■楊秀娟 顧嬌嬌 鄧 斌 甘文斌 張 曦，2 鄧君明 陶琳麗，2

（1.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)云南省動物營養(yǎng)與飼料重點(diǎn)實驗室，云南昆明 650201；2.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，云南昆明 650201；3.云南省農(nóng)村科技服務(wù)中心，云南昆明 650021；4.云南省獸藥飼料檢測所，云南昆明 650201）

武定雞是云南優(yōu)良的地方品種家禽，它體型矮 小，近似船型，且主要分布在云南省的武定、祿勸縣境內(nèi)高寒和氣候冷涼的山區(qū)。武定雞具有肉嫩脂豐、皮脆骨酥、味鮮質(zhì)優(yōu)、營養(yǎng)豐富等特點(diǎn)[1]。日糧蛋氨酸作為家禽的第一限制性氨基酸，其含量的多少會影響飼糧中其他氨基酸的利用和需要量。目前在蛋雞和肉雞上進(jìn)行的氨基酸需要量研究較多。如NRC（1994）標(biāo)準(zhǔn)中關(guān)于未成熟萊航褐殼蛋雞7～12周齡蛋氨酸需要量為0.23%、萊航白殼蛋雞為0.25%。我國《雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》（2004）中，黃羽肉種雞7～12周齡蛋氨酸的需要量為0.29%。石天虹等（2005）通過對泰和絲毛烏雞進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)7～12周齡泰和絲毛烏雞蛋氨酸需要量為0.28%～0.29%[2]。李強(qiáng)（2004）對固始雞進(jìn)行研究得出7～12周齡固始雞蛋氨酸需要量為0.33%～0.37%[3]。然而目前關(guān)于7～12周齡武定雞蛋氨酸需要量的系統(tǒng)研究未見報道。因此，本試驗旨在通過飼養(yǎng)試驗，測定不同蛋氨酸水平對武定雞生長性能的影響，以確定7～12周齡武定雞蛋氨酸需要量，為武定雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)的制訂和科學(xué)配制武定雞日糧提供參考依據(jù)，同時也有利于云南優(yōu)質(zhì)地方雞種——武定雞的保種、生產(chǎn)與推廣。

1 材料與方法

1.1 試驗動物與分組

試驗在云南農(nóng)業(yè)大學(xué)養(yǎng)雞場進(jìn)行，采用單因子試驗設(shè)計，選擇健康、出殼體重均勻的43日齡武定雞60只，隨機(jī)分為5組，每組3個重復(fù)，每個重復(fù)4只雞，混養(yǎng)。蛋氨酸梯度為0.1%，即蛋氨酸水平分別為0.25%、0.35%、0.45%、0.55%、0.65%。試驗設(shè)計見表1。

表1 試驗設(shè)計（%）

1.2 試驗日糧

參考我國雞的飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)（ZBB43005—86）中肉用仔雞、美國NRC肉用雞、地方黃羽肉雞種雞以及肉用種雞的營養(yǎng)需要[4-5]，以及前期對武定雞營養(yǎng)需要量的研究為基礎(chǔ)，配制基礎(chǔ)日糧[6-7]，日糧配方及營養(yǎng)水平見表2。

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗在云南農(nóng)業(yè)大學(xué)雞場進(jìn)行，預(yù)飼7 d，每4只雞一籠飼養(yǎng)，試驗雞在43日齡時進(jìn)入正式試驗，雞只自由采食及飲水，并按常規(guī)免疫程序進(jìn)行免疫，做好疾病防控。

1.4 測定指標(biāo)及方法

1.4.1 生產(chǎn)性能指標(biāo)

飼養(yǎng)期間以籠為單位，記錄每天喂料量和剩料量、每周末空腹稱體重，用于計算日增重、日采食量、料重比、氮攝入量。

日增重[g/（只·d）]=（末期體重-前期體重）/日齡；

日采食量[g/（只·d）]=42 d采食量之和/（42 d×重復(fù)數(shù)）；料重比=日采食量[g/（只·d）]/日增重[g/（只·d）]；氮攝入量（g）=采食量×日糧粗蛋白質(zhì)含量×6.25。

1.4.2 血液生化指標(biāo)

在飼養(yǎng)試驗開始時，挑選健康43日齡武定雞2只屠宰，作為零對照。在第12周齡末，每個處理選取3只雞，用負(fù)壓管翅下靜脈采3 ml血液（不加抗凝）于4℃保存后，進(jìn)行屠宰，屠宰采用窒息法，死后立即冷凍，以免體液流失。

血液生化指標(biāo)：血清樣本用于測定血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、血清尿素氮、血清尿酸。

1.4.3 營養(yǎng)成分指標(biāo)

在飼養(yǎng)試驗開始時，挑選健康43日齡武定雞2只屠宰，作為零對照。在第12周齡末，每個處理選取3只雞，進(jìn)行屠宰（采用窒息法），死后立即冷凍，以免體液流失。取冷凍后的試驗雞，除去其消化道內(nèi)容物后稱重。將全雞用鋼刀切碎，再用絞肉機(jī)充分搗碎均勻。樣本在60～70℃烘箱中烘至恒重，粉碎制成風(fēng)干分析樣品。

全雞樣本用于測定水分、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪。

1.4.4 氮平衡試驗和能量平衡試驗

在第75日齡時早上8點(diǎn)開始連續(xù)記錄3 d的采食量（第78日齡早上8點(diǎn)結(jié)束），第76日齡早上8點(diǎn)開始連續(xù)收集3 d排泄物（第79日齡早上8點(diǎn)結(jié)束）。

以組為單位進(jìn)行排泄物的收集和處理，在每次收集排泄物時，先清理掉排泄物上的雞毛、皮屑和飼料（用鑷子和吹耳球吹）。對清理掉的飼料進(jìn)行計量，從每日喂料量中扣除，而后用刮刀無損地將全部排泄物刮入樣品袋，稱重并記錄，然后用噴壺噴灑10%的鹽酸溶液于排泄物，以固定排泄物中的氨。

測定飼料樣本和排泄物樣本的干物質(zhì)、水分以及粗蛋白質(zhì)；

沉積氮[g/（只·d）]=攝入氮[g/（只·d）]-排泄氮[g/（只·d）];氮沉積率（%）=（攝入氮-排泄氮）/攝入氮×100。

1.5 統(tǒng)計分析

采用SPSS13.0進(jìn)行單因素方差分析，差異顯著再進(jìn)行Duncan's法多重比較，數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示[8]。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同蛋氨酸水平對7～12周齡武定雞生長性能的影響（見表3）

表3 不同蛋氨酸水平對武定雞生長性能的影響

從表3中看出，各處理組間前期體重差異不顯著（P＞0.05），各處理組間末期體重、全期增重、日增重、日采食量及料重比存在差異，末期體重：1、5組與2、3組差異顯著（P＜0.05），其余各組差異均不顯著（P＞0.05）；全期增重：1組、4組、5組與2、3組差異顯著（P＜0.05），其余各組差異均不顯著（P＞0.05）；日增重：2、3組與1、4、5組差異顯著（P＜0.05），其余各組差異均不顯著（P＞0.05）；日采食量：1組與4、5組差異顯著（P＜0.05），4組與5組差異顯著（P＜0.05），其余各組差異均不顯著（P＞0.05）；料重比：1組與2、3、4、5組差異顯著（P＜0.05），其余各組差異均不顯著（P＞0.05）；且隨著蛋氨酸水平的提高，末期體重、全期增重、日增重呈先上升后下降的趨勢，日采食量、料重比呈下降上升又下降趨勢，蛋氨酸水平為0.45%時，獲得最大日增重、末期體重和最佳料重比。

為了進(jìn)一步研究蛋氨酸添加水平與不同生產(chǎn)性能指標(biāo)間的關(guān)系，試驗以蛋氨酸添加水平為橫坐標(biāo)，全期增重為縱坐標(biāo)，研究二者之間的回歸關(guān)系。通過回歸分析發(fā)現(xiàn)，全期增重與蛋氨酸添加水平間存在著極顯著的回歸關(guān)系（見圖1）。

由圖1得出，增重與蛋氨酸水平呈二次曲線關(guān)系，擬合方程為：y=-1 082.05x2+943.18x+434.99（R2=0.53，P=0.011），當(dāng)x（日糧中蛋氨酸水平）為0.44%時，武定雞在7～12周齡獲得最大y值（增重）為640.53 g。

圖1 不同蛋氨酸水平與增重擬合曲線

2.2 不同蛋氨酸水平對7～12周齡武定雞體成分的影響（見表4）

從表4中可以看出：不同蛋氨酸水平對武定雞12周齡末體成分中的水分含量、粗蛋白質(zhì)含量無顯著影響（P＞0.05）；與其他蛋氨酸水平相比，4組的蛋氨酸水平顯著降低了粗脂肪的含量（P＜0.05）；對體成分中的氨基酸含量無顯著影響（P＞0.05）。

2.3 不同蛋氨酸添加水平對血液生化指標(biāo)的影響（見表5）

從表5中看出，各處理組間，谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶活性、血清尿酸及血清尿素氮含量無顯著影響（P＞0.05），這說明了試驗雞日糧中蛋氨酸設(shè)定濃度梯度還在雞只能自動調(diào)節(jié)的范圍。

表4 不同蛋氨酸水平對雞體成分的影響（以鮮樣為基礎(chǔ)%）

表5 不同蛋氨酸水平對雞血液生化指標(biāo)的影響

2.4 不同蛋氨酸水平對7～12周齡武定雞沉積氮的影響（見表6）

從表6中看出，不同蛋氨酸水平對沉積氮和氮沉積率均無顯著差異（P＞0.05），對攝入氮有顯著差異（P＜0.05），1組與2組、4組、5組差異顯著（P＜0.05），5組與2組、4組差異顯著（P＜0.05），其余各組差異均不顯著（P＞0.05）。

表6 蛋氨酸水平對雞氮沉積及氮沉積率的影響

2.5 不同蛋氨酸水平對7～12周齡武定雞氨基酸利用率的影響（見表7）

從表7中看出，蛋氨酸水平不同，17種氨基酸的利用率各不相同?？傮w來看，在不同蛋氨酸水平下，蘇氨酸和胱氨酸利用率最低，為66%～74%之間，而谷氨酸和甘氨酸利用率最高，達(dá)到95%左右，不同蛋氨酸水平對蛋氨酸利用率有顯著影響，1組與2、3、4、5組有顯著差異（P＜0.05），且隨著蛋氨酸水平提高，蛋氨酸利用率呈上升趨勢。

3 討論

蛋氨酸是禽類第一限制性氨基酸，在家禽生長中發(fā)揮著重要作用?，F(xiàn)已有大量研究證明，當(dāng)飼糧中蛋氨酸缺乏時，會明顯抑制肉雞生長，降低飼料利用率；而適當(dāng)?shù)奶砑拥鞍彼釀t可改善肉雞的生長性能；若在飼料中添加超過適宜水平的蛋氨酸時，對肉雞生長性能無影響，但是可能會產(chǎn)生毒害作用[9-13]。也有一些研究結(jié)果表明，在家禽的某一特定生長時期，飼糧蛋氨酸水平在一定范圍內(nèi)變化不會對家禽的生長產(chǎn)生顯著的影響[14-17]。

表7 不同蛋氨酸水平對雞氨基酸表觀利用率的影響（%）

瞿明仁等（2004）研究發(fā)現(xiàn)，泰和烏雞0～4周齡日糧中蛋氨酸需要量公、母雞均為0.44%；5～8周齡日糧中蛋氨酸需要量為公雞0.35%、母雞0.31%；9～12周齡日糧中蛋氨酸需要量為公雞0.26%、母雞0.24%[18]。石天虹等（2005）研究了蛋氨酸對0～12周齡泰和烏雞生產(chǎn)性能的影響，以烏雞生產(chǎn)性能和經(jīng)濟(jì)效益為判斷指標(biāo)，建議烏雞蛋氨酸的需要量為：0～4周齡蛋氨酸0.32%、5～8周齡蛋氨酸 0.29%、9～12周齡蛋氨酸0.28%[2]。李強(qiáng)（2004）對固始雞氨基酸需要量進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，各時期固始雞蛋氨酸需要量分別為：0～4周齡0.39%、5～8周齡0.37%、9～12周齡蛋氨酸0.33%[3]。姚元枝（2003）對雪峰烏骨雞蛋氨酸需要量進(jìn)行研究，以累積生長為評價指標(biāo)，根據(jù)二次曲線模型，得出5～8周齡雪峰烏骨雞蛋氨酸需要量為0.429%[19]。謝明等（2006）研究了蛋氨酸對3～6周齡雄性北京鴨生產(chǎn)性能的影響，結(jié)果表明：蛋氨酸對3～6周齡雄性北京鴨平均日增重和采食量均產(chǎn)生了顯著影響，但對料重比無顯著影響。以平均日增重為評價指標(biāo)，依據(jù)二次曲線模型，3～6周齡雄性北京鴨的蛋氨酸需要量為0.365%[9]。張靜等（2014）對略陽烏雞7～12周齡可消化蛋氨酸需要量進(jìn)行研究，結(jié)果表明：不同蛋氨酸水平對略陽烏雞平均日增重和采食量差異顯著，對料重比差異不顯著，以平均日增重為評價指標(biāo)，依據(jù)二次曲線模型，7～12周齡略陽烏雞的表觀可消化蛋氨酸需要量為0.326%，真可消化蛋氨酸需要量為0.336%[20]。

本試驗通過武定雞全期增重與飼糧蛋氨酸水平之間的二次曲線模型估算出，7～12周齡武定雞蛋氨酸需要量為0.44%，試驗結(jié)果略高于以上學(xué)者的研究，這說明不同品種的雞對蛋氨酸的需要量各不相同，只有提供最適宜水平的蛋氨酸，才能獲得最佳的生長性能。同時，由于試驗用的武定雞是未經(jīng)過選育的品種，個體差異較大導(dǎo)致二次曲線擬合的R2略低。

由于組成蛋白質(zhì)的各種氨基酸在機(jī)體代謝過程中，具有協(xié)同、轉(zhuǎn)化、替代和拮抗等關(guān)系。所以，飼糧中不同的氨基酸水平對自身或其它氨基酸的利用率會產(chǎn)生一定的影響。氨基酸間的拮抗作用發(fā)生在結(jié)構(gòu)相似的氨基酸間，因為它們在吸收過程中共用同一轉(zhuǎn)移系統(tǒng)，存在相互競爭。姚軍虎等（2000）研究表明，待測飼料或飼糧中蛋白質(zhì)、氨基酸含量顯著影響其表觀代謝率，日糧蛋白質(zhì)、氨基酸含量過高或過低，均會降低蛋白質(zhì)、氨基酸的表觀代謝率，造成氮素浪費(fèi)[21]。同理，蛋氨酸是家禽日糧中第一限制性氨基酸，添加適當(dāng)?shù)鞍彼峥梢源龠M(jìn)其他氨基酸的平衡，使氨基酸利用率提高。不同蛋氨酸水平對蛋氨酸表觀利用率有顯著影響（P＜0.05），對其他氨基酸表觀利用率無顯著影響（P＞0.05），隨著蛋氨酸水平提高，蛋氨酸利用率總體呈上升趨勢，與周彥文（2008）[22]研究結(jié)果一致。

4 結(jié)論

本試驗條件下，不同蛋氨酸水平對12周齡末武定雞生長性能指標(biāo)影響存在差異；對體成分分析中水分含量、粗蛋白質(zhì)含量和氨基酸含量無顯著影響（P＞0.05），與其他蛋氨酸水平相比，4組的蛋氨酸水平顯著降低了體成分中粗脂肪的含量（P＜0.05）；對血液生化指標(biāo)無顯著影響（P＞0.05），對食入氮有不同影響，對沉積氮、沉積率和各種氨基酸利用率無顯著影響（P＞0.05）。以全期增重為評價指標(biāo)，依據(jù)二次曲線模型，7～12周齡武定雞的最適蛋氨酸水平為0.44%。