吳晶瀅
(湖南省長沙市廣益實(shí)驗(yàn)中學(xué) 410014)
糖化血紅蛋白檢測技術(shù)的應(yīng)用
吳晶瀅
(湖南省長沙市廣益實(shí)驗(yàn)中學(xué) 410014)
糖化血紅蛋白是紅細(xì)胞中的血紅蛋白與葡萄糖持續(xù)地不可逆地進(jìn)行非酶促蛋白糖基化反應(yīng)的產(chǎn)物,它的形成與多種因素有關(guān)。在人們飲食結(jié)構(gòu)、飲食習(xí)慣等因素的變化下,我國糖尿病發(fā)生率顯著升高,糖尿病可引起一系列的并發(fā)癥,嚴(yán)重影響患者的身體健康,加強(qiáng)糖尿病的早期診斷與防范尤為關(guān)鍵。本文主要就糖化血紅蛋白檢測技術(shù)的應(yīng)用展開綜述。
糖化血紅蛋白檢測技術(shù);應(yīng)用;分析
糖化血紅蛋白(glycated hemoglobin A1c,Hb A1c)是葡萄糖與人體血液中紅細(xì)胞血紅蛋進(jìn)行非酶促蛋白糖基化反應(yīng)的產(chǎn)物,這一物質(zhì)的形成由血糖作用時(shí)間和濃度決定,若人體血糖濃度偏高,那么糖化血紅蛋白指數(shù)也會隨之增高。因此,糖化血紅蛋白也是檢測人體血糖水平變化的金標(biāo)準(zhǔn)。
目前,關(guān)于Hb A1c在糖代謝異常的篩查與診斷中都有著重要的意義,與FBG、2hBG相比,Hb A1c的診斷更加具有優(yōu)越性。檢測FBG需要空腹8h,患者只能上午就診,而Hb A1c在任何時(shí)間都可以檢測,也不會受到運(yùn)動(dòng)、生活方式的影響,且臨床研究顯示,F(xiàn)BG、2hBG診斷符合率只有不到80%,準(zhǔn)確性不高,Hb A1c指標(biāo)的應(yīng)用顯著提升了診斷的準(zhǔn)確性。如果糖尿病患者FBG控制已達(dá)標(biāo),每年至少應(yīng)做2次Hb A1c檢測,對于FBG控制不穩(wěn)或需要改變治療方案的患者及正在進(jìn)行胰島素治療者,應(yīng)每3個(gè)月進(jìn)行1次Hb A1c的檢測。Hb A1c檢測在技術(shù)上的優(yōu)勢使其還適合發(fā)現(xiàn)糖尿病的高危人群。
2.1 離子交換層析法
離子交換層析法是利用了血紅蛋白β鏈N端纈氨酸電荷的差異,來利用陽離子交換層析柱吸附平衡樹脂,其中糖化血紅蛋白正電荷較少,再使用不同pH值的緩沖液即可成功得到層析譜,最后檢測數(shù)值用百分比來顯示。目前醫(yī)院的常用儀器為日本TOSOH公司的HLC-723G7,這是現(xiàn)階段檢測精度最高的儀器。
2.2 手工微柱法
手工微柱法不僅可以檢測出糖化血紅蛋白的樹脂,還可以檢測出血紅蛋白C以及血紅蛋白S的存在情況,檢測結(jié)果可靠性非常高。手工微柱法還有一個(gè)突出的優(yōu)勢是成本低廉,適合在基層醫(yī)院中推廣,但是由于微柱質(zhì)量與層析時(shí)間難以控制,重復(fù)利用性不高。常用的為英國DREW SCIENTIFIC公司生產(chǎn)的DS5糖化血紅蛋白儀。
2.3 親和層析法
親和層析法最早在1981年被研發(fā)成功,該種方式可以成功檢測固定硼酸陰離子、糖化血紅蛋白1,2順式二醇基團(tuán),使用山梨醇分離復(fù)合物即可成功洗脫糖化血紅蛋白,其檢測結(jié)果與HPLC的結(jié)果是一致的。親和層析法不會受到Schiffbase、HbF等因素的影響,但是不同類型的儀器,結(jié)果存在一定的差異。
2.4 酶檢測法
酶檢測法是近年來誕生的新型檢測技術(shù),其檢測原理是基于蛋白酶切斷糖化血紅蛋白β鏈N末端糖化二肽,其產(chǎn)物過氧化氫會與顯色劑發(fā)生反應(yīng),利用吸光度測定法即可得出Hb A1c的濃度。酶檢測法準(zhǔn)確性非常高,無論是與免疫法還是與HPLC,都表現(xiàn)出良好的相容性能,已經(jīng)成為一種重點(diǎn)檢測方式。
Hb A1c最為常見的應(yīng)用就是在糖尿病診斷中的應(yīng)用,可以及時(shí)發(fā)現(xiàn)早期糖尿病。多數(shù)早期糖尿病患者雖然FBG、2hBG檢測結(jié)果正常,但是出現(xiàn)了糖尿病的臨床癥狀,如果無法確診,即可應(yīng)用Hb A1c,如果超過正常值,則為可疑,應(yīng)該進(jìn)行長期的觀察與追蹤。Hb A1c還可以監(jiān)測糖尿病患者并發(fā)癥的發(fā)生情況,臨床研究顯示,Hb A1c數(shù)值每增加一個(gè)百分比,那并發(fā)癥的發(fā)生率會增加12個(gè)百分比,常見的并發(fā)癥有糖尿病足,糖尿病腎病、心臟病等,如果可以降低Hb A1c水平,那么將有效降低糖尿病并發(fā)癥的發(fā)生率。研究表明Hb A1c<6.5%的患者中幾乎不存在視網(wǎng)膜病變,Hb A1c≥6.5%視網(wǎng)膜病變的發(fā)生率顯著增高。隨著Hb A1c的升高,視網(wǎng)膜病變、腎臟病變、神經(jīng)病變和微量白蛋白尿的發(fā)生幾率均增加。
近年來的研究顯示,Hb A1c與心腦動(dòng)脈病變也有密切的關(guān)聯(lián),在非糖尿病冠心病患者群體中,Hb A1c數(shù)值集中在6~7%,當(dāng)高于這一數(shù)值時(shí),那么冠心病發(fā)病率將大大上升,Hb A1c與冠脈病變積分為正比關(guān)系,是冠心病發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。關(guān)于Hb A1c與心腦動(dòng)脈病變之間的關(guān)系,臨床中尚未明確,可能與紅細(xì)胞黏度上升、高血糖損傷內(nèi)皮、氧合血紅蛋白離解速度緩慢等因素有關(guān)。因此,Hb A1c是臨床中鑒別糖尿病冠心病以及非糖尿病冠心病的重要標(biāo)準(zhǔn)。
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2016-11-23