孫剛，李曉剛，張俊峰，張加勇，周浩，徐佳，王建*

（1.黑龍江省動(dòng)物疫病預(yù)防與控制中心，黑龍江哈爾濱　150069；2.哈爾濱市疾病預(yù)防控制中心，黑龍江哈爾濱　150056）

黑龍江省野鳥禽流感監(jiān)測分析

孫剛1，李曉剛1，張俊峰1，張加勇1，周浩2，徐佳，王建2*

（1.黑龍江省動(dòng)物疫病預(yù)防與控制中心，黑龍江哈爾濱150069；2.哈爾濱市疾病預(yù)防控制中心，黑龍江哈爾濱150056）

禽流感（Avian Influenza，AI）是由正粘病毒科流感病毒屬的A型流感病毒（Avian Influenza virus，AIV）引起的禽類的一種烈性的高度接觸性傳染病。2003年全球爆發(fā)HPAI疫情，泰國等國家從多種死亡野鳥體內(nèi)分離到了H5N1亞型禽流感病毒。2005年4月，我國青海湖近6000只斑頭雁等侯鳥發(fā)生急性死亡，也分離到H5N1亞型禽流感病毒。有研究表明，H7N9亞型禽流感病毒基因來自于東亞地區(qū)野鳥和中國上海、浙江、江蘇雞群的基因重配，野鳥在傳播禽流感病毒過程中扮演了重要角色。

黑龍江省是我國重點(diǎn)林區(qū)，森林和濕地資源豐富，其中濕地是遷徙候鳥最主要的棲息類型之一，黑龍江流域內(nèi)的濕地為候鳥的遷徙和繁殖提供了大量棲息地，是重要的候鳥繁殖地和遷徙中轉(zhuǎn)站。黑龍江省繁衍棲息鳥類種類繁多，全省分布有鳥類400余種，其中，遷徙的候鳥種類近350種，主要分布在三江平原和松嫩平原。每年春秋季節(jié)經(jīng)我省遷徙的鳥類數(shù)量達(dá)2000多萬只，僅興凱湖每年春季遷徙的候鳥就達(dá)200多萬只。候鳥遷徙路線經(jīng)過黑龍江省主要有兩條：一條是在長江中下游地區(qū)及黃河流域越冬的候鳥，沿渤海海岸經(jīng)遼寧省、吉林省進(jìn)入我省松嫩平原，然后飛越大、小興安嶺到俄羅斯境內(nèi)繁殖，部分鳥類留在松嫩平原繁殖。在東南亞國家越冬遷徙的候鳥一般經(jīng)東海、黃海、渤海海岸飛到我省繁殖。另一條是在長江中下游地區(qū)及黃河流域越冬的候鳥，沿渤海海岸向北經(jīng)過圖們江流域進(jìn)入我省的三江平原到俄羅斯境內(nèi)繁殖，部分鳥類留在三江平原繁殖。有部分在日本南部和韓國越冬的候鳥，經(jīng)朝鮮半島進(jìn)入三江平原，然后飛到俄羅斯境內(nèi)繁殖，部分鳥類留在三江平原繁殖。鑒于對野生鳥類目前尚缺乏有效的禽流感免疫與監(jiān)控措施，我們于2015年5月至2016年5月對野鳥進(jìn)行了禽流感流行病學(xué)監(jiān)測，以期進(jìn)一步了解野鳥帶毒情況及在禽流感傳播中的作用，為防控禽流感提供技術(shù)數(shù)據(jù)。

1　材料與方法

1.1材料

1.1.1禽流感病毒血凝抑制（HI）試驗(yàn)診斷試劑盒，購自哈爾濱維科生物技術(shù)開發(fā)公司。

1.1.2熒光定量RT-PCR試劑盒，購自北京世紀(jì)元亨動(dòng)物防疫技術(shù)有限公司。

1.2方法

1.2.1樣品的采集在黑龍江省哈爾濱周邊、扎龍、興凱湖、七星河、三環(huán)泡、明水等自然保護(hù)區(qū)和哈爾濱北方森林動(dòng)物園等野鳥棲息地，通過林業(yè)部門采集野鳥血樣和喉肛棉拭樣品。

1.2.2血凝（HA）和血凝抑制試驗(yàn)HI試驗(yàn)按試劑盒說明書操作。

1.2.3熒光RT-PCR操作程序熒光RT-PCR按試劑盒說明書操作。

2　結(jié)果

2.1不同亞型AIV抗體（H1/H3/H5/H7/H9）HI檢測結(jié)果顯示，在受檢的856份血清中共檢出不同亞型AIV陽性抗體66份，陽性率為7.71%，其中，H1陽性數(shù)3份，陽性率為0.35%；H3陽性數(shù)5份，陽性率為0.58%；H5陽性數(shù)17份，陽性率為1.99%；檢出H9陽性數(shù)41份，陽性率為4.79%；未檢出H7陽性抗體。

2.2肛拭樣品AIV病毒的檢測和分離結(jié)果采用熒光RT-PCR試驗(yàn)對野鳥的喉肛棉拭樣品進(jìn)行H5亞型AIV的病原學(xué)檢測，結(jié)果均為陰性。

3　討論

3.1對黑龍江省856只野鳥血樣和喉肛棉拭樣品分別進(jìn)行了HI和熒光定量RT-PCR檢測，結(jié)果HI檢出H5亞型禽流感抗體陽性17份，熒光定量RT-PCR均為陰性。根據(jù)新疆畜牧科學(xué)院獸醫(yī)研究所研究數(shù)據(jù)，近年來野鳥感染禽流感的范圍不斷擴(kuò)大，野生鳥類攜帶的禽流感病毒很可能通過河流感染家禽。而中國科學(xué)院動(dòng)物研究所動(dòng)物疫病研究組組長何宏軒在2013年4月11日清華科技園內(nèi)舉行的公益講座上談到禽流感與野生候鳥的關(guān)系時(shí)表示，從以往經(jīng)驗(yàn)看，禽流感感染人都需要一個(gè)中間宿主，所以人直接從野鳥處感染H7N9病毒是很困難的。因此，本次病原學(xué)檢測結(jié)果為陰性，也提示應(yīng)重新審視和科學(xué)評價(jià)野生鳥類在AI流行病學(xué)和傳播途徑中承擔(dān)的角色。

3.2鑒于野鳥傳播禽流感的風(fēng)險(xiǎn)，建議進(jìn)一步完善高致病性禽流感應(yīng)急管理機(jī)制，做好應(yīng)對疫情發(fā)生和流行的各項(xiàng)準(zhǔn)備工作。（1）進(jìn)一步加大免疫工作力度，對所有水禽和散養(yǎng)禽開展集中免疫，建立免疫隔離帶，提高家禽抵抗禽流感病毒侵襲能力。（2）加強(qiáng)監(jiān)測預(yù)警，采取重點(diǎn)監(jiān)控、提高監(jiān)測、加強(qiáng)巡查的方式，掌握好濕地、公園、市場的禽流感疫情動(dòng)態(tài)；對非疫鳥類尸體，要立即就地消毒、掩埋，并要求做好記錄；加強(qiáng)對候鳥遷徙通道、遷徙地和棲息地以及、大型湖泊、水庫、濕地、自然保護(hù)區(qū)、發(fā)生過疫情地區(qū)的監(jiān)測，做好風(fēng)險(xiǎn)評估工作。（3）加強(qiáng)部門聯(lián)防聯(lián)控。特別農(nóng)業(yè)、林業(yè)、衛(wèi)生等部門要建立防控禽流感聯(lián)合實(shí)行例會(huì)制度，進(jìn)一步完善疫情通報(bào)制度，在禽流感等重大人畜共患病確診后，24h之內(nèi)互相通報(bào)疫情；共同開展疫情監(jiān)測，共享專家資源，加強(qiáng)國家禽流感參考實(shí)驗(yàn)室與衛(wèi)生部流感實(shí)驗(yàn)室之間的合作研究。四是積極開展禽流感防控國際合作，會(huì)同衛(wèi)生部與FAO、WHO建立了四方聯(lián)席會(huì)議制度；及時(shí)向有關(guān)國際組織通報(bào)我國禽流感防控政策及疫情狀況；積極參加有關(guān)國際和區(qū)域禽流感防控會(huì)議；對越南、泰國、朝鮮、蒙古、印尼等國家開展禽流感防控技術(shù)和物資援助。

10．3969/J.ISSN．1671-6027．2016．11.008

孫剛（1967～），甘肅省武威市人，博士，研究員，主要從事動(dòng)物疫病防控技術(shù)研究。

★王建（1961～），本科，主任醫(yī)師，主要從事疾病預(yù)防與控制工作。

哈爾濱市科學(xué)技術(shù)局企業(yè)研發(fā)引導(dǎo)類（攻關(guān)）項(xiàng)目，哈爾濱市人感染禽流感風(fēng)險(xiǎn)評估與預(yù)警體系技術(shù)研究，項(xiàng)目編號：2014AB3AS048