張彩鳳

（杭州捷島科學儀器有限公司，浙江杭州310030）

分析測試

羥丙基纖維素填充色譜柱的研制及其應(yīng)用

張彩鳳

（杭州捷島科學儀器有限公司，浙江杭州310030）

根據(jù)2010版藥典要求，研制了20%OV-7 i.d.2 mm×0.5 mm×3 m填充色譜柱用于分析羥丙基纖維素中羥丙氧基含量的分析。考察了色譜柱的規(guī)格、不同載體對羥丙基纖維素中被測組分的影響。建立了羥丙基纖維素色譜柱制備及樣品定性、定量的新方法。試驗結(jié)果表明，在選定的色譜條件下，各組分的分離度和理論塔板數(shù)都遠超藥典中規(guī)定的參數(shù)。標準樣品的重復(fù)性好，理論塔板數(shù)(n)，校正因子(RSD),相對標準偏差(RSD%)分別為6,1.41%,0.40%，完全符合藥典的檢測要求。

羥丙基纖維素填充色譜柱；研制和應(yīng)用；柱效

藥輔羥丙基纖維素(Hydroxypropyl cellulose，HPC)是由堿性纖維素與環(huán)氧丙烷在高溫高壓下反應(yīng)而得的非離子型纖維素醚。根據(jù)其取代基羥丙氧基含量的高低，可以分為低取代羥丙基纖維素（Low-Substituted Hydroxypropyl Cellulose，LHPC），和高取代羥丙基纖維素（H-HPC）。2010版藥典收錄的為低取代纖維素，羥丙基纖維素中羥丙氧基含量是一個重要的參數(shù)，而氣相色譜法測定的結(jié)果，也是作為最終的判定依據(jù)。在氣相色譜法中，色譜柱是檢測、分析的核心。

色譜柱分為填充色譜柱和毛細管色譜柱。毛細管色譜柱雖然在柱效及分析速度方面優(yōu)于填充柱，但填充柱定量分析的準確度及使用成本優(yōu)于毛細管色譜柱。從發(fā)展上看，雖然毛細柱有逐步取代填充柱的趨勢，但是現(xiàn)階段在某些領(lǐng)域（例如：氣體分析、微量水分析等），填充柱在日常分析中仍是一種有價值的分析分流方法。

2010版藥典對色譜固定液（25%苯基-75%甲基聚硅氧烷）、涂布濃度（20%）及色譜柱理論塔板數(shù)（正辛烷不低于1500）有明確規(guī)定，本文從色譜柱規(guī)格、擔體種類等方面考察了色譜柱的柱效。同時確保產(chǎn)品在正常使用條件下具有更佳的穩(wěn)定性和使用壽命。

1 設(shè)備與試劑

1.1 儀器

GC1690氣相色譜儀（杭州捷島科學儀器有限公司）；FA1004電子天平（上海儀電）；電熱恒溫水浴鍋（上海博訊）；2XZ-2真空泵（黃巖匯豐真空泵廠）玻璃器皿。

1.2 試劑

OV-7(CNW色譜固定液)；氯仿（成都科龍化工試劑廠，分析純）；纖維素標樣及樣品（安徽山河藥用輔料股份有限公司提供）。

1.3 試驗材料

不銹鋼空柱國產(chǎn)（i．d．2 mm×0．5 mm×3 m；i．d．3 mm×0．5 mm×2 m）；

載體Chromosorb W AW DMCS)(CNW)；Chromosorb P AW DMCS(上海試劑廠進口分裝)

2 試驗方法

2.1 色譜柱的制備

2．1．1裝填前的準備工作

①管柱清洗

分別使用濃度為10%左右的鹽酸和氫氧化鈉水溶液清洗不銹鋼空柱，烘干待用；

②確定擔體及固定液的量

根據(jù)管柱規(guī)格及擔體的堆積密度，利用公式V=∏d2L/4，固定液（w/w%）=固定液（g）/（固定液+擔體）（g）,計算出擔體及固定液的使用量，考慮實際消耗量，按1．5～2．0的量準備。

③固定液的涂漬

將已知量的固定液溶入氯仿中制成涂漬溶液（溶劑量控制在剛好浸沒擔體為好），將烘干的擔體倒入溶液中，在水浴鍋中直至溶劑揮發(fā)至干，干燥的過程避免用力攪拌，以免擔體破碎。

2．1．2色譜柱的裝填及老化

①使用真空泵，輕巧地將涂漬好的擔體均勻地裝填到不銹鋼空柱中，然后接到色譜儀上老化。

②老化方法：將色譜柱的進樣端接到色譜儀汽化室，檢測端放空，程序升溫老化，也可恒溫進行。

③老化的目的：a、固定液在擔體表面分布更加均勻；b、清除柱內(nèi)殘留溶劑和低沸點雜質(zhì)。

2.2 對照品及樣品的制備

羥丙基纖維素對照品及供試品，委托安徽山河藥用輔料有限公司按照2010版藥典的方法處理。

2.3 纖維素定性、定量分析

樣品檢測色譜條件為：柱箱溫度110℃，進樣器溫度200℃，熱到檢測器溫度250℃，載氣為氫氣，柱流速30 mL/min，橋電流120 mA，進樣量1 μL。根據(jù)藥典規(guī)定，單標定性，內(nèi)標法定量。

3 結(jié)果與討論

3.1 不同的規(guī)格和擔體對填充柱柱效的影響及定性分析

峰1—未知峰；峰2—羥丙氧基；峰3—正辛烷；

峰4—鄰二甲苯

圖1 （i.d)2 mm×3 m紅色載體

圖2 （i.d）3 mm×2 m紅色載體

圖3（i.d）2 mm×3 m白色載體

圖1 ：（柱1）規(guī)格（i．d）2 mm×0．5 mm×3 m，紅色載體Chromosorb P AW DMCS（60目～80目）的柱測試圖譜；

圖2：（柱2）規(guī)格（i．d）3 mm×0．5 mm×2 m，紅色載體Chromosorb P AW DMCS（60目～80目）的柱測試圖譜；

圖3：（柱3）規(guī)格（i．d）2 mm×0．5 mm×3 m，白色載體Chromosorb W AW DMCS（60目～80目）的柱測試圖譜

以上三組圖，反映了各色譜柱的出峰順序和組分名稱。

3.2 柱效考察

在相同的色譜條件下，分別對三種色譜柱的柱效進行測試，評定標準為（內(nèi)標物正辛烷）理論板數(shù)＞1500。校正因子的相對標準偏差≤3%，測試數(shù)據(jù)見表1和表2。

表1 各色譜柱的柱效測試數(shù)據(jù)

表2 柱1柱效的相對標準偏差RSD（n=6）

4 結(jié)論

（1）從表1的柱效數(shù)據(jù)來看，柱1的理論板數(shù)滿足藥典規(guī)定，保留時間、分離度、拖尾因子都優(yōu)于其它兩款柱。

（2）表2數(shù)據(jù)表明，校正因子和理論板數(shù)的相對標準偏差均小于3%，柱1完全能夠滿足藥典中羥丙基纖維素中羥丙氧基的分析要求。

[1]2010版藥典二部，附錄48-50．

[2]邱湘龍，李振華，朱興一．藥用輔料羥丙基纖維素在制劑中的應(yīng)用[J]．中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學雜志，2007,24（8）:693-695．

[3]屠潔．色譜柱的填充和老化[J]．糧油檢測與加工，2006，（2）:51-52．

[4]張娟，耿曉紅．氣相色譜分析中固定液的使用與選擇[J]．河北化工，1998，(2):56-57．

Development and Application of Chromatographic Column Packed with Hydroxy Propyl Cellulose

ZHANG Cai-feng
(Hangzhou Jiedao Scientific Instruments,Hangzhou,Zhejiang 310030，China)

According to the P．R．China Pharmacopoeia 2010,20%OV-7 i．d．2 mm×0．5 mm×3 m filled chromatographic column was developed for determination of hydroxypropoxy content in hydroxy propyl cellulose．The effect of specification of column and carrier on detected composition was inspected and a new method was established for preparation of the column packed with hydroxy propyl cellulose and qualitative as well as quantitative analysis．It is manifested that the resolution and the theoretical stage number are far more superior to the regulations of the Pharmacopoeia．It is also proved to have excellent reproducibility by standard samples．The theoretical stage number(n),the correction factor(RSD)and the relative standard deviations(RSD%)are 6,1．41%,0．40%respectively,completely meet the testing requirement of the Pharmacopoeia．

chromatographic column packed with hydroxy propyl cellulose;development and application；column efficiency

1006-4184（2015）4-0051-03

2014-09-25

張彩鳳（1975-），女，福建邵武人，工程師，本科，主要研究方向為色譜分析。E-mail：172341474@qq．com。