王　勤，劉曉飛，馮春燕，仇松寅，李曉琳，劉丹丹，梅　琳，林祥梅

（中國檢驗檢疫科學研究院動物檢疫研究所，北京　100029）

我國進出境動物檢疫試劑盒的使用現(xiàn)狀調查及對策研究

王勤，劉曉飛，馮春燕，仇松寅，李曉琳，劉丹丹，梅琳，林祥梅

（中國檢驗檢疫科學研究院動物檢疫研究所，北京100029）

動物檢疫診斷試劑盒是口岸把關所依靠的主要工具，是構建我國生物安全防線的重要組成部分。本文基于全國進出境動物檢疫試劑盒的使用情況調查數(shù)據(jù)（2009—2012年），分析匯總了近年來我國進出境動物檢疫試劑盒的使用現(xiàn)狀，闡述了目前試劑盒在使用中主要存在的三個問題：依賴進口，自主知識產權試劑盒偏少；缺少質量評價體系，導致試劑盒質量存在隱患；缺少應急儲備。有針對性地提出了建立試劑質量評價體系、統(tǒng)籌推動自主知識產權試劑盒的應用、建立應急儲備機制的建議。

進出境動物檢疫；試劑盒；調查

近年來，隨著我國進出口動物數(shù)量的急劇增加，檢疫試劑盒的種類和使用量也發(fā)生了巨大變化。檢疫試劑盒在為提升口岸檢疫工作效率和檢測結果準確性的同時，也暴露出了一些問題。為此我們以問卷調查的形式，對2009—2012年間全國進出境動物檢疫試劑盒的使用情況進行了摸底調查。并在此基礎上，梳理分析了我國進出境動物檢疫試劑盒在使用中存在的問題，提出了相應的對策和建議。

1　試劑盒使用現(xiàn)狀

1.1試劑盒使用量大、種類多、發(fā)展迅速

從調查結果看，2009年至2012年，使用的試劑盒多達100多種，涉及近20種檢測動物（包括牛、羊、豬、雞、鴨、信鴿、馬、猴、猩猩、水貂、企鵝、狐貍等）的37種主要動物疫病。

從檢測動物的種類來看（圖1），檢測牛病的試劑盒使用量最多，占總用量的43% ；其次為豬，占29%，包括檢測引進的種豬和供港澳的活豬；第三位是禽類，占總用量的23%，主要為檢測雞，其他的為鴨、信鴿和少量的企鵝等。除此之外，在進境動物檢測中也包括了狐貍、水貂等經(jīng)濟動物、馬等競技動物和猴等實驗動物。其中靈長類動物的檢測用量占2%，主要為猴和少部分的猩猩；馬、水生動物以及其他動物（如海象、水貂、狐貍等）檢疫試劑盒使用數(shù)量各占總量的1%。

圖1　不同動物檢測試劑盒使用量的占比

這與我國畜牧業(yè)的發(fā)展方向和整體布局基本一致。當前，畜牧業(yè)發(fā)展以保障肉、蛋、奶的供應量和品質為主。所以進境動物主要以大中種畜和家禽為主，如牛、豬和雞。隨著奶牛進口數(shù)量逐年遞增，以及未來隨著屠宰牛的進口，檢疫牛病的試劑盒數(shù)量還會大幅增加。同時我們也應該看到，畜牧業(yè)發(fā)展越來越多元化。除了解決吃飽、吃好的問題外，其他涉及娛樂、體育、醫(yī)療等方面的進口動物種類也越來越多。

從上述分析可以得出，進出境動物檢疫試劑盒的種類和數(shù)量與我國畜牧業(yè)發(fā)展密切相關。隨著畜牧業(yè)產業(yè)布局的調整，對外經(jīng)貿往來的不斷加深和國內外疫情的變化，未來進出境動物檢疫試劑盒的數(shù)量和種類還會有繼續(xù)增長的趨勢。

1.2檢測方法仍以免疫學為主導，但分子生物學方法發(fā)展迅速

從檢測方法來看，涉及EL?SA、熒光定量PCR、瓊脂擴散試驗、血凝試驗、血凝抑制試驗、皮內變態(tài)反應、補體結合等11種。如圖2所示，使用量最多的是EL?SA檢測試劑盒，EL?SA檢測的疾病范圍很廣，大部分動物疫病都可采用EL?SA方法檢測；其次為熒光定量PCR，主要是診斷禽流感和豬流感的試劑盒，也有少部分診斷豬瘟等疾病的試劑盒；再其次是瓊脂擴散試驗，主要是用于診斷牛流行性出血熱，少量用于檢測馬傳貧和雞傳染性法氏囊??；血凝試驗、血凝抑制試驗、皮內變態(tài)反應等試劑使用量普遍偏少。

圖2 不同檢測方法試劑盒使用量的占比

從整體上看，以EL?SA為代表的基于免疫學方法的檢疫試劑盒（包括EL?SA、瓊脂擴散試驗、血凝試驗、血凝抑制試驗等）占主導，占總用量的76%；以熒光定量PCR技術為代表的分子生物學檢測方法（包括普通PCR、反轉錄PCR和熒光定量PCR）發(fā)展迅猛，成為動物檢疫工作中重要的技術手段，其用量占總用量的23.9%。相信今后隨著技術的不斷成熟，分子生物學方法因其自身特點會有更廣闊的應用前景。

1.3進口試劑盒的使用數(shù)量較多，國產試劑盒相對較少

從用量上來看，進口試劑盒占絕大多數(shù)。進口試劑盒占試劑盒使用總量的62.12%，國產試劑盒占37.88%。如表1所示，排名前十的試劑盒生產商依次為：?DEXX（美國）、深圳凱杰（外資獨資公司，所在地在中國）、VMRD（美國）、SVANOVA（瑞典）、哈爾濱獸醫(yī)研究所、Biovet（加拿大）、中國獸藥藥品監(jiān)察所、?D-vet（法國）、Prionics（瑞士）。這十家單位每年提供的試劑盒總量占年均試劑盒使用總量的71.73%，其中?DEXX和深圳凱杰是兩個最大的生產商，平均每年供應的診斷試劑盒共占總用量的37.07%。

表1 使用量排名前十的試劑盒生產商

如表2所示，在進口試劑盒中，美國是我國進口試劑盒最大的來源國，占進口試劑盒使用總量的47%，其次是法國，占進口試劑盒的20%，瑞士和瑞典各占9%。

表2 試劑盒進口情況統(tǒng)計

從類型上看，國產試劑盒主要有四類：第一類為禽流感熒光定量試劑盒；第二類為抗體、血清等標準物質；第三類為口蹄疫試劑盒；第四類為猴B病毒抗體檢測試劑盒。其中，禽流感熒光定量PCR試劑盒是國產試劑盒中比較成熟的，使用效果較好。如圖3所示，國產試劑盒也主要由幾個公司生產，主要集中在深圳、北京等地。其中，深圳凱杰高居榜首，遠遠高于其他國內公司。

圖3 不同生產商試劑盒的使用占比

1.4試劑盒的總體使用效果較好

根據(jù)調查統(tǒng)計情況，目前進出境動物檢疫工作中使用試劑盒總體不錯，使用效果“較好”“良好”“準確”的試劑盒占總用量的96.1%，使用效果“一般”的占總用量的3.3%，使用效果較差的僅占總用量的0.6%。

2　存在的問題

2.1過度依賴進口，具有自主知識產權的檢疫試劑盒數(shù)量偏少

進出境檢疫用試劑盒嚴重依賴進口，進口試劑盒占試劑盒使用總量的62.12%。國產試劑盒中，最大的生產商深圳凱杰，也已被外資收購。如果算上凱杰公司生產的試劑盒，國外公司生產的試劑盒占使用總量的80%。雖然進口試劑盒具有品種齊全、質量相對穩(wěn)定的優(yōu)點，但是在沒有質控措施的情況下，過度依賴進口試劑盒有很多弊端。特別是由于每個國家的國情、疫病發(fā)生和流行情況以及疫病監(jiān)控措施的不同，檢疫對象也千差萬別。此外，國外的動物檢疫用試劑盒是根據(jù)本國檢疫需要和疫情流行特點研制的，在我國并不一定適用。

我國在動物檢疫試劑的研發(fā)上與國外相比并不遜色，但在商品化上明顯處于劣勢，有自主知識產權的試劑盒偏少。隨著分子生物技術的發(fā)展，PCR、RT-PCR和熒光定量PCR定會逐漸得到廣泛的應用。我國各口岸結合自身實際，也摸索總結出了一些適用于口岸檢疫的分子生物學方法。但是由于動物診斷試劑的審批程序復雜，科研成果轉化較難，很難拿到國家獸藥證書和批號，難以上市銷售，得不到很好的推廣。

2.2缺少質量評價體系，試劑盒質量有差異

從調查情況看，使用效果上整體較好，但是試劑盒質量安全問題仍不容樂觀。整體上，進口試劑盒的使用效果優(yōu)于國產試劑盒，但一些大公司的產品也出現(xiàn)過嚴重質量問題，不同品牌的試劑盒間檢測結果差異大，使用者不能了解到試劑盒的診斷敏感性和診斷特異性等重要參數(shù)。更令人擔憂的是，由于沒有質控體系，給了一些不法代理商可乘之機，以次充好，以克隆樣品代替陽性質控樣品，擾亂了正常的檢疫工作秩序。因此，加強動物檢疫試劑的質量評價技術研究，探索建立檢測試劑標準化和準入評價機制，實施對檢測試劑的有效監(jiān)控，是我國進出境動物檢疫工作必須要解決的一個瓶頸問題。

2.3缺少檢測試劑盒的應急儲備

由于沒有建立檢疫試劑盒的應急儲備機制，近年來進出境檢疫試劑盒的供需矛盾越來越突出。一方面，由于近年來我國畜牧業(yè)發(fā)展多元化，進出境動物種類明顯增多，一些動物的檢疫試劑盒在國內根本沒有。另一方面，動物疫病防控形勢更加嚴峻，有很多新發(fā)的動物疫病出現(xiàn)，之前的一些動物疫病原也出現(xiàn)變異。而從國外訂購試劑，訂貨周期長、不能按時交貨或者訂不到貨的情況也時有發(fā)生，延誤了檢疫工作正常開展。所以為了應對目前復雜的疫病流行形勢，亟待建立動物檢疫試劑盒的應急儲備機制，加強動物檢疫技術和試劑盒的儲備。

3　對策及建議

3.1建立科學、有效、經(jīng)濟的質量評價體系

試劑盒質量的好壞直接關系我國生物安全防線是否穩(wěn)固。如果試劑盒質量出現(xiàn)問題，就會出現(xiàn)漏檢和誤檢，一旦外來動物疫病傳入，將直接危害我國的畜牧業(yè)生產和人民健康，嚴重威脅國家生物安全。因此大部分國家都建立了自己的動物診斷試劑盒的質控體系，有專門的機構對試劑盒進行評價和準入。建議盡快建立符合我國實際和法檢需求的進出境動物檢疫用試劑盒的質量評價體系，立即開展進出境動物檢疫試劑評價工作，以確保檢疫試劑的質量。

3.2統(tǒng)籌各方力量，推動自主知識產權試劑盒的研發(fā)和成果轉化

建議協(xié)調各方力量，加快已有成果的轉化，使之成為口岸把關可以依靠的重要技術力量。集中系統(tǒng)內優(yōu)勢資源，聯(lián)合各大科研院所的科研力量，建立進出境動物檢疫用標準樣品庫。結合口岸需要，開展快速、準確的診斷方法研究，開發(fā)有自主知識產權的診斷試劑盒。

3.3建立試劑盒的應急儲備機制

為保證供應，應對突發(fā)事件，建議盡快建立試劑盒的應急儲備機制。建立應急儲備名錄，并對名錄中的試劑盒進行儲備。不但要對口岸急需而一時買不到的試劑盒進行儲備，而且對于重要的、常用的試劑盒，也要進行常規(guī)儲備，防止因供貨商原因影響口岸檢疫工作的正常進行。

（責任編輯：朱迪國）

Investigation Report on Diagnostic Kits Used in Entry and Exit Animal Quarantine Inspection in China

Wang Qin，Liu Xiaofei，F(xiàn)eng Chunyan，Qiu Songyin，Li xiaolin，Liu Dandan，Mei Lin，Lin Xiangmei
（?nstitute of Animal Quarantine，Chinese Academy of ?nspection and Quarantine，Beijing 100029）

Commercial diagnostic kits are the important technical supports for the entry-exit animal quarantine inspection and the key part to construct the biological security of our country. An investigation was carried out focused on diagnostic kits used between 2009 to 2012 by means of questionnaires. The current situation and the critical problems of diagnostic kits used in enty-exit animal quarantine inspection were analyzed based on the investigation data. And suggestions were put forward，such as constructing quality assessment system，promoting the use of independent intellectual property kits，and establishing the emergency reserve mechanism.

entry-exit animal quarantine inspection；diagnostic kit；investigation

S851.4

A

1005-944X（2015）11-0057-04

國家質檢總局科技計劃項目——豬藍耳病抗體檢測試劑盒貝葉斯方法質量評價模型的建立（2014?K230）；中國檢驗檢疫科學研究院基本科研業(yè)務費專項資金資助項目——動物檢疫風險分析中關鍵參數(shù)的精準估計（2014JK030）

林祥梅