園林花卉快繁技術(shù)

郭秀麗，徐襯英，田紅成，李紅，付雪姣

（河南省睢縣林業(yè)局，河南 睢縣 476900）

園林花卉快繁技術(shù)

郭秀麗，徐襯英，田紅成，李紅，付雪姣

（河南省睢縣林業(yè)局，河南 睢縣 476900）

園林花卉的快速繁殖又叫試管繁殖，是指用組織培養(yǎng)方法快速無(wú)性繁殖花卉的一種新技術(shù)，本文簡(jiǎn)要的介紹了園林花卉的快速繁殖具體措施和技術(shù)。

園林花卉；快速繁殖；技術(shù)

一、植物組織培養(yǎng)的基本原理和意義

植物組織培養(yǎng)是指將植物的離體生活組織部分（器官、組織和細(xì)胞）在適宜的人工培養(yǎng)基上進(jìn)行無(wú)菌培養(yǎng)，使其增殖（產(chǎn)生愈傷組織）并逐步分化出器官（芽和根）和形成小植株的方法。它是建立在植物細(xì)胞具有全能性的理論基礎(chǔ)上，即植物體的每一個(gè)生活細(xì)胞都攜帶著一套完整的基因組并且具有產(chǎn)生完整植株的能力。

二、植物組織培養(yǎng)的條件

（一）嚴(yán)格無(wú)菌

植物組織培養(yǎng)的整個(gè)操作過(guò)程和培養(yǎng)過(guò)程都要求在嚴(yán)格無(wú)菌的條件下進(jìn)行，避免微生物（主要是細(xì)菌和真菌）的污染。因此，操作過(guò)程要在接種室或超凈工作臺(tái)上進(jìn)行；選用的植物材料要進(jìn)行表面消毒；配制的培養(yǎng)基要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌和無(wú)菌過(guò)濾。

（二）溫度

1.培養(yǎng)溫度。培養(yǎng)物生長(zhǎng)的最適溫度大致上和該植物原來(lái)生長(zhǎng)所需最適溫度相同。

2.不同的溫度處理。

低溫處理：一些植物如唐菖蒲、百合等的試管苗、小鱗莖，在盆栽前低溫處理（2℃）4-6周，可大大提高移栽成活率。

高溫處理：高溫處理不僅可以獲得無(wú)病毒植株，而且對(duì)一些植物的器官發(fā)生也有影響。如葡萄的莖尖分生組織培養(yǎng)在35℃下3個(gè)月可以產(chǎn)生無(wú)病毒苗；菊芋塊莖在35℃下培養(yǎng)能促進(jìn)生根。

（三）光照

1.光強(qiáng)。少數(shù)植物器官發(fā)生在無(wú)光條件下，但其進(jìn)一步的生長(zhǎng)發(fā)育和大多數(shù)植物的器官發(fā)生必須有光。莖尖的起始生長(zhǎng)及試管苗的繼代增殖以1 000-3 000lx光強(qiáng)適宜；生根成苗以及小植株的生長(zhǎng)以3 000-10 000lx為宜。

2.光質(zhì)。光質(zhì)對(duì)愈傷組織誘導(dǎo)，培養(yǎng)組織的增殖，以及器官的分化都有明顯的影響。如百合珠芽在紅光下生長(zhǎng)的愈傷組織比藍(lán)光和白光下生長(zhǎng)快；唐菖蒲子球塊在藍(lán)光下培養(yǎng)比在紅光下培養(yǎng)出現(xiàn)的芽早，幼苗生長(zhǎng)旺盛，根系粗壯。

3.光照時(shí)間。最常用的光周期是16小時(shí)的光照、8小時(shí)的黑暗。但是，有些植物對(duì)光周期反應(yīng)很敏感。如有人將對(duì)短日照敏感的葡萄品種的莖段進(jìn)行培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)在短日照下形成根，而在長(zhǎng)日照下只產(chǎn)生愈傷組織；長(zhǎng)日植物-雙色金光菊的莖尖，在日照超過(guò)12小時(shí)的條件下會(huì)形成花蕾?？梢?jiàn)，通過(guò)光照時(shí)間的控制，可控制芽的分化方向。

（四）培養(yǎng)基的PH值和滲透壓

1.PH值。培養(yǎng)基的PH值因培養(yǎng)植物的種類而異。大多數(shù)花卉都要求在PH5.6～5.8的條件下進(jìn)行組織培養(yǎng)。有些植物，如喜酸性的杜鵑花、蘭花以PH5為宜。

2.滲透壓。培養(yǎng)基的滲透壓在試管繁殖中并不太強(qiáng)調(diào)。然而，對(duì)于花藥與原生質(zhì)體的培養(yǎng)來(lái)說(shuō)，卻是成敗的關(guān)鍵。合適的滲透壓可提高花藥中花粉愈傷組織的誘導(dǎo)率，保持原生質(zhì)體呈正常的球形與進(jìn)一步的細(xì)胞分裂，不因吸水過(guò)多而破碎，也不因失水太多而萎縮。固體培養(yǎng)常用2%～5%的蔗糖維持。

（五）氣體的影響

組織培養(yǎng)中的外植體呼吸需要氧氣。因此，在固體培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)物必須置于固體培養(yǎng)基表面，避免沉入培養(yǎng)基中；在液體培養(yǎng)時(shí)，通過(guò)用振蕩的方法解決供氧問(wèn)題。

三、常用的培養(yǎng)基

培養(yǎng)基是組織培養(yǎng)成功的重要因素之一，它為外植體細(xì)胞的增殖、器官的分化與幼苗的生長(zhǎng)提供了營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)。另外還起著維持一定的滲透壓和酸堿度的作用。培養(yǎng)基有液體和固體兩種。固體培養(yǎng)基中加有0.7%～1%的瓊脂?；ɑ茉嚬芊敝吵２捎玫氖枪腆w培養(yǎng)基。

四、花卉組織培養(yǎng)繁殖的方法

（一）培養(yǎng)材料的選擇

為了獲得無(wú)病毒植株，最好選用莖尖、生長(zhǎng)點(diǎn)、形成層等作為外植體。此外，還可選用葉片、鱗片、根莖、莖段、花瓣、子房、珠心、子葉、下胚軸等。

（二）材料表面無(wú)菌

先用肥皂水洗滌材料，然后用自來(lái)水沖洗，再放入70%的酒精中約30秒鐘，后取出在0.1%的升汞中浸泡5～10分鐘或在10%的漂白粉上清液中浸泡10～15分鐘，最后用蒸餾水沖洗3次。

（三）接種

從滅過(guò)菌的芽中剝?nèi)∏o尖或生長(zhǎng)點(diǎn)，或?qū)⒏o、幼莖、下胚軸等切成0.5～1cm長(zhǎng)的切段，或?qū)⑷~片、花瓣、子葉等切成0.5～1cm2的切塊。在無(wú)菌室內(nèi)或超凈工作臺(tái)上接種培養(yǎng)基上。

（四）培養(yǎng)

1.初次培養(yǎng)。外植體在組織培養(yǎng)的初期，首先是產(chǎn)生愈傷組織，再分化出芽，或直接產(chǎn)生芽，形成帶根植株。在初次培養(yǎng)所用的激素中，細(xì)胞分裂素以6-芐基腺嘌呤（BA）效果最好，生長(zhǎng)素以加萘乙酸（NAA）效果好。在BA和NAA配合使用時(shí)，外植體往往會(huì)脫分化或腋芽萌動(dòng)而增殖。

2.芽的增殖。此階段的培養(yǎng)目的是繁殖大量有效的芽和苗。在芽增殖的培養(yǎng)基中，細(xì)胞分裂素是不可缺少的。

3.生根培養(yǎng)。其培養(yǎng)基目的是使第一和第二階段培養(yǎng)的苗發(fā)生不定根，并使苗繼續(xù)長(zhǎng)大，從而長(zhǎng)成完整的小植株。

（五）煉苗與移栽

1.煉苗。為保證移栽后成活，使試管苗適應(yīng)從異樣型轉(zhuǎn)變?yōu)樽责B(yǎng)型的過(guò)程，因此需要煉苗。其步驟：把培養(yǎng)物放置在移栽環(huán)境中3～10天，使其適應(yīng)新的光、溫、濕條件。在移栽前一天打開瓶塞，第二天再移苗。

2.移栽。

苗的取出：先在瓶中注入清水，用鑷子輕輕地將培養(yǎng)基塊攪碎，將苗取出。然后用清水漂去粘附在根部的培養(yǎng)基，這樣可避免根部受傷以及因培養(yǎng)基帶人土中而引起的腐爛。

種植：先將生根苗移栽到洗凈滅菌的河沙中進(jìn)行沙培。初期應(yīng)注意保持移栽苗環(huán)境中有較高的濕度和較穩(wěn)定的氣溫（20-22℃）。沙培2～3周之后則可移栽到裝有土壤的花盆或木箱中培養(yǎng)成栽培用苗。

（編輯：劉國(guó)華）

S688

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1673-9019(2016)08-0030-02

2016-03-22

郭秀麗（1979-），女，河南睢縣人，工程師，主要從事園林綠化技術(shù)推廣工作。