王宇競(綜述)，敖敏高娃，劉恩才(審校)

(呼倫貝爾市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，內(nèi)蒙古呼倫貝爾021008)

眾所周知，缺氧是惡性實(shí)體腫瘤的重要生物學(xué)特征之一，與腫瘤的生長、侵襲、凋亡密切相關(guān)。腫瘤組織氧濃度顯著低于周圍其他正常組織，例如，在乳腺腫瘤中，平均氧分壓大約為10 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)，而在正常乳腺組織氧分壓大約為60 mmHg［1］。缺氧時，通過對氧分壓敏感基因的調(diào)控來改變腫瘤細(xì)胞的表型。而缺氧誘導(dǎo)因子1(hypoxia inducible factor 1，HIF1)在此過程中起重要作用。低氧除能干擾正常細(xì)胞新陳代謝外，還會導(dǎo)致缺氧相關(guān)基因失調(diào)，這種失調(diào)可產(chǎn)生大量致癌因素，包括腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)化、入侵和轉(zhuǎn)移、化療和放療治療抵抗［2］。微 RNAs(microRNAs，miRNAs)是一類內(nèi)源性的，由18～24個核苷酸組成的非編碼的小RNA分子，其在轉(zhuǎn)錄翻譯水平調(diào)節(jié)真核生物的基因表達(dá)。它們廣泛參與許多正常的和病理的細(xì)胞過程，參與轉(zhuǎn)錄后基因調(diào)控，與細(xì)胞分化、代謝和癌變、臨床分期及預(yù)后密切相關(guān)［3］。在眾多的研究中已經(jīng)證實(shí)，miRNAs在腫瘤發(fā)生過程中所起的作用類似于致癌基因和抑癌基因的功能。然而，對于miRNAs在惡性疾病中所扮演的角色并不是十分了解。特別指出的是，對于腫瘤微環(huán)境下miRNAs與缺氧是如何相互作用的缺乏相關(guān)明確研究。近期一些研究表明，miRNAs的幾個關(guān)鍵的信號通路與低氧反應(yīng)相關(guān)聯(lián)，并為適應(yīng)低氧環(huán)境發(fā)揮了重要作用?，F(xiàn)對這些缺氧條件下miRNAs與腫瘤相關(guān)性進(jìn)行綜述，說明miRNAs與低氧之間的相互作用機(jī)制，以便更好地理解其在腫瘤發(fā)生中的作用。

1 缺氧調(diào)節(jié)miRNAs的表達(dá)

以往研究已經(jīng)通過芯片法發(fā)現(xiàn)一些miRNAs對于缺氧的差異性表達(dá)，此類miRNAs稱為缺氧調(diào)節(jié)miRNAs(hypoxia regulator miRNAs，HRMs)。例如miR-210、miR-155、miR-372/373、miR-10b、miR-185-3P 和 miR-216a-5P認(rèn)為是上調(diào)的 miRNAs，而miR-20b、miR-200b、miR-625-5P是 下 調(diào) 的 miRNAs［4-13］。 除 了HRMs miR-210外，其他大部分HRMs缺少相關(guān)表型一致性的研究，這種缺乏一致性的研究可能歸因于技術(shù)變量因素，包括敏感性篩選方法中所述的持續(xù)時間和缺氧嚴(yán)重程度的劃分［14］。除外種類繁多的miRNA表達(dá)譜平臺外，研究認(rèn)為，對于miRNA的檢測缺乏適當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)化的方法，也是造成miRNA測量誤差的重要原因［15-19］。目前為止，大約有3000種人類miRNA被命名，而大部分用于miRNA的分析方法均建立在這樣的假設(shè)情況下，即該芯片技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)化方法所用的陣列探針數(shù)足夠大(＞5000)，并能夠獲得高通量的結(jié)果，但事實(shí)上，信息量大并不等同于質(zhì)量高。因此顯然目前建立的方法不能滿足miRNA表達(dá)譜的分析要求，如miR-210-3P僅通過微陣列平臺不能檢測到，需要即時聚合酶鏈反應(yīng)可探測到［5］，所以除外有具體的標(biāo)準(zhǔn)化檢測作業(yè)體系外，從陣列數(shù)據(jù)庫中準(zhǔn)確、有效地識別出有功能的 HRMs也十分重要。自從 Kulshreshtha等［20］在2007年第1次報(bào)道m(xù)iRNA可被缺氧誘導(dǎo)后，隨后其他大量關(guān)于HRMs的研究也相繼展開。目前已知報(bào)道的缺氧誘導(dǎo)上調(diào)的 miRNAs 如 下:miR-10b，miR-152，miR-191，miR-206，miR-224，miR-103，miR-155，miR-193b，miR-21，miR-23，miR-107，miR-125a，miR-181b，miR-188，miR-203，miR-205，miR-210，miR-213，miR-24，miR-26，miR-27，miR-30a-5p，miR-30c，miR-30d，miR-322，miR-333，miR-335，miR-339，miR-373，miR-451，miR-491，miR-497，miR-185-3P，miR-216a-5P。下調(diào)的 miRNAs 有 miR-22，miR-25，miR-30，miR-424，miR-449，miR-489，let-7f，miR-128b，miR-150，miR-159，miR-17-92，miR-181d， miR-196a， miR-196b， miR-199a， miR-199b，miR-200a，miR-200b，miR-20b，miR-625-5P。

缺氧反應(yīng)原件(hypoxic response element，HRE)位于HRM啟動子區(qū)，能與HIF1的α和β亞基結(jié)合，同時缺氧又增強(qiáng)此復(fù)合物的親和力，繼而促使 HRM轉(zhuǎn)錄。許多 HRMs，miR-210，miR-155，miR-373，已被證實(shí)含有 HRE，并通過 HIF1調(diào)節(jié) HRMs 的表達(dá)［4，6，11］。

2 miRNA參與調(diào)控

類似于蛋白編碼基因，miRNA的轉(zhuǎn)錄也同樣遵循RNA聚合酶參與的傳統(tǒng)轉(zhuǎn)錄機(jī)制，因而轉(zhuǎn)錄因子在調(diào)節(jié)miRNA表達(dá)中起決定作用。如TWIST、過氧化物增殖物激活受體γ和轉(zhuǎn)錄因子GATA1在轉(zhuǎn)錄水平均可被HIF1所調(diào)節(jié)［21-23］，其結(jié)果是，HIF1可以通過這些轉(zhuǎn)錄因子參與miRNA表達(dá)調(diào)控。例如，在低氧時HIF1參與調(diào)控下，TWIST可誘導(dǎo)上調(diào)miR-10b。miR-10b是一個眾所周知的介導(dǎo)不同種人類癌癥轉(zhuǎn)移的致癌miRNA［8］。相反，Lei等［12］發(fā)現(xiàn)敲除HIF1后導(dǎo)致miR-20b表達(dá)增加，同時Chan等［13］則報(bào)道m(xù)iR-200b表達(dá)則降低。由低氧激活的復(fù)雜性分子鉸鏈機(jī)制中，miRNA不僅直接受缺氧調(diào)控，還能調(diào)節(jié)缺氧相關(guān)基因的表達(dá)。例如，Kelly等［24］發(fā)現(xiàn)缺氧誘導(dǎo)miR-210抑制甘油醛-3-磷酸脫氫酶1表達(dá)，進(jìn)而通過降低超羥化穩(wěn)定HIF1α的表達(dá)，同理cullin2，泛素連接酶系統(tǒng)的一個支架蛋白，可以被miR-424所抑制。假設(shè)缺氧能誘導(dǎo)人類內(nèi)皮細(xì)胞中miR-424表達(dá)，cullin2的表達(dá)下降則可能穩(wěn)定 HIF1α［25］。因此在低氧誘導(dǎo)的HRMs中，一些miRNAs靶基因通過形成正反饋環(huán)穩(wěn)定HIF1，此外一些缺氧下調(diào)的HRMs，如miR-18a、miR-20b、miR-199、miR-17-92則通過直接靶向作用抑制HIF1表達(dá)［26-29］。Brunning等［6］也研究指出在體內(nèi)和體外模型中，缺氧誘導(dǎo)的miR-155可能對HIF1α的穩(wěn)定性和活性有負(fù)面作用。另外，一些非HRMs，miR-519c和miR-107分別以HIF1α和HIF1β為靶位點(diǎn)。目前，HIF2作為另一種重要的亞基，在缺氧方面已廣泛研究，但很少有報(bào)道HIF2與miRNA之間的關(guān)聯(lián)性。最新研究表明，含有3-非編碼區(qū)的 HIF-3α包含miR-485-5P和miR-210-3P的靶點(diǎn)，并因缺氧而表達(dá)上調(diào)［5］。除HIF1外，其他基因和信號通路也可能有助于增加腫瘤細(xì)胞對缺氧的適應(yīng)性。如缺氧可經(jīng)由AKT2依賴性過程誘導(dǎo)miR-21，由AKT2轉(zhuǎn)導(dǎo)的低氧誘導(dǎo)信號能提高核因子κB和環(huán)磷腺苷效應(yīng)原件結(jié)合蛋白活性，繼而轉(zhuǎn)錄上調(diào)miR-21的表達(dá)［29］。缺氧還參與 miRNA的生物源性，蛋白 Argonaute2(Ago2)是RNA誘導(dǎo)沉寂復(fù)合物的核心元件，而Ago2蛋白羥化是Ago2蛋白聚集成RNA誘導(dǎo)沉寂復(fù)合物中的熱激蛋白90的關(guān)鍵一步。以往研究表明低氧能增加Ⅰ型膠原脯氨酸-4-羥化酶水平，這可能導(dǎo)致脯氨酸羥基化和Ago2的累積，因此通過任意HIF1獨(dú)立或依賴途徑均可增加Ago2核酸內(nèi)切酶活性［30-31］。

3 HRMs在人類腫瘤中的作用

血管生成是通過組織重塑的高度協(xié)調(diào)導(dǎo)致新生血管生成，缺氧區(qū)域通過促血管生成因子誘導(dǎo)血管生成［32-33］。當(dāng)細(xì)胞缺氧時，HIF1通過轉(zhuǎn)錄調(diào)控機(jī)制上調(diào)多種血管因子生成，包括血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)和血管生成素2，基質(zhì)細(xì)胞衍生因子和干細(xì)胞因子［32-35］。這些因子與血管內(nèi)皮與平滑肌細(xì)胞表面的特殊受體結(jié)合時，在原有血管上開始有新生毛細(xì)血管生成，而血管生成對于腫瘤生長和轉(zhuǎn)移具有重要作用。近期研究揭示，特殊的HRMs在血管生成調(diào)控中具有輔助作用，研究指出miR-210以酪氨酸激酶的配體肝配蛋白A3為靶點(diǎn)，并促進(jìn)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞分化［36］。同時缺氧誘導(dǎo)miR-424通過靶基因CUL2促進(jìn)血管生成，CUL2是支架蛋白泛素連接酶系統(tǒng)的關(guān)鍵組成成分，這個過程穩(wěn)定了 HIF1α活性，并同時轉(zhuǎn)錄激活VEGF［25］。相反的，miR-20b則通過VEGF和HIF1α對血管生成有負(fù)向調(diào)節(jié)作用［12，37］。在低氧環(huán)境下，miR-20b 經(jīng)由HIF1α使miR-20b表達(dá)下調(diào)，并減弱對VEGF和HIF1α的抑制作用。這種miR-20b、HIF1α和VEGF之間的相互調(diào)節(jié)作用可使腫瘤細(xì)胞適應(yīng)不同的缺氧濃度［12，37］。此外，miR-519c也直接以HIF1α為靶點(diǎn)抑制血管生成，miR-21也已證實(shí)能夠以抑癌基因?yàn)榘悬c(diǎn)，激活 AKT2和 ERK1/2信號通路，繼而HIF1α和VEGF表達(dá)增加，以誘導(dǎo)腫瘤血管生成［38］。在體外培養(yǎng)的富含miR-200b的人微血管內(nèi)皮細(xì)胞模型中，表現(xiàn)出抑制血管生長反應(yīng)性的特性，相反在miR-200b缺乏的人微血管內(nèi)皮細(xì)胞模型中則出現(xiàn)血管生成反應(yīng)性升高的特性，而氧含量不足和HIF1α穩(wěn)定的活性亦可抑制miR-200b的表達(dá)［13］。此外，缺氧環(huán)境下miR-107表達(dá)下調(diào)則可促進(jìn)腫瘤血管生成，其原因可能是由于miR-107對HIF1α抑制減少造成的［39］。

4 細(xì)胞周期和增殖

miR-210基因被證實(shí)抑制E2F3和MNT表達(dá)。E2F3屬于E2F家族，是通過影響G1/S期所需DNA合成控制細(xì)胞周期的進(jìn)程。MNT是已知c-myc的拮抗劑，參與細(xì)胞周期的調(diào)控和增殖。通過誘導(dǎo)miR-210使MNT表達(dá)抑制，進(jìn)而加快G1/S期轉(zhuǎn)換，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖［40］。因此，缺氧誘導(dǎo)miR-210可能參與腫瘤細(xì)胞的一些重要的細(xì)胞過程。

5 代謝和凋亡

當(dāng)氧水平不足時，細(xì)胞新陳代謝由線粒體的氧化磷酸化轉(zhuǎn)變?yōu)樘墙徒庑问?，同時HIF1可能參與對新陳代謝水平改變起關(guān)鍵作用的激酶和酶的誘導(dǎo)。研究表明，miRNA-126以胰島素受體底物1為靶基因，抑制惡性間皮瘤并妨礙線粒體功能［41］。最近一些研究小組也已證實(shí)miR-210通過抑制線粒體代謝中若干個步驟，特別是電子傳遞鏈復(fù)合物來協(xié)助這種代謝轉(zhuǎn)變［42-45］。miR-210以鐵硫簇同源支架和細(xì)胞色素C氧化酶聚集因子為靶點(diǎn)抑制線粒體呼吸。此外，miR-210還以在細(xì)胞代謝中起重要作用的還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸脫氫酶(輔酶)1α-復(fù)型4(NDUFA4)和琥珀酸復(fù)合物以及GDP-1為靶點(diǎn)［44］，參與細(xì)胞代謝。

Ma等［46］在近期在對前列腺癌細(xì)胞的研究中指出缺氧誘導(dǎo)的自噬作用在一定程度上受控于miR-96，miR-96能通過哺乳動物雷帕霉素靶蛋白或自噬相關(guān)蛋白7起到抑制或促進(jìn)自噬的作用。而此相反作用取決于miR-96的表達(dá)水平:miR-96通過抑制雷帕霉素靶蛋白而刺激自噬，當(dāng)抑制miR-96時會消除缺氧誘導(dǎo)的自噬;相反高表達(dá)的miR-96則通過抑制自噬相關(guān)蛋白7來抑制自噬。而自噬作用在腫瘤中則使腫瘤細(xì)胞失去活力，從而抑制腫瘤的生長。此外，F(xiàn)asanaro等［36］發(fā)現(xiàn)在正常和缺氧條件下，以肝配蛋白A3為靶基因的miR-210抑制內(nèi)皮細(xì)胞凋亡，另外 Kim等［47］發(fā)現(xiàn)miR-210表達(dá)凋亡組分CASP8AP2通過缺血預(yù)處理可以增加間充質(zhì)干細(xì)胞的存活性。近期發(fā)現(xiàn)，miR-497是一種與細(xì)胞凋亡相關(guān)的miRNAs。在缺氧的環(huán)境下，神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞中，過表達(dá)的miR-497通過程序性細(xì)胞凋亡因子4對因缺氧誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡表現(xiàn)出保護(hù)性機(jī)制［48］。其他研究也表明miR-21可能通過人第10號染色體缺失的磷酸酶及張力蛋白同源基因和Fas配體調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡［49］。

6 癌癥轉(zhuǎn)移和治療

Ying等［50］報(bào)道在肝細(xì)胞癌細(xì)胞中，缺氧誘導(dǎo)的miR-210可促進(jìn)肝細(xì)胞癌轉(zhuǎn)移。液泡膜蛋白1被確定為miR-210的直接靶基因，在缺氧條件下，液泡膜蛋白1的下調(diào)與肝細(xì)胞癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移有關(guān)。Chen等［51］發(fā)現(xiàn)缺氧時，miR103/107在結(jié)腸腫瘤細(xì)胞中表達(dá)升高，并抑制了腫瘤轉(zhuǎn)移的抑制物-凋亡相關(guān)蛋白酶和Kruppel樣因子。Loayza-Puch等［11］研究指出，在缺氧條件下，miR372/373通過HIF1α和TWIST的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)和表達(dá)上調(diào)，而 miR-210則通過 RAS/ERK信號上調(diào)，這些HRMs相繼降低膜錨定金屬蛋白酶調(diào)節(jié)物RECK基因表達(dá)，而RECK則是腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移的抑制物。缺氧是腫瘤微環(huán)境的標(biāo)志，缺氧與抗癌療法中放/化療相關(guān)已經(jīng)明確。但是在缺氧條件下，癌細(xì)胞如何抵抗抗癌治療的機(jī)制還不十分明確。Gee等［52］通過大量數(shù)據(jù)說明miRNAs是腫瘤適應(yīng)低氧反應(yīng)的重要成分，超表達(dá)的miR-210，典型的缺氧相關(guān)基因轉(zhuǎn)與腫瘤的不良預(yù)后相關(guān)。通過反義基因療法，穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的miR-210反義寡核苷酸能顯著增強(qiáng)人肝癌細(xì)胞對放射性的敏感性，從而抑制細(xì)胞增殖和促進(jìn)細(xì)胞凋亡。如前所述，神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞中，異常過表達(dá)miR-497以程序性細(xì)胞凋亡因子4為靶基因增強(qiáng)對化療藥物的抵抗性，相反，抑制其會促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的凋亡，并提高神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞對 TMZ的敏感性［48］。因此HRMs可能成為未來放/化療治療中關(guān)鍵的生物標(biāo)志物和治療靶點(diǎn)。

7 結(jié)語

雖然目前有許多關(guān)于缺氧和人類癌癥的報(bào)道，但缺氧對于生理學(xué)和病理生理學(xué)上的調(diào)節(jié)機(jī)制還知之甚少。而對于miRNAs的研究有望揭示缺氧條件下的調(diào)節(jié)機(jī)制，原因有:①細(xì)胞水平上，miRNAs通過轉(zhuǎn)錄和翻譯調(diào)節(jié)對由缺氧引起的壓力反應(yīng)快速響應(yīng);②miRNAs能同時調(diào)節(jié)大量基因并影響到多個組件的信號通路。因此，針對未來HRMs的研究，可能側(cè)重于以下幾個方面:①新的HRMs的發(fā)現(xiàn)及其靶基因的識別;②驗(yàn)證新發(fā)現(xiàn)的HRMs及其在缺氧條件下的功能;③以HRMs為靶位點(diǎn)的新型治療和預(yù)防藥物的發(fā)展。近期人類癌癥中關(guān)于缺氧調(diào)節(jié)miRNAs的研究，以及癌癥微環(huán)境中miRNAs所扮演調(diào)節(jié)角色的闡述會對今后抗癌藥物的發(fā)展有所幫助。

［1］Marxsen JH，Schmitt O，Metzen E，et al.Vascular endothelial growth factor gene expression in the human breast cancer cell line MX-1 is controlled by O2availability in vitro and in vivo［J］.Ann Anat，2001，183(3):243-249.

［2］Semenza GL.HIF-1 and tumor progression:pathophysiology and therapeutics［J］.Trends Mol Med，2002，8(4 Suppl):S62-67.

［3］Greco S，Martelli F.MicroRNAs in Hypoxia Response［J］.Antioxid Redox Signal，2014，21(8):1164-1166.

［4］Huang X，Ding L，Bennewith KL，et al.Hypoxia-inducible mir-210 regulates normoxic gene expression involved in tumor initiation［J］.Mol Cell，2009，35(6):856-867.

［5］Gits CM，van Kuijk PF，de Rijck JC，et al.MicroRNA response to hypoxic stress in soft tissue sarcoma cells:microRNA mediated regulation of HIF3α［J］.BMC Cancer，2014，14:429.

［6］Bruning U，Cerone L，Neufeld Z，et al.MicroRNA-155 promotes resolution of hypoxia-inducible factor 1alpha activity during prolonged hypoxia［J］.Mol Cell Biol，2011，31(19):4087-4096.

［7］Crosby ME，Kulshreshtha R，Ivan M，et al.MicroRNA regulation of DNA repair gene expression in hypoxic stress［J］.Cancer Res，2009，69(3):1221-1229.

［8］Haque I，Banerjee S，Mehta S，et al.Cysteine-rich 61-connective tissue growth factor-nephroblastoma-overexpressed 5(CCN5)/Wnt-1-induced signaling protein-2(WISP-2)regulates microRNA-10b via hypoxia-inducible factor-1α-TWIST signaling networks in human breast cancer cells［J］.J Biol Chem，2011，286(50):43475-43485.

［9］Mathieu J，Zhang Z，Zhou W，et al.HIF induces human embryonic stem cell markers in cancer cells［J］.Cancer Res，2011，71(13):4640-4652.

［10］Neal CS，Michael MZ，Rawlings LH，et al.The VHL-dependent regulation of microRNAs in renal cancer［J］.BMC Med，2010，8:64.

［11］Loayza-Puch F，Yoshida Y，Matsuzaki T，et al.Hypoxia and RAS-signaling pathways converge on，and cooperatively downregulate，the RECK tumor-suppressor protein through microRNAs［J］.Oncogene，2010，29(18):2638-2648.

［12］Lei Z，Li B，Yang Z，et al.Regulation of HIF-1alpha and VEGF by miR-20b tunes tumor cells to adapt to the alteration of oxygen concentration［J］.PLoS One，2009，4(10):e7629.

［13］Chan YC，Khanna S，Roy S，et al.miR-200b targets Ets-1 and is down-regulated by hypoxia to induce angiogenic response of endothelial cells［J］.J Biol Chem，2011，286(3):2047-2056.

［14］Chan SY，Loscalzo J.MicroRNA-210:a unique and pleiotropic hypoxamir［J］.Cell Cycle，2010，9(6):1072-1083.

［15］Huang X，Le QT，Giaccia AJ.MiR-210--micromanager of the hypoxia pathway［J］.Trends Mol Med，2010，16(5):230-237.

［16］Wang B，Howel P，Bruheim S，et al.Systematic evaluation of three microRNA profiling platforms:microarray，beads array，and quantitative real-time PCR array［J］.PLoS One，2011，6(2):e17167.

［17］Wang B，Wang XF，Howell P，et al.A personalized microRNA microarray normalization method using a logistic regression model［J］.Bioinformatics，2010，26(2):228-234.

［18］Wang B，Wang XF，Xi Y.Normalizing bead-based microRNA expression data:a measurement error model-based approach［J］.Bioinformatics，2011，27(11):1506-1512.

［19］Wang B，Zhang SG，Wang XF，et al.Testing for differentiallyexpressed microRNAs with errors-in-variables nonparametric regression［J］.PLoS One，2012，7(5):e37537.

［20］Kulshreshtha R，F(xiàn)erracin M，Wojcik SE，et al.A microRNA signature of hypoxia［J］.Mol Cell Biol，2007，27(5):1859-1867.

［21］Yang MH，Wu MZ，Chiou SH，et al.Direct regulation of TWIST by HIF-1alpha promotes metastasis［J］.Nat Cell Biol，2008，10(3):295-305.

［22］Krishnan J，Suter M，Windak R，et al.Activation of a HIF1alpha-PPARgamma axis underlies the integration of glycolytic and lipid anabolic pathways in pathologic cardiac hypertrophy［J］.Cell Metab，2009，9(6):512-524.

［23］Zhang FL，Shen GM，Liu XL，et al.Hypoxia-inducible factor 1-mediated human GATA1 induction promotes erythroid differentiation under hypoxic conditions［J］.J Cell Mol Med，2012，16(8):1889-1899.

［24］Li X，Gao L，Cui Q，et al.Sulindac inhibits tumor cell invasion by suppressing NF-κB-mediated transcription of microRNAs［J］.Oncogene，2012，31(48):4979-4986.

［25］Ma L.Role of miR-10b in breast cancer metastasis［J］.Breast Cancer Res，2010，12(5):210.

［26］Taguchi A，Yanagisawa K，Tanaka M，et al.Identification of hypoxia-inducible factor-1 alpha as a novel target for miR-17-92 microRNA cluster［J］.Cancer Res，2008，68(14):5540-5545.

［27］Rane S，He M，Sayed D，et al.Downregulation of miR-199a derepresses hypoxia-inducible factor-1alpha and Sirtuin 1 and recapitulates hypoxia preconditioning in cardiac myocytes［J］.Circ Res，2009，104(7):879-886.

［28］Krutilina R，Sun W，Sethuraman A，et al.MicroRNA-18a inhibits hypoxia-inducible factor 1-alpha activity and lung metastasis in basal breast cancers［J］.Breast Cancer Res，2014，16(4):R78.

［29］Polytarchou C，Iliopoulos D，Hatziapostolou M，et al.Akt2 regulates all Akt isoforms and promotes resistance to hypoxia through induction of miR-21 upon oxygen deprivation［J］.Cancer Res，2011，71(13):4720-4731.

［30］Wu C，So J，Davis-Dusenbery BN，et al.Hypoxia potentiates microRNA-mediated gene silencing through posttranslational modi-fication of Argonaute2［J］.Mol Cell Biol，2011，31(23):4760-4774.

［31］Hofbauer KH，Gess B，Lohaus C，et al.Oxygen tension regulates the expression of a group of procollagen hydroxylases［J］.Eur J Biochem，2003，270(22):4515-45122.

［32］Forsythe JA，Jiang BH，Iyer NV，et al.Activation of vascular endothelial growth factor gene transcription by hypoxia-inducible factor 1［J］.Mol Cell Biol，1996，16(9):4604-4013.

［33］Simon MP，Tournaire R，Pouyssegur J.The angiopoietin-2 gene of endothelial cells is up-regulated in hypoxia by a HIF binding site located in its first intron and by the central factors GATA-2 and Ets-1［J］.J Cell Physiol，2008，217(3):809-818.

［34］Ceradini DJ，Kulkarni AR，Callaghan MJ，et al.Progenitor cell trafficking is regulated by hypoxic gradients through HIF-1 induction of SDF-1［J］.Nat Med，2004，10(8):858-864.

［35］Kelly BD，Hackett SF，Hirota K，et al.Cell type-specific regulation of angiogenic growth factor gene expression and induction of angiogenesis in nonischemic tissue by a constitutively active form of hypoxia-inducible factor 1［J］.Circ Res，2003，93(11):1074-1081.

［36］Fasanaro P，D'Alessandra Y，Di Stefano V，et al.MicroRNA-210 modulates endothelial cell response to hypoxia and inhibits the receptor tyrosine kinase ligand Ephrin-A3［J］.J Biol Chem，2008，283(23):15878-15883.

［37］Cascio S，D'Andrea A，F(xiàn)erla R，et al.miR-20b modulates VEGF expression by targeting HIF-1 alpha and STAT3 in MCF-7 breast cancer cells［J］.J Cell Physiol，2010，224(1):242-249.

［38］Liu LZ，Li C，Chen Q，et al.MiR-21 induced angiogenesis through AKT and ERK activation and HIF-1α expression［J］.PLoS One，2011，6(4):e19139.

［39］Yamakuchi M，Lotterman CD，Bao C，et al.P53-induced microRNA-107 inhibits HIF-1 and tumor angiogenesis［J］.Proc Natl Acad Sci U S A，2010，107(14):6334-6339.

［40］Zhang Z，Sun H，Dai H，et al.MicroRNA miR-210 modulates cellular response to hypoxia through the MYC antagonist MNT［J］.Cell Cycle，2009，8(17):2756-2768.

［41］Tomasetti M，Nocchi L，Staffolani S，et al.MicroRNA-126 suppresses mesothelioma malignancy by targeting IRS1 and interfering with the mitochondrial function［J］.Antioxid Redox Signal，2014，21(15):2109-2125.

［42］Chan SY，Zhang YY，Hemann C，et al.MicroRNA-210 controls mitochondrial metabolism during hypoxia by repressing the ironsulfur cluster assembly proteins ISCU1/2［J］.Cell Metab，2009，10(4):273-284.

［43］Fasanaro P，Greco S，Lorenzi M，et al.An integrated approach for experimental target identification of hypoxia-induced miR-210［J］.J Biol Chem，2009，284(50):35134-35143.

［44］Favaro E，Ramachandran A，McCormick R，et al.MicroRNA-210 regulates mitochondrial free radical response to hypoxia and krebs cycle in cancer cells by targeting iron sulfur cluster protein ISCU［J］.PLoS One，2010，5(4):e10345.

［45］Chen Z，Li Y，Zhang H，et al.Hypoxia-regulated microRNA-210 modulates mitochondrial function and decreases ISCU and COX10 expression［J］.Oncogene，2010，29(30):4362-4368.

［46］Ma Y，Yang HZ，Dong BJ，et al.Biphasic regulation of autophagy by miR-96 in prostate cancer cells under hypoxia［J］.Oncotarget，2014，5(19):9169-9182.

［47］Kim HW，Haider HK，Jiang S，et al.Ischemic preconditioning augments survival of stem cells via miR-210 expression by targeting caspase-8-associated protein 2［J］.J Biol Chem，2009，284(48):33161-33168.

［48］Lan J，Xue Y，Chen H，et al.Hypoxia-induced miR-497 decreases glioma cell sensitivity to TMZ by inhibiting apoptosis［J］.FEBS Lett，2014，588(18):3333-3339.

［49］Sayed D，He M，Hong C，et al.MicroRNA-21 is a downstream effector of AKT that mediates its antiapoptotic effects via suppression ofFas ligand［J］.JBiolChem，2010，285(26):20281-20290.

［50］Ying Q，Liang L，Guo W，et al.Hypoxia-inducible microRNA-210 augments the metastatic potential of tumor cells by targeting vacuole membrane protein 1 in hepatocellular carcinoma［J］.Hepatology，2011，54(6):2064-2075.

［51］Chen HY，Lin YM，Chung HC，et al.miR-103/107 promote metastasis of colorectal cancer by targeting the metastasis suppressors DAPK and KLF4［J］.Cancer Res，2012，72(14):3631-3641.

［52］Gee HE，Ivan C，Calin GA，et al.HypoxamiRs and cancer:from biology to targeted therapy［J］.Antioxid Redox Signal，2014，21(8):1220-1238.