曾 朔

（新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)第六師五家渠市畜牧獸醫(yī)工作站，新疆五家渠 831300）

影響動物疫病實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果準(zhǔn)確性的因素

曾 朔

（新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)第六師五家渠市畜牧獸醫(yī)工作站，新疆五家渠 831300）

近幾年來，在我國大部分地區(qū)畜牧業(yè)都發(fā)展迅猛，取得優(yōu)異成績。由于畜牧業(yè)的發(fā)展水平直接決定農(nóng)村經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，對于畜牧業(yè)中存在的主要問題動物疫病也就值得深入探究。由于飼養(yǎng)管理水平落后、飼養(yǎng)密度加大，動物疫病的發(fā)生和發(fā)展也日趨復(fù)雜，嚴(yán)重影響到了畜牧業(yè)的健康穩(wěn)定發(fā)展。簡潔、迅速以及經(jīng)濟(jì)實(shí)惠的動物疫病實(shí)驗(yàn)室診斷方法越來越受廣大養(yǎng)殖場戶的歡迎。

畜牧業(yè)；動物疫??；實(shí)驗(yàn)室檢測

對于畜牧業(yè)而言，首要的問題就是動物疫病的診斷以及控制。對于動物疫病的診斷，實(shí)驗(yàn)室檢測是診斷動物疫病的重要方法之一，尤其是在混合感染、合并感染日趨復(fù)雜的今天顯得尤為重要。對于影響動物疫病實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果準(zhǔn)確性的因素的探究，具體如下：

1 人為因素

目前，對于常規(guī)的實(shí)驗(yàn)室檢測而言，人是非常重要的因素之一，同時(shí)也是必不可少的影響因素之一，因此極大的降低人為因素是目前首先應(yīng)當(dāng)解決的問題。人為因素影響實(shí)驗(yàn)室檢測主要是指檢測人員的科學(xué)文化水平、遇到問題分析、工作的嚴(yán)謹(jǐn)程度，試驗(yàn)操作的熟練程度和解決問題的能力等。例如在常規(guī)實(shí)驗(yàn)中的在做血凝試驗(yàn)（HA）或者是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）時(shí)，移液器吹打力度的大小會影響樣品的混勻程度和酶標(biāo)反應(yīng)板洗的干凈程度；每個(gè)試驗(yàn)步驟的反應(yīng)時(shí)間延長和縮短都會或多或少影響檢測結(jié)果數(shù)值的大小。除此之外，應(yīng)當(dāng)格外注意無菌操作，例如病毒性腹瀉豬的檢測中，對操作環(huán)境進(jìn)行時(shí)常30min的紫外線消毒，保證超凈臺處于正常工作的狀態(tài)，同時(shí)對于操作者的要求是使用酒精棉進(jìn)行雙手的消毒。隨后將培養(yǎng)基進(jìn)行消毒，主要是使用酒精棉球進(jìn)行擦拭，隨后放置于超凈工作臺備用，與此同時(shí)點(diǎn)燃酒精燈。同時(shí)要保證環(huán)境無菌以及培養(yǎng)液的無菌。

2 儀器因素

硬件設(shè)備是影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的主要因素之一，在常見實(shí)驗(yàn)中由于儀器的種類、型號、技術(shù)參數(shù)以及廠家的差異，往往會導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果的不同。常見的儀器，例如離心機(jī)，包括高速離心機(jī)、低速離心機(jī)、冷凍離心機(jī)以及常溫離心機(jī)；例如先進(jìn)儀器包括國產(chǎn)與進(jìn)口之分等等。因此使用較為精密的儀器會極大的降低實(shí)驗(yàn)室檢測誤差，對于疾病的診斷具有極其重要的秘密。

3 樣品因素

實(shí)驗(yàn)室常見的檢測的樣品主要包括血清樣品、排泄物樣品、分泌物、臟器組織樣品等等。例如：血清樣品的影響在做血清學(xué)試驗(yàn)時(shí)，血清樣品的溶血情況或者溶血程度的大小都會直接影響抗體水平的準(zhǔn)確度以及精確度。臟器組織樣品的影響主要體現(xiàn)在細(xì)菌、真菌或者是病毒宿主在動物不同的臟器宿主情況，直接導(dǎo)致不同器官的形態(tài)組織變化以及生化檢測情況。例如：病毒性腹瀉豬的檢測中，通常情況下十天大的仔豬發(fā)病后的死亡率可達(dá)九成左右，而半個(gè)月大的仔豬的存活率較高，但通常會導(dǎo)致體質(zhì)虛弱以及脫水，多數(shù)會變成形成僵豬，表現(xiàn)為精神狀況正常，飲食方面與正常豬無異，但體積與正常豬比較偏小以及生長速度緩慢。體重較重的豬、以及成年豬通常臨床變現(xiàn)較輕，但泌乳母豬例外，其發(fā)病較為重，通常臨床表現(xiàn)為急劇的體溫升高、劇烈的嘔吐并伴隨腹瀉，嚴(yán)重時(shí)還出現(xiàn)厭食以及泌乳停止的癥狀。經(jīng)過對病豬解剖發(fā)現(xiàn)，該病的病變部位主要在中部的消化道，往往發(fā)生于胃和小腸。多數(shù)患豬出現(xiàn)胃被凝乳顆粒填滿的現(xiàn)象，同時(shí)還伴隨著胃黏膜與腸壁充血嚴(yán)重有出血現(xiàn)象。同時(shí)，樣品的采集方法也是重要的影響因素，例如：一般情況下根據(jù)豬的年齡調(diào)整采血的部位，一般體重25kg以內(nèi)的仔豬，通常使用采集前腔靜脈學(xué)。具體步驟主要是首先將豬固定在仰臥位，在豬胸前口凹陷處進(jìn)行碘酒消毒，使用無菌注射器進(jìn)行抽吸，邊刺入邊做抽血動作。該種方式極易抽??；一般體重在25kg以上的中大豬通常采集耳靜脈血，具體步驟主要是將豬固定于站立位，通常情況下選擇耳緣靜脈進(jìn)行抽血，因?yàn)樵撿o脈最為粗大，注意抽血前應(yīng)當(dāng)進(jìn)行消毒以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。

4 實(shí)驗(yàn)室檢測方法因素

對于動物疫病的實(shí)驗(yàn)室檢測而言，檢測方法有細(xì)菌、病毒的分離鑒定、血凝抑制試驗(yàn)、病毒中和試驗(yàn)、沉淀試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、血凝試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)試驗(yàn)等等。不同方法的選擇直接影響到實(shí)驗(yàn)室結(jié)果，例如：在PRV-g E 抗體檢測時(shí)，病原對增殖方法更敏感。病毒中和試驗(yàn)方法是近年來隨著分子生物學(xué)發(fā)展而形成一種新型的技術(shù)，其原理主要是利用抗原抗體結(jié)合的原理，病毒和對應(yīng)的抗體結(jié)合后，進(jìn)而失去對宿主的致病力。免疫膠體金技術(shù)是近年來較新興的生物技術(shù)，主要采用的原理是抗原抗體結(jié)合，該技術(shù)將膠體金作為示蹤標(biāo)志物用來觀察抗原抗體特異性結(jié)合。這項(xiàng)技術(shù)的主要優(yōu)點(diǎn)是便于操作，耗時(shí)短，要求較低，得到的結(jié)果較精確。

5 結(jié)論

對于動物疫病實(shí)驗(yàn)室檢測的影響因素主要包括人為因素、儀器因素、樣品因素以及實(shí)驗(yàn)室檢測方法因素，但影響動物疫病實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果準(zhǔn)確性的因素是多方面的，需要去進(jìn)一步深入研究分析最終達(dá)到解決的目的。

[1] 黃春艷，唐聶，于行峰.加強(qiáng)動物疫病監(jiān)測推進(jìn)獸醫(yī)工作方式轉(zhuǎn)變[J].南方農(nóng)業(yè)，2015，9（3）：141-142.

[2] 曹東，魏澍.動物疫病監(jiān)測工作是動物疫病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)的根本任務(wù)[J].現(xiàn)代畜牧獸醫(yī)，2011，（6）：1-3.

曾朔（1989—），女，本科學(xué)歷，助理獸醫(yī)師，現(xiàn)從事動物疫病監(jiān)測工作。