健康人員血小板計數(shù)假性減少的原因及校正與復(fù)核*

秦瑞娟劉勝利

(北京市通州區(qū)潞河醫(yī)院體檢中心， 北京 101100)

【摘要】目的探討健康體檢人員血小板計數(shù)假性減少的原因及校正與復(fù)核。方法通過EDTA-K2抗凝血涂片來進(jìn)行復(fù)查并通過血小板直方圖進(jìn)行分析。結(jié)果采用BC-3000檢查正常結(jié)果為(312±147)×10`9/L，顯微結(jié)果為(301±139)×10`9/L，兩者無明顯統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；大血小板和血小板聚集采用儀器檢測和顯微鏡計數(shù)兩者差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。儀器檢測結(jié)果較顯微鏡計數(shù)偏低。小紅細(xì)胞采用儀器檢測和顯微鏡檢測差異亦有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。儀器檢測結(jié)果相對偏高。紅細(xì)胞碎片采用儀器組檢測和顯微鏡計數(shù)差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。 EDTA-K2涂片復(fù)查結(jié)果發(fā)現(xiàn)影響血小板計數(shù)的假性異常結(jié)果為52.9%，并且通過指導(dǎo)采取復(fù)核和校驗的措施。 結(jié)論涂片法復(fù)查配合血小板的直方圖的分析結(jié)果，可以快速的發(fā)現(xiàn)影響血小板計數(shù)的原因，并且采取相應(yīng)的復(fù)查和驗證措施，同時強(qiáng)化質(zhì)量分析方法與控制，可提高檢驗質(zhì)量。

【關(guān)鍵詞】健康查體； 血小板； EDTA-K2抗凝血； 假性； 因素；

【中圖分類號】R 446.11`+3

【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】A

doi：10.3969/j.issn.1672-3511.2015.10.041

Abstract【】ObjectiveTo investigate reason of false reducing in healthy and correction and review. MethodsThe EDTA-K2 anticoagulated blood smear were re-checked and analyzed with platelet histogram. ResultsThe results of BC-3000 (312±147)×10`9/L) and microscopic (301±139)×10`9/L were not statistically significant (P>0.05). The results of big platelet, platelet aggregation, microerythrocyte and bib treated with BC-3000 and microscopic were significantly different (P<0.01). The incidence of false reducing of blood platelet count in healthy was 52.9% rechecked by EDTA-K2 smear examination. ConclusionSmear review with the analysis results of platelet histogram can quickly find reasons which affect the platelet count, take the review and verification measures, strengthen the analysis and quality control methods and improve the inspection quality.

基金項目：北京市科技新星基金項目(H020821200161)

收稿日期：( 2014-09-03； 編輯： 陳舟貴)

ThereasonoffalsereducingofbloodplateletcountinhealthyandcorrectionandreviewQINRuijuan，LIUShengli

(Luhe Hospital, Beijing 101100, China)

【Keywords】Healthexamination;Platelet;EDTA-K2anticoagulant;False;Factors

血小板是血液的組成部分，無論是在機(jī)體的凝血、止血及血栓的形成有著重要作用。在血液細(xì)胞分析中，對血小板的數(shù)量統(tǒng)計需要很高的準(zhǔn)確度。在實際檢查中，常因檢查儀器、血小板的聚集、采血及一些其他的因素而影響檢驗結(jié)果。為此本文采用邁瑞B(yǎng)C-3000plus(BC-3000)血細(xì)胞分析儀對健康體查人員進(jìn)行檢查，并對血小板計數(shù)假性減少的原因及校正作分析與探討。

1資料與方法

1.1儀器與試劑邁瑞B(yǎng)C-3000plus(BC-3000)血細(xì)胞分析儀；奧林巴斯光學(xué)顯微鏡(日本)；改良牛巴計數(shù)盤(上海求精生化試劑有限公司)。主要試劑是由上海求精生化試劑有限公司提供；草酸銨稀釋液和瑞染色的方法是根據(jù)《全國臨床檢驗操作規(guī)程》的方法配制的；全血質(zhì)控物是由珠海貝索生物有限公司提供；乙二胺四乙酸(EDTA)-K2真空采血管是由合肥志宏生物提供。

1.2方法

1.2.1標(biāo)本的采集本院2011年8月～2013年12月體檢人員800例，其中男性380例，女性420例，平均年齡(36.7±17.8)歲，通過EDTA-K2真空采血管采取靜脈血液2.0ml，在充分搖勻后，2h內(nèi)完成全部的檢測過程。

1.2.2檢測方法正常進(jìn)行儀器維護(hù)后進(jìn)行細(xì)胞的檢測，根據(jù)血小板的直方圖及MCV、MPV等參數(shù)，得到正常者732例、血小板聚集者12例、大血小板者26例、小紅細(xì)胞干擾者17例以及紅細(xì)胞碎片組13例。同時采用人工方法進(jìn)行計數(shù)及涂片瑞染色后通過油鏡觀察血小板的分布情況。

1.3統(tǒng)計學(xué)分析所得數(shù)據(jù)采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，配對資料進(jìn)行t檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1正常血小板檢測結(jié)果采用BC-3000儀器檢測和顯微鏡計數(shù)兩種檢查結(jié)果顯示差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，見表1。

表1　兩種檢測方式正常血小板結(jié)果比較 ±s)

2.2異常血小板檢測結(jié)果血小板直方圖分布異常的結(jié)果，大血小板和血小板聚集兩者采用儀器檢測結(jié)果和顯微鏡計數(shù)差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，儀器檢測結(jié)果較顯微鏡計數(shù)偏低；小紅細(xì)胞儀器檢測和顯微鏡檢測差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，儀器檢測結(jié)果相對偏高；紅細(xì)胞碎片采用儀器檢測和顯微鏡計數(shù)差異亦有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，儀器檢測結(jié)果偏高，見表2。

表2　兩種檢測方式異常血小板計數(shù)結(jié)果比較 ±s)

2.3兩種檢測結(jié)果統(tǒng)計BC-3000儀器和顯微鏡檢測兩種檢測有差異性。BC-3000檢出血小板異常68例，顯微鏡檢出25例假性異常為52.9%(P<0.05)。

3結(jié)論

血小板是臨床上一種作為有沒有出血的一項重要指標(biāo)，在血栓以及一些出血性疾病的診斷和治療中都起著十分重要的作用。尤其是在動脈粥樣硬化和一些炎癥疾病當(dāng)中扮演著十分重要的角色。在臨床應(yīng)用中考慮到是否出血的可能，采用血小板計數(shù)的方法是否可靠是十分重要的。導(dǎo)致健康查體人員的血小板的假性減少的最常見的原因是因為人為因素造成的血小板凝集和凝塊[1-3]。采集標(biāo)本的不正確、技術(shù)和手法不熟練、反復(fù)穿刺、采血帶綁的時間太長等一系列原因，都有可能導(dǎo)致組織中的凝血因子混入到血液當(dāng)中，形成了肉眼觀察不到的小凝血塊所致。另外，在采到血液樣本以后，混合的不及時、不完全、不充分、血液和抗凝劑的比例不恰當(dāng)，這些也可能造成血小板的聚集[4～6]。因此要求采血人員提高采血技術(shù)，嚴(yán)格按照采血要求進(jìn)行采血，盡量減少影響血小板計數(shù)的一些人為因素，提高檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確度。

采血不當(dāng)因素是最常見的造成血小板假性減少的因素，已經(jīng)占到了47.6%，主要就是抽血技術(shù)不熟練所致，在臨床過程中，實習(xí)護(hù)士會經(jīng)常采血，一般很難做到一針見血的效果，這樣就造成了抽血時間的延長，形成小的凝塊，在抽血后的處理不恰當(dāng)也是因素之一?；颊叩囊蛩匕ǎ耗挲g大的患者和一些新生兒，由于血管的細(xì)小和不充盈，會在抽血的時候造成一定的困難，并且老年人的血液呈現(xiàn)出一種高凝狀態(tài)，在抽血的過程中稍有不恰當(dāng)就會引起血小板的聚集[7～10]。這些由于采血不恰當(dāng)造成的血小板的假性減少。

由于EDTA-K2抗凝劑是不影響血細(xì)胞的基本形態(tài)，同時還可以抑制血小板的聚集，所以在日常工作中常常將其作為血細(xì)胞分析的第一抗凝劑來選擇。由于，在日常的檢驗檢測工作中，經(jīng)常會發(fā)現(xiàn)EDTA-K2抗凝劑也會引起血小板的假性減少，這主要可能是因為部分患者的血清中免疫球蛋白的升高造成的，出現(xiàn)了抗血小板自身的抗體所致，引起了檢測中的血小板的聚集，不過這些都是常見于腫瘤、肝病等的患者當(dāng)中[11～13]。

冷凝集素是一種人體自身產(chǎn)生的抗體，在受到外部冷的環(huán)境后使血細(xì)胞出現(xiàn)了凝集的現(xiàn)象，最終引起血細(xì)胞計數(shù)儀的計算失誤。急性的感染以及精神分裂等疾病都可能引起冷凝集素的短期升高。這時用血細(xì)胞分析儀進(jìn)行檢測分析時，結(jié)果會出現(xiàn)誤差。如果將血液進(jìn)行37℃孵育15min后進(jìn)行檢測，就可以排除冷凝集素對檢測結(jié)果的干擾了。因此，在報告的血小板減少時，我們應(yīng)十分注意，對可凝的病例，除了要積極聯(lián)系臨床以外，應(yīng)當(dāng)十分注意排除其中的冷凝集素的影響。對可能是冷凝集素的標(biāo)本，應(yīng)當(dāng)進(jìn)行采血后，孵育15min后進(jìn)行檢測。

在應(yīng)用到電阻抗原理時進(jìn)行血小板的計數(shù)，儀器顯示的血小板的閾值處在2fl～30fl之間，正常的血小板的體積是保持在3fl～20fl之間的。如果血小板的

體積大于30fl時，血小板就會被當(dāng)成小紅細(xì)胞而不是血小板，這樣就不會計算在內(nèi)，而當(dāng)做紅細(xì)胞來進(jìn)行計算。如果血小板的體積小于2fl時，儀器就會自動將其當(dāng)做基本的噪音來進(jìn)行處理，而不進(jìn)行基本的計數(shù)，這就會導(dǎo)致計數(shù)的結(jié)果偏低。比如巨大血小板綜合癥時，血小板的體積就會變大，而脾功能亢進(jìn)、白血病、再生障礙性貧血等疾病常常會出現(xiàn)小血小板[14，15]。

4結(jié)論

本文資料提示，提高血小板的計數(shù)的準(zhǔn)確性，應(yīng)當(dāng)充分做好分析前、中、后的三個基本環(huán)節(jié)的質(zhì)量控制。特別是在標(biāo)本的采集以及采集后的處理，在分析的過程中需要注意異常標(biāo)本的篩查和復(fù)查。對血小板減少的標(biāo)本需要進(jìn)行進(jìn)一步的涂片鏡檢，采用手工方法進(jìn)行計數(shù)復(fù)查，做到萬無一失。

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