陳錦成，馮賢巧，蘇丹萍，陳志科，陳敏鴻，賀東生*

（1.廣州市南沙區(qū)大崗鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，廣東 廣州 511470；2.陽(yáng)江市畜牧科學(xué)研究與技術(shù)推廣中心，529500；3.華南農(nóng)業(yè)大學(xué)，510640）

一例豬乙型腦炎、豬偽狂犬病與豬圓環(huán)病毒病2型混合感染的診斷

陳錦成1，馮賢巧2，蘇丹萍3，陳志科2，陳敏鴻3，賀東生3*

（1.廣州市南沙區(qū)大崗鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，廣東 廣州 511470；2.陽(yáng)江市畜牧科學(xué)研究與技術(shù)推廣中心，529500；3.華南農(nóng)業(yè)大學(xué)，510640）

豬乙型腦炎是由乙型腦炎病毒（JEV）引起的人獸共患傳染病。豬是JEV的主要儲(chǔ)存宿主，其感染一般呈現(xiàn)豬-蚊-人的鏈狀方式。豬感染乙型腦炎后主要表現(xiàn)為懷孕母豬流產(chǎn)、產(chǎn)死胎或木乃伊胎，公豬睪丸炎以及少數(shù)仔豬呈神經(jīng)癥狀，常給養(yǎng)豬業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。

豬偽狂犬病是由豬偽狂犬病毒（PRV）引起的豬的急性傳染病?？梢鹑焉锬肛i流產(chǎn)、死胎、公豬性功能低下，新生仔豬的大量死亡，育肥豬呼吸困難、生長(zhǎng)停滯等，是危害全球養(yǎng)豬業(yè)的重大傳染病之一。

豬圓環(huán)病毒病是由豬2型圓環(huán)病毒（PCV2）感染導(dǎo)致的豬的一種免疫抑制性疾病，主要引起斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征、保育豬和育肥豬的呼吸道疾病及肉芽腫性腸炎，并可使懷孕母豬繁殖障礙。其高感染率給養(yǎng)殖戶造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。

本研究針對(duì)廣東某規(guī)模化養(yǎng)殖場(chǎng)發(fā)病情況、臨床癥狀、剖檢觀察及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)診斷為豬乙型腦炎病毒、豬偽狂犬及豬2型圓環(huán)病毒混合感染。

1　材料與方法

1.1臨床診斷與病料的采集

圖1　病豬的病理變化圖

2014年9月，廣東某豬場(chǎng)發(fā)生懷孕母豬發(fā)生流產(chǎn)，產(chǎn)木乃伊胎，產(chǎn)房仔豬出現(xiàn)發(fā)燒、呼吸困難、腹瀉，部分有神經(jīng)癥狀。病死仔豬剖檢可見腦出血水腫，肝、脾和腎有壞死灶；全身淋巴結(jié)腫大出血；肺淤血、水腫等為主要臨床特征。無(wú)菌采集病死豬的腦、肝臟、脾臟、淋巴結(jié)、等病變組織，作為臨床組織病料樣品，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室診斷。

1.2細(xì)菌培養(yǎng)

無(wú)菌取腦、肝和脾等病變臟器，分別接種于麥康凱和營(yíng)養(yǎng)瓊脂等培養(yǎng)基，37 ℃培養(yǎng)24 h，觀察培養(yǎng)結(jié)果。同時(shí)，取病料進(jìn)行涂片，經(jīng)革蘭氏染色和瑞氏染色，鏡檢觀察。

1.3病毒核酸檢測(cè)

病料經(jīng)適當(dāng)處理后，利用TAKARA MiniBEST Viral DNA/ RNA Extraction Kit Ver 5.0試劑盒提取DNA及RNA，采用PCR和RTPCR方法對(duì)CSFV、PRRSV、JEV、PPV、PRV和PCV2進(jìn)行檢測(cè)。

2　結(jié)果

2.1細(xì)菌檢測(cè)結(jié)果

經(jīng)接種培養(yǎng)后，各培養(yǎng)基中未見病原細(xì)菌生長(zhǎng)；涂片鏡檢未見可疑病原細(xì)菌分布。

2.2PCR及RT-PCR檢測(cè)結(jié)果

瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果顯示，采集病料中CSFV、PRRSV和PPV的RTPCR/PCR擴(kuò)增結(jié)果均為陰性，部分樣品的JEV、PRV和PCV2的擴(kuò)增結(jié)果呈陽(yáng)性，結(jié)果見圖2、圖3和圖4。

根據(jù)臨床診斷和實(shí)驗(yàn)室診斷結(jié)果，確診為豬乙型腦炎、豬偽狂犬病和豬圓環(huán)病毒混合感染。

3　防治措施

3.1 豬乙型腦炎病

預(yù)防的根本在于消滅蚊蟲，搞好環(huán)境衛(wèi)生，做好疫苗免疫接種。常用的疫苗為乙腦弱毒疫苗，應(yīng)在乙腦流行前使用，多選擇在每年的4月至5月中旬。接種對(duì)象為初產(chǎn)母豬。同時(shí)，豬乙型腦炎為人獸共患，其傳播媒介為蚊蟲，因此在該病流行期間，對(duì)于疫區(qū)內(nèi)的人也要接種乙腦疫苗，避免人獸共患的情況發(fā)生。

3.2豬偽狂犬病

發(fā)病時(shí)應(yīng)將發(fā)病豬群隔離飼養(yǎng)，做好環(huán)境衛(wèi)生控制；對(duì)發(fā)病豬豬舍及其周邊環(huán)境進(jìn)行全面消毒，采用“全進(jìn)全出”的生產(chǎn)模式。選用優(yōu)質(zhì)高效的豬偽狂犬基因缺失弱毒苗（gE、TK基因缺失）加強(qiáng)免疫；健康豬群仔豬3日齡內(nèi)滴鼻免疫，2月齡再肌注免疫1次，種公母豬每3個(gè)月普免1次，后備母豬配種前免疫2次。

圖3　JEV RT-PCR檢測(cè)結(jié)果

圖4　PRV PCR檢測(cè)結(jié)果

圖5　PCV2 PCR檢測(cè)結(jié)果

3.3豬圓環(huán)病毒病

豬場(chǎng)應(yīng)采取預(yù)防為主的方針，綜合防治，才能達(dá)到減少或避免損失的目的。對(duì)新引進(jìn)種豬要進(jìn)行檢測(cè)，不引進(jìn)帶毒種豬。實(shí)行全進(jìn)全出飼養(yǎng)模式；堅(jiān)持對(duì)豬瘟、口蹄疫、高致病性豬藍(lán)耳病等重點(diǎn)疫病及細(xì)小病毒病、豬偽狂犬病的程序免疫，嚴(yán)格實(shí)施生物安全措施，控制并發(fā)、繼發(fā)感染；根據(jù)不同日齡適時(shí)調(diào)整飼料配方，保證豬群營(yíng)養(yǎng)水平，增強(qiáng)自身抗病能力。

4　討論

豬乙型腦炎病、豬偽狂犬病和豬圓環(huán)病毒病均是危害養(yǎng)豬業(yè)的重要疫病。蚊蟲在豬乙型腦炎的傳播中扮演了關(guān)鍵的角色，蚊蟲感染乙型腦炎病毒后呈終身感染，并且病毒可經(jīng)蟲卵傳代，因此防蚊滅蚊是防治乙腦的重要措施。近年來(lái)出現(xiàn)的豬偽狂犬變異株也使得許多豬場(chǎng)的豬偽狂犬疫情時(shí)有發(fā)生，現(xiàn)有的豬偽狂犬疫苗對(duì)豬偽狂犬變異株有一定的作用，應(yīng)全面加強(qiáng)免疫。豬圓環(huán)病毒病是一種以免疫障礙為特征的豬的病毒性傳染病，單純有豬圓環(huán)病毒2型感染發(fā)病的很少見，該病的混合感染現(xiàn)象發(fā)生廣泛，發(fā)病率與死亡率都很高，是當(dāng)今乃至日后相當(dāng)長(zhǎng)時(shí)期內(nèi)對(duì)養(yǎng)豬業(yè)危害最為嚴(yán)重的疫病之一。

本次疫情究其原因，分析可能是由于該豬場(chǎng)管理水平較低，疫苗免疫不確實(shí)，導(dǎo)致豬只免疫力下降并發(fā)病。在結(jié)合發(fā)病情況、臨床癥狀、剖檢病變的基礎(chǔ)上，根據(jù)實(shí)驗(yàn)室PCR診斷結(jié)果，確診本次廣東省某集約化豬場(chǎng)發(fā)生的疫情為豬乙型腦炎病毒、豬偽狂犬病毒及豬圓環(huán)病毒2型的混合感染，通過(guò)加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，做好滅蚊滅鼠工作，優(yōu)化免疫程序，提高免疫效果和豬群對(duì)疫病的抵抗力，采取一定的綜合防治措施，加強(qiáng)衛(wèi)生和飼養(yǎng)管理，并積極采取有效的對(duì)癥療法，穩(wěn)定并控制疫情，確保了豬場(chǎng)的健康發(fā)展。

2015-11-22）

2012番禺市科技局和廣東省農(nóng)推（［2013］185）項(xiàng)目資助

賀東生