董效文（山西農(nóng)業(yè)大學(xué)，山西 030801）

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淺析平基槭葉內(nèi)生物活性含量動(dòng)態(tài)變化

董效文
（山西農(nóng)業(yè)大學(xué)，山西 030801）

摘要：本文以6年生平基槭苗木為試材，對(duì)其葉內(nèi)生物活性(黃酮、綠原酸、葉綠素、Vc)物質(zhì)含量進(jìn)行年動(dòng)態(tài)變化研究。結(jié)果表明：平基槭在年生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中，黃酮和葉綠素的含量變化呈“M”狀。黃酮含量變化分別出現(xiàn)在6月和8月，而8月達(dá)到全年最高值；葉綠素兩個(gè)高峰卻分別出現(xiàn)在6月和9月，6月為全年最高值。綠原酸、Vc含量變化分別是在6月和7月達(dá)到全年的最高值，都呈現(xiàn)先升后降的拋物線形。

關(guān)鍵詞：平基槭；黃酮；綠原素；葉綠素；VC

平基槭[1]是槭樹(shù)科槭樹(shù)屬的落葉喬木，在我國(guó)東北、黃河及長(zhǎng)江流域省區(qū)大量種植，它在綠化、天然林保護(hù)、防風(fēng)固沙等方面應(yīng)用廣泛。近年來(lái)，由于它的葉內(nèi)含多種生物活性成分極具有食用、藥用價(jià)值，越來(lái)越受到人們的關(guān)注和重視。本試驗(yàn)通過(guò)對(duì)其葉內(nèi)黃酮、綠原酸、葉綠素、Vc含量進(jìn)行年動(dòng)態(tài)變化的研究，探索其各指標(biāo)含量的變化，為平基槭葉更好地開(kāi)發(fā)提供理論依據(jù)。

1　材料和方法

1.1試驗(yàn)材料

選6年生平基槭苗木于2015年4—10月，在山西省榆次市林業(yè)局苗圃進(jìn)行取樣測(cè)定，每月取樣1次，摘取植株中上部葉片，用無(wú)離子水沖凈，濾紙吸干葉面水分后置冰箱待測(cè)。

1.2測(cè)定方法

1.2.1黃酮含量測(cè)定[1-3]

取各處理5～8個(gè)葉片恒溫烘干，研碎過(guò)篩，稱(chēng)0.30 g，用70％ C2H5OH 10 mL水浴（70～75 ℃）浸提6 h，70％ C2H5OH定容，放1 mL于容量瓶，再加70％ C2H5OH 4 mL，和0.3 mLNaNO2溶液混勻放置5 min，加0.3 mL Al（NO3）3溶液置6 min后，再加NaOH 2 mL搖勻，用70％ C2H5OH定容置10 min，在500 nm條件下比色，標(biāo)準(zhǔn)曲線法得黃酮含量。

1.2.2綠原酸含量測(cè)定[4]

稱(chēng)樣品0.30 g，用95％ C2H5OH 10 mL在水?。?0～75 ℃）浸提6 h，放入容量瓶，再用95％ C2H5OH定容，放3 mL于容量瓶，再用C2H5OH（95％）定容，在324 nm條件下進(jìn)行比色測(cè)定，標(biāo)準(zhǔn)曲線得綠原酸含量。

1.2.3葉綠素含量測(cè)定[5]

取0.05 g葉片，研碎放具塞試管中，加95％ C2H5OH 10 mL浸泡，避光至葉變白，取上清液在663 nm、645 nm條件下測(cè)吸光度。

1.2.4Vc含量測(cè)定[6-7]

（1） 取標(biāo)準(zhǔn)抗壞血酸溶液2 mL加8 mL 2％草酸，用DCIP（2,6-二氯吲哚酚鈉）溶液滴定至終點(diǎn)，根據(jù)已知抗壞血酸和DCIP用量，計(jì)算滴定度即1 mL DCIP相當(dāng)于抗壞血酸的mg數(shù)。計(jì)算公式如下：

W=（V-V1）×T×b×100/B×a

W為100 g樣品中含抗壞血酸的mg數(shù)；V1為滴定空白用DCIP mL數(shù)；V為滴定樣品用DCIP mL數(shù)；T為滴定度；B為測(cè)定用樣品液mL數(shù)；b為樣品液V總；a為樣品g數(shù)。

（2） 取切碎葉片0.5 g，加少許草酸研勻放入容量瓶，加ZnSO41 mL，再加1 mL K4[Fe（CN）6]，最后用H2C2O4定容過(guò)濾。取10 mL過(guò)濾液放三角瓶中，用標(biāo)定好的DCIP鹽溶液滴定，至桃紅色15 s不褪色即可，記下用量。取H2C2O410 mL，用DCIP作空白滴定。

2　結(jié)果與分析

2.1平基槭葉內(nèi)生理指標(biāo)的年動(dòng)態(tài)變化

2.1.1平基槭葉內(nèi)黃酮、綠原酸含量的變化

圖1中顯示， 從4月10日到6月10日，黃酮含量增長(zhǎng)很快，達(dá)到第1個(gè)小高峰，為5.113％， 7月黃酮含量略有下降， 到8月10日達(dá)到第2個(gè)高峰，也是全年最高值，為5.998％，隨后至10月含量下降為3.893％，總體變化為“M”狀；而綠原酸含量變化不同于黃酮，它由生長(zhǎng)初期的2.197％，到6月達(dá)最高峰，綠原酸含量為4.402％，總體表現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)，到10月時(shí)，綠原酸含量為2.336％，但還是比4月10日的高0.139個(gè)百分點(diǎn)。

圖1　平基槭葉片內(nèi)黃酮、綠原酸含量年變化

從表1可看出：6月和8月對(duì)黃酮含量影響最大，而4月影響最小。經(jīng)方差分析和多重比較，可知4月與5、6、7、8、9、10月；5月與6、7、8、9月存在極顯著差異，6、7月分別與8、9、10月存在極顯著差異，8月與9、10月存在極顯著差異。

6月對(duì)綠原酸含量影響最大，9、10月分別與其它各時(shí)期間存在極顯著差異，而9月與10月之間不存在差異。所以從不同時(shí)期黃酮、綠原酸含量差異顯著性可知，它們和生長(zhǎng)時(shí)期有關(guān)。

表1　不同月份平基槭葉內(nèi)黃酮、綠原酸的含量比較?。ǎィ?/p>

2.1.2平基槭葉內(nèi)葉綠素、Vc含量的變化

由圖2可知， 4—5月葉綠素含量增加緩慢，5—6月急劇上升達(dá)4.327 mg?g-1，6月后開(kāi)始下降，到8月又開(kāi)始上升，至9月達(dá)到第2次高峰達(dá)3.991 mg?g-1，之后又急速下降。由圖3可知，生長(zhǎng)前期從4月開(kāi)始Vc含量急劇上升，至7月達(dá)到全年最高，含量達(dá)最大值657.02 mg?（100 g）-1，之后開(kāi)始緩慢下降，10月至低谷103.56 mg?（100 g）-1。

圖2　平基槭葉內(nèi)葉綠素含量年變化

圖3　平基槭葉內(nèi)VC含量

表4　不同月份平基槭葉內(nèi)葉綠素、Vc含量的比較

由表4可知，6月與9月葉綠素含量影響最大，10月含量達(dá)到最低， 6月與4、5、7、8、10月存在極顯著差異，10月與5、6、7、9月存在極顯著差異，9 與10月存在極顯著差異；平基槭葉Vc含量6、7、8含量最高，6、7、8月分別與4、5、9、10月之間存極顯著差異，6、7、8月之間差異不顯著，4、5、9、10月之間差異也不顯著，由上表數(shù)據(jù)可以看出，平基槭葉內(nèi)的葉綠素和Vc含量與生長(zhǎng)時(shí)期有很大關(guān)系。

3　討論與結(jié)論

結(jié)果顯示:（1）黃酮和葉綠素的含量變化呈“M”狀，黃酮含量變化在6月達(dá)到一個(gè)小高峰，7月稍有下降，然后在8月達(dá)到全年最高值；而葉綠素兩個(gè)高峰卻分別出現(xiàn)在6月和9月。綠原酸含量變化在6月達(dá)到全年的最高值，Vc含量7月達(dá)到峰值，兩者都呈現(xiàn)先上升后下降的拋物線形。（2）在平基槭的整個(gè)生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中，6月和8月對(duì)其葉內(nèi)黃酮含量的影響最大，4月對(duì)黃酮含量的影響最小，且于8月達(dá)到最高，含量高達(dá)6.109％；而6月綠原酸含量達(dá)到最高，含量高達(dá)3.963％；葉綠素含量6月達(dá)到最大，含量高達(dá)4.327 mg?g-1；Vc含量7月達(dá)到全年最高，含量高達(dá)657.02mg?（100 g）-1。

試驗(yàn)表明,不論是出現(xiàn)一個(gè)還是兩個(gè)峰值，可以認(rèn)為它們含量變化與生長(zhǎng)時(shí)期有密切關(guān)系，6—8月是速生期，葉片發(fā)育成熟，水分養(yǎng)分供應(yīng)充足，樹(shù)勢(shì)旺盛，生物合成的有效成分保持在較高水平；之后硬化期樹(shù)木生長(zhǎng)減緩，相應(yīng)合成有效成分的底物也在減少，所以8月以后黃酮、綠原酸、葉綠素和VC含量基本上呈現(xiàn)下降趨勢(shì)。

參 考 文 獻(xiàn)

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作者簡(jiǎn)介：董效文（1992-），男，內(nèi)蒙古自治區(qū)扎蘭屯市人，主要從事森林培育工作。E-mail：guoaihua@163.com

收稿日期：2015-11-02

文章編號(hào)：1002-0659（2016）01-0004-03

中圖分類(lèi)號(hào)：S718.43

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A