馮芳芳 林如輝 陳文列 黃云梅 黃美雅 吳廣文 李西海 吳追樂 葉蕻芝 劉獻(xiàn)祥

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透骨消痛顆粒對(duì)兔骨關(guān)節(jié)炎模型作用的超微結(jié)構(gòu)研究

馮芳芳 林如輝 陳文列 黃云梅 黃美雅 吳廣文 李西海 吳追樂 葉蕻芝 劉獻(xiàn)祥

【摘要】目的 觀察透骨消痛顆粒干預(yù)兔骨關(guān)節(jié)炎模型軟骨和軟骨下骨的超微結(jié)構(gòu)變化情況，探討藥物對(duì)關(guān)節(jié)微觀結(jié)構(gòu)的作用機(jī)理。方法 18 只新西蘭大白兔分 3 組，模型組與藥物組按改良 Hulth 法建立膝骨關(guān)節(jié)炎模型。建模后 1 周藥物組以 1 g·ml-1透骨消痛顆粒溶液 20 ml·d-1灌胃，正常組和模型組給予等量生理鹽水，持續(xù) 12 周。脛骨標(biāo)本采用透射電鏡觀察軟骨和軟骨下骨超微結(jié)構(gòu)。結(jié)果 正常組軟骨細(xì)胞及核橢圓形，常染色質(zhì)為主，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器發(fā)達(dá)；骨細(xì)胞近梭形，核扁橢圓形，核質(zhì)比大，異染色質(zhì)散在；成骨細(xì)胞扁長形，見粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器，核異染色質(zhì)散在。模型組軟骨細(xì)胞及核不規(guī)則，固縮變性，異染色質(zhì)分布不均，細(xì)胞器模糊；骨細(xì)胞核固縮或不規(guī)則，異染色質(zhì)聚集；成骨細(xì)胞呈橢圓形，核不規(guī)則，異染色質(zhì)斑塊狀多位于核膜下，細(xì)胞器較少、模糊。藥物組軟骨細(xì)胞多正常，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)較發(fā)達(dá)；骨細(xì)胞核近橢圓形，異染色質(zhì)散在或部分聚集；成骨細(xì)胞呈扁長形，核近橢圓形，異染色質(zhì)散在，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)可見擴(kuò)張。結(jié)論 透骨消痛顆粒能夠改善骨關(guān)節(jié)炎軟骨與軟骨下骨的超微結(jié)構(gòu)，主要作用表現(xiàn)于細(xì)胞核染色質(zhì)、參與合成細(xì)胞外基質(zhì)成分的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器的變化。

【關(guān)鍵詞】骨關(guān)節(jié)炎；顯微鏡檢查，電子，透射；藥物療法；軟骨細(xì)胞；骨細(xì)胞；透骨消痛顆粒

骨關(guān)節(jié)炎 ( osteoarthritis，OA) 是復(fù)雜的退行性關(guān)節(jié)疾病，關(guān)節(jié)軟骨完整性破壞、晚期軟骨下骨硬化、骨贅增生等是其主要特征[1]。骨關(guān)節(jié)炎屬于中醫(yī)“痹癥”范疇，基于“腎主骨、肝主筋”的理論，已形成治痿、祛痹與痹痿同治的治療理念[2]。透骨消痛顆粒以中醫(yī)筋骨理論為指導(dǎo)，補(bǔ)腎柔肝作為根本法則，善于祛邪活血、健脾止痛，是有效防治骨關(guān)節(jié)炎的臨床驗(yàn)方。前期藥理研究顯示該組方有消炎止痛、抑制炎性介質(zhì)、清除氧自由基和改善微循環(huán)等功效[3]，可減少骨關(guān)節(jié)炎軟骨蛋白多糖的丟失，明顯改善組織結(jié)構(gòu)，而達(dá)到減輕軟骨纖維化，延緩關(guān)節(jié)軟骨退變、軟骨下骨硬化的作用[4-5]。本研究旨在通過對(duì)軟骨細(xì)胞、骨細(xì)胞等超微結(jié)構(gòu)觀察，進(jìn)一步闡述透骨消痛顆粒對(duì)膝骨關(guān)節(jié)炎軟骨和軟骨下骨微觀結(jié)構(gòu)的影響。

材料與方法

一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

普通級(jí) 6 個(gè)月齡新西蘭大白兔 18 只，雌雄各半，體重 ( 2.1±0.1) kg，上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限責(zé)任公司提供，許可證號(hào) SCXK ( 滬) 2012-0002。福建中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境設(shè)施，普通級(jí) ( 合格證號(hào)：醫(yī)動(dòng)學(xué)第 23-016 號(hào))。實(shí)驗(yàn)對(duì)動(dòng)物的處置符合中華人民共和國科學(xué)技術(shù)部頒發(fā)的“關(guān)于善待實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的指導(dǎo)性意見”。

二、動(dòng)物分組與造模

適應(yīng)性喂養(yǎng)后 1 周編號(hào)，18 只新西蘭大白兔采用抽簽法隨機(jī)分為 3 組：正常組對(duì)照、模型組和藥物組，每組 6 只。除正常組 6 只外，其余 12 只根據(jù)改良 Hulth 法[6]建立骨關(guān)節(jié)炎模型，造模方法：兔麻醉后，從左膝內(nèi)側(cè)入路，切斷內(nèi)側(cè)副韌帶，摘除內(nèi)側(cè)半月板，切斷前交叉韌帶。術(shù)后連續(xù) 3 天大腿肌肉注射 20 萬 U 青霉素，術(shù)后 1 周驅(qū)趕兔活動(dòng)0.5 h·d-1，連續(xù) 12 周。

三、動(dòng)物給藥

造模后 1 周，藥物組以 1 g·ml-1透骨消痛顆粒水溶液 20 ml·d-1灌胃，正常組和模型組以等量生理鹽水灌胃，持續(xù) 12 周。透骨消痛顆粒 ( 含巴戟天、杭白芍、川芎等多味中藥，生產(chǎn)批號(hào) 20100302)由福州屏山藥廠制作。

四、光鏡制樣觀察

兔麻醉，取膝關(guān)節(jié)脛骨平臺(tái)內(nèi)側(cè)軟骨及軟骨下骨，置于 4% 多聚甲醛固定，10% EDTA 脫鈣；梯度乙醇脫水，二甲苯透明，石蠟包埋；切片 5 μm，HE染色。光鏡下觀察軟骨和軟骨下骨形態(tài)結(jié)構(gòu)變化。

五、透射電鏡制樣觀察

切取脛骨平臺(tái)軟骨及軟骨下骨組織 1 mm× 1 mm×3 mm ( 長軸與軟骨面平行)，3% 戊二醛-1.5% 多聚甲醛前固定，5.5% EDTA -1.5% 戊二醛脫鈣－固定，1% 四氧化后固定 2 h，梯度乙醇、丙酮脫水，環(huán)氧樹脂 618 包埋劑包埋；半薄切片1 μm，美蘭－天青染色，光鏡輔助觀察并定位；超薄切片 90 nm，鈾－鉛染色；日立 H-7650 型透射電鏡觀察軟骨與軟骨下骨的超微結(jié)構(gòu)變化，SIS 公司2K×2K CCD 相機(jī)拍攝。

結(jié) 果

一、顯微結(jié)構(gòu)觀察

1. 正常對(duì)照組：軟骨表面平滑，細(xì)胞排列規(guī)律，四層結(jié)構(gòu)較明顯 ( 圖 1)。軟骨下骨骨小梁較均勻。

2. 模型組：軟骨面破損，局部增厚，裂隙可達(dá)中層至深層；軟骨細(xì)胞排列紊亂，四層結(jié)構(gòu)不清；軟骨基質(zhì)染色失染、不均 ( 圖 2)。骨小梁不均勻。

3. 藥物組：軟骨表面較為平整，損傷僅限淺層，深層細(xì)胞排列較規(guī)律，少凋亡；軟骨基質(zhì)染色較均勻 ( 圖 3)。軟骨下骨較正常。

二、超微結(jié)構(gòu)觀察

1. 正常對(duì)照組：軟骨細(xì)胞多呈圓形或橢圓形，細(xì)胞表面可見較多細(xì)而短的微絨毛樣突起；核圓形或橢圓形，居中，核內(nèi)常染色質(zhì)為主，異染色質(zhì)分布均勻；胞質(zhì)內(nèi)可見豐富粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、線粒體，糖原顆粒散在、多見，有的細(xì)胞微絲成束；軟骨組織基質(zhì)中有豐富纖細(xì)的膠原原纖維，排列較規(guī)律 ( 圖 4)。軟骨與軟骨下骨交界處，有低電子密度與高電子密度相鄰的骨基質(zhì)區(qū)域，其纖維排列方向不一致。低電子密度膠原纖維束中的膠原原纖維粗細(xì)相彷，與纖維束呈同一走向；高電子密度膠原纖維束中的膠原原纖維走向不規(guī)則，呈斜形、橫形交錯(cuò)。骨細(xì)胞呈近梭形或扁橢圓形，較多充滿骨陷窩，細(xì)胞表面突起明顯，核質(zhì)比較大，胞質(zhì)相對(duì)較少，細(xì)胞器少見；核扁橢圓形，異染色質(zhì)豐富、散在；骨組織基質(zhì)中橫紋明顯且較粗的膠原原纖維，分布均勻 ( 圖 5)。成骨細(xì)胞扁長形，胞質(zhì)內(nèi)可見粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器；細(xì)胞核常染色質(zhì)為主，異染色質(zhì)散在 ( 圖 6)。

2. 模型組：軟骨細(xì)胞形狀多不規(guī)則，或呈多角形，細(xì)胞表面突起較少，多見變性、壞死細(xì)胞；核不規(guī)則、偏位，多固縮呈現(xiàn)電子密度增高，或異染色質(zhì)邊聚，呈凋亡細(xì)胞核；胞質(zhì)基質(zhì)深染，部分細(xì)胞器結(jié)構(gòu)破壞或不清晰，糖原聚集，脂滴可見；軟骨基質(zhì)中膠原原纖維稀疏，排列較不規(guī)律 ( 圖 7)。骨細(xì)胞大小不一，呈不規(guī)則形，突起少；細(xì)胞核固縮或不規(guī)則，多偏位，異染色質(zhì)聚集呈斑塊狀或于核膜下；骨基質(zhì)中膠原原纖維橫紋較模糊，分布排列不均勻 ( 圖 8)。成骨細(xì)胞呈橢圓形，突起少，核不規(guī)則，異染色質(zhì)斑塊狀多于核膜下；胞質(zhì)內(nèi)細(xì)胞器較少，結(jié)構(gòu)模糊 ( 圖 9)。

3. 藥物組：軟骨細(xì)胞圓形或橢圓形，細(xì)胞表面突起較多；核圓形或橢圓形，常染色質(zhì)為主，分布均勻；胞質(zhì)內(nèi)粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)發(fā)達(dá)、豐富，明顯擴(kuò)張成池狀，內(nèi)見中等電子密度合成物，膜表面結(jié)合型核糖體明顯，糖原顆粒散在、多見，微絲豐富；同源軟骨細(xì)胞多見，未見明顯細(xì)胞變性 ( 圖 10)。骨細(xì)胞及其核呈橢圓形或梭形，核居中，核內(nèi)異染色質(zhì)散在或部分聚集；骨組織基質(zhì)中有豐富的橫紋，膠原原纖維較粗且分布較均勻 ( 圖 11)。成骨細(xì)胞呈扁長形，突起較少，核近橢圓形，常染色質(zhì)多見，異染色質(zhì)散在；粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)可見，以核周為多，有些擴(kuò)張成池狀 ( 圖 12)。

圖1　正常組軟骨與軟骨下骨的顯微結(jié)構(gòu) ( HE × 40) 　Fig.1 Normal cartilage and subchondral bone microstructure ( HE × 40)圖2　模型組軟骨與軟骨下骨的顯微結(jié)構(gòu) ( HE × 40) 　Fig.2 Model group of cartilage and subchondral bone microstructure ( HE × 40)圖3　藥物組軟骨與軟骨下骨的顯微結(jié)構(gòu) ( HE × 40) 　Fig.3 Drug group of cartilage and subchondral bone microstructure ( HE × 40)圖4　正常組軟骨細(xì)胞超微結(jié)構(gòu) ( TEM × 10000) 　Fig.4 Normal cartilage cell ultrastructure ( TEM × 10000)圖5　正常組骨細(xì)胞超微結(jié)構(gòu) ( TEM ×12000) 　Fig.5 Normal bone cell ultrastructure ( TEM × 12000)圖6　正常組成骨細(xì)胞超微結(jié)構(gòu) ( TEM × 10000) 　Fig.6 Normal osteoblasts ultrastructure ( TEM × 10000)圖7　模型組軟骨細(xì)胞超微結(jié)構(gòu) ( TEM × 10000) 　Fig.7 Model group of cartilage cell ultrastructure ( TEM × 10000)圖8　模型組骨細(xì)胞超微結(jié)構(gòu) ( TEM × 12000) 　Fig.8 Model group of bone cell ultrastructure ( TEM × 12000)圖9　模型組成骨細(xì)胞超微結(jié)構(gòu) ( TEM × 10000) 　Fig.9 Model group of osteoblasts ultrastructure ( TEM × 10000)

討 論

本研究是光鏡與電鏡技術(shù)相結(jié)合，在顯微結(jié)構(gòu)觀察的基礎(chǔ)上，再進(jìn)行超微結(jié)構(gòu)觀察，其結(jié)果相吻合，可從細(xì)胞及其胞外基質(zhì)的超微結(jié)構(gòu)，闡釋組織顯微結(jié)構(gòu)的變化。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果從軟骨和軟骨下骨的微觀變化，進(jìn)一步提供了透骨消痛方對(duì)骨關(guān)節(jié)炎療效的細(xì)胞形態(tài)學(xué)證據(jù)，闡釋了藥物作用的細(xì)胞與亞細(xì)胞形態(tài)學(xué)機(jī)理。

一、藥物對(duì)骨關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)軟骨超微結(jié)構(gòu)的影響

軟骨退變是骨關(guān)節(jié)炎的最基本病變，軟骨細(xì)胞是軟骨中唯一的細(xì)胞，疾病狀態(tài)下，軟骨細(xì)胞在炎癥狀態(tài)下出現(xiàn)功能性紊亂，最終導(dǎo)致軟骨結(jié)構(gòu)病理改變[7]。病變?cè)缙谲浌羌?xì)胞可對(duì)外界刺激產(chǎn)生應(yīng)激現(xiàn)象，本實(shí)驗(yàn)中模型組軟骨細(xì)胞出現(xiàn)局部增殖現(xiàn)象，而使局部軟骨層增厚，但軟骨細(xì)胞排列紊亂。透射電鏡見軟骨細(xì)胞及核出現(xiàn)固縮、變性，甚至壞死，直接影響軟骨細(xì)胞的代謝和遺傳；軟骨表面微絨毛樣突起減少，細(xì)胞內(nèi)外物質(zhì)交換能力下降，營養(yǎng)代謝發(fā)生障礙；合成膠原蛋白、蛋白多糖等基質(zhì)成分的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器變化，將相應(yīng)影響相關(guān)功能。藥物組軟骨形態(tài)完整，未見明顯裂隙、破損，軟骨細(xì)胞與模型組相比，分布較為規(guī)律，透射電鏡下軟骨細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)多正常，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)發(fā)達(dá)，明顯擴(kuò)張成池狀，表現(xiàn)出活躍的細(xì)胞功能，合成蛋白質(zhì)能力增強(qiáng)。同源軟骨細(xì)胞明顯增多，增殖能力增強(qiáng)，可促進(jìn)軟骨的進(jìn)一步修復(fù)。

II 型膠原是軟骨基質(zhì)中最主要膠原表型，參與關(guān)節(jié)軟骨組織生理重建和病理破壞過程[8]。骨關(guān)節(jié)炎過程中，II 型膠原降解，導(dǎo)致軟骨基質(zhì)成分改變，進(jìn)一步介導(dǎo)軟骨細(xì)胞病變。軟骨基質(zhì)膠原原纖維排列方向紊亂的區(qū)域軟骨細(xì)胞退變程度重，細(xì)胞凋亡多見，說明軟骨細(xì)胞衰亡會(huì)影響基質(zhì)成分的正常維持；反之，軟骨細(xì)胞依賴軟骨基質(zhì)成分的完整，病變軟骨細(xì)胞由于膠原纖維網(wǎng)的破壞也會(huì)促使退變、死亡，軟骨的自我修復(fù)能力也將減弱，軟骨破壞[9]。以往的骨關(guān)節(jié)炎研究中發(fā)現(xiàn)部分基質(zhì)金屬蛋白酶 MMPs 使關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞外基質(zhì)特別是使 II 型膠原變性裂解，關(guān)節(jié)軟骨變腫脹，抗外力作用下降，最終導(dǎo)致軟骨破壞、軟骨細(xì)胞退行性改變，甚至死亡，用藥后 MMPs 含量明顯下降[10]，保護(hù) II 型膠原，維持軟骨基質(zhì)穩(wěn)定。藥物組膠原原纖維與模型組相比，分布較為規(guī)律，提示 II 型膠原降解減輕，軟骨細(xì)胞微環(huán)境改善。本次實(shí)驗(yàn)通過對(duì)軟骨的超微結(jié)構(gòu)觀察，說明透骨消痛顆?？蓽p輕軟骨基質(zhì)的降解，緩解骨關(guān)節(jié)炎軟骨退變。

二、藥物對(duì)骨關(guān)節(jié)炎軟骨下骨超微結(jié)構(gòu)的影響

軟骨代謝紊亂、局部降解被認(rèn)為是骨關(guān)節(jié)炎的始發(fā)因素，而軟骨下骨改變?cè)诠顷P(guān)節(jié)炎的發(fā)生發(fā)展中也發(fā)揮著重要作用[11]。軟骨下骨包括軟骨下骨板、骨小梁、血管和小梁間腔隙，對(duì)關(guān)節(jié)軟骨起機(jī)械性和代謝性的保護(hù)作用[12]，在骨關(guān)節(jié)炎早期就可見骨小梁稀疏等骨質(zhì)疏松的結(jié)構(gòu)變化。骨小梁結(jié)構(gòu)對(duì)骨強(qiáng)度至關(guān)重要[13]，是骨脆性的決定因素，還起支持造血組織的作用，與骨的生成有關(guān)；骨小梁內(nèi)部有骨細(xì)胞及其膠原和鈣鹽沉積；骨小梁表面被覆成骨細(xì)胞，成骨細(xì)胞主要負(fù)責(zé)骨基質(zhì)合成、分泌和礦化，控制骨重建的激活或終止[14]，維持機(jī)體正常骨量。

本研究模型組成骨細(xì)胞核發(fā)生明顯變化，異染色質(zhì)增多，細(xì)胞器數(shù)量減少，功能退化，細(xì)胞的新陳代謝和增殖分化能力明顯降低，通過物質(zhì)運(yùn)輸通道促進(jìn)軟骨細(xì)胞 MMPs 合成，加快軟骨細(xì)胞退變；而藥物組成骨細(xì)胞粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張成池，蛋白質(zhì)合成能力增加，推測透骨消痛顆?？赏ㄟ^改善成骨細(xì)胞功能形態(tài)，影響骨重塑平衡，而達(dá)到對(duì)軟骨下骨的保護(hù)，與前期研究結(jié)果一致[15]。

圖10　藥物組軟骨細(xì)胞超微結(jié)構(gòu) ( TEM × 10000) 　Fig.10 Drug group of cartilage cell ultrastructure ( TEM × 10000)圖11　藥物組骨細(xì)胞超微結(jié)構(gòu) ( TEM × 12000) 　Fig.11 Drug group of bone cell ultrastructure ( TEM × 12000)圖12　藥物組成骨細(xì)胞超微結(jié)構(gòu) ( TEM × 10000) 　Fig.12 Drug group of osteoblasts ultrastructure ( TEM × 10000)

骨細(xì)胞起源于成骨細(xì)胞，細(xì)胞的合成活動(dòng)停止，胞質(zhì)減少。骨細(xì)胞的骨陷窩－小管系統(tǒng)提供微環(huán)境系統(tǒng)，骨間隙液可以營養(yǎng)骨組織。本實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ徒M骨細(xì)胞變形，特別是核固縮、偏位，細(xì)胞新陳代謝障礙，由骨細(xì)胞分泌的膠原蛋白等含量減少，影響整個(gè)微環(huán)境；基質(zhì)中膠原原纖維結(jié)構(gòu)紊亂，橫紋模糊，骨骼韌性降低，脆性增加，骨質(zhì)變得疏松，更易發(fā)生微骨折。藥物組骨細(xì)胞功能形態(tài)改善，繼續(xù)指揮、協(xié)調(diào)骨重建，改善骨質(zhì)；膠原原纖維變粗，排列規(guī)律，骨組織得到修復(fù)。

本實(shí)驗(yàn)藥物組軟骨下骨超微結(jié)構(gòu)比模型組明顯改善，提示透骨消痛顆粒能使病理狀態(tài)下機(jī)體成骨細(xì)胞重新達(dá)到平衡，骨細(xì)胞微環(huán)境改善，從而進(jìn)一步延緩骨關(guān)節(jié)炎向晚期進(jìn)展。

參 考 文 獻(xiàn)

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( 本文編輯：李貴存)

. 作者須知 Instruction for authors .

A ultrastructural study of Touguxiaotong Granule on osteoarthritis rabbit model FENG Fang-fang, LIN Ru-hui, CHEN Wen-lie, HUANG Yun-mei, HUANG Mei-ya, WU Guang-wen, LI Xi-hai, WU Zhui-le, YE Hong-zhi, LIU Xianxiang. Fujian University of Traditional Chinese Medicine, Fuzhou, Fujian, 350122, PRC

【Abstract】Objective To explore the microcosmic mechanism of Touguxiaotong Granule ( TXG) on ultrastructure in cartilage by observing cartilage and subchondral bone of TXG-treated rabbit osteoarthritis model with transmission electron microscope ( TEM). Methods Eighteen New Zealand rabbits of 6-month old were randomly divided into 3 groups: the control group, the model group and the drug group. The knee osteoarthritis model was replicated using modified Hulth method. Rabbits in the drug group were applied 1 g · ml-1TXG solution by intragastric administration. While rabbits in the control group and model group were given the same amount of 0.9% physiological saline by intragastric administration. All rabbits had been given the dosage of 20 ml · d-1for 12 weeks. Obtained samples of tibia were observed by TEM. Results In the control group, the chondrocytes were characterized as subelliptic shape, abundant rough endoplasmic reticulum and mainly euchromatin in oval nucleus. Osteocytes appeared as fusiform shape and flat oval nucleus, with big karyoplasmicratio and scattered heterochromatin. Osteoblasts displayed prolate shape, rough endoplasmic reticulum and scattered heterochromatin. Compared with the control group, chondrocytes and nucleus in the model groups of osteoarthritis showed irregular shape, pyknosis and degeneration. The cellular organelles were fuzzy or unclear in the chondrocytes while the nucleus was accompanied by unevenly distributed heterochromatin. Irregular karyopyknosis and aggregated heterochromatin appeared in osteocytes. Osteoblasts appeared to be oval. The organelles were reduced and fuzzy and the patchy heterochromatin was under the nuclear membrane in irregular nucleus. Compared with the model group, chondrocytes in drug group were characterized as regular morphology with abundant rough endoplasmic reticulum. The nucleus of osteocytes showedbook=130,ebook=55subelliptic shape, scattered or partial aggregated heterochromatin. Osteoblasts showed elongated shape, expanded rough endoplasmic reticulum, and scattered heterochromatin in oval-like nucleus. Conclusions Touguxiaotong Granule can significantly improve the ultrastructure of the cartilage and subchondral bone in osteoarthritis. It plays an important role in the change of the nuclear chromatin and the rough endoplasmic reticulum which is involved in the synthesis of extracellular matrix components.

【Key words】Osteoarthritis; Microscopy, electron, transmission; Drug therapy; Chondrocytes; Osteocytes; Touguxiaotong granule

( 收稿日期：2015-05-13)

Corresponding author:CHEN Wen-lie, Email: chen.wl@163.com

通信作者：陳文列，Email: chen.wl@163.com

基金項(xiàng)目：福建省自然科學(xué)基金 ( 2014J01356)，陳可冀中西醫(yī)結(jié)合發(fā)展基金 ( CKJ2011004)
作者單位：350122 福州，福建中醫(yī)藥大學(xué) ( 馮芳芳、陳文列)；350122 福州，福建中醫(yī)藥大學(xué)中西醫(yī)結(jié)合研究院 ( 林如輝、陳文列、黃美雅、吳廣文、葉蕻芝、劉獻(xiàn)祥)；350122 福州，國家中醫(yī)藥三級(jí)科研實(shí)驗(yàn)室－中藥藥理 ( 細(xì)胞結(jié)構(gòu)與功能) 實(shí)驗(yàn)室 ( 陳文列、黃云梅、吳追樂)；350108 福州，福建省中西醫(yī)結(jié)合老年性疾病重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室( 李西海、劉獻(xiàn)祥)

DOI:10.3969/j.issn.2095-252X.2016.02.012

中圖分類號(hào)：R684.3