2mL磷酸溶液，渦流混合后，通入氮氣在50℃水域中吹掃15 min，其余步驟同樣品處理，測定結果即為樣品空白值。

用色譜數據處理機或按式（1）計算試樣中氰化物（以CN計）含量：

（1）

式中：

X——試樣中氰化物（以CN計）的含量，單位為毫克每千克或毫克每升，mg/kg或mg/L；

C——由標準曲線得到的樣液中氰化物的濃度，單位為毫克每升，mg/L；

C0——由標準曲線得到的樣液中的空白濃度，單位為毫克每升，mg/L；

V——樣品定容體積，單位為毫升，mL；

A——樣品質量或體積，單位為克或毫升，g或mL。

計算結果以重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的算術平均值表示，計算結果保留三位有效數次。

參考文獻：

[1]GBXXX-210X食品中氰化物測定（征求意見稿）[S].

[2]李源棟，樊林等.酒中氰化物測定方法的研究進展[J].釀酒，2009，11（06）.endprint