袁野

摘 要：建立了玉米中硝磺草酮與莠去津的液質(zhì)聯(lián)用（LC/MS/MS）檢測(cè)方法。利用乙腈/水混合液提取玉米中的硝磺草酮與莠去津，經(jīng)C18固相萃取小柱凈化后采用LC/MS/MS測(cè)定分析。硝磺草酮與莠去津的定量限為0.01毫克/公斤，平均回收率為82.6%～100.0%，RSD為1.6%～7.3%。建立的LC/MS/MS檢測(cè)方法，可用于玉米樣品中硝磺草酮與莠去津的殘留測(cè)定。

關(guān)鍵詞：硝磺草酮；莠去津；玉米；LC/MS/MS

硝磺草酮（Mesotrione），化學(xué)名稱為2-（4-甲磺?；?2-硝基苯甲酰）環(huán)己烷-1，3-二酮，是一種能夠抑制羥基苯基丙酮酸酯雙氧化酶（HPPD）的牙前和苗后廣譜選擇性除草劑，可由效防治主要的闊葉草和一些禾木科雜草。莠去津（Atrazine），化學(xué)名稱為6-氯-N2-乙基-N4-異丙基-1，3，5-三嗪-2，4-二胺，是內(nèi)吸選擇性苗前、苗后封閉除草劑，殺草譜較廣，可防除多種一年生禾木科和闊葉雜草。近年，將硝磺草酮與莠去津按一定比例復(fù)配在田間得到了較多的應(yīng)用。本文采用LC/MS/MS，建立了玉米中硝磺草酮與莠去津簡(jiǎn)單快速的分析方法。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

主要儀器為：島津LC-20AD高效液相色譜系統(tǒng)（日本島津）；API4000Q質(zhì)譜系統(tǒng)（美國(guó)應(yīng)用生物系統(tǒng)公司）；M10型谷物研磨機(jī)（德國(guó)IKA）；數(shù)顯回旋振蕩器（常州國(guó)華電器有限公司）；電子天平（d=0.01克）（常熟市雙杰測(cè)試儀器廠）；電子天平（d=0.01毫克）（梅特勒-托利多）；旋渦混合器、精密移液槍、瓶口移液器以及其他實(shí)驗(yàn)室常用儀器設(shè)備。

主要試劑為：硝磺草酮標(biāo)準(zhǔn)品（純度99.0%）、莠去津標(biāo)準(zhǔn)品（純度99.0%），Dr.Ehrenstorfer GmbH提供。乙腈為色譜純，購(gòu)自迪馬試劑有限公司。分析純磷酸、C18固相萃取小柱等購(gòu)自國(guó)藥試劑有限公司。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 前處理方法

提?。悍Q取玉米樣品10.0克于250毫升磨口三角瓶中，加入100.0毫升乙腈/水混合提取液（v/v，1/1），輕搖，超聲20分鐘后180轉(zhuǎn)/分振蕩提取30分鐘，抽濾，收集上清液。取上清液20.0毫升，加入50%磷酸水溶液20微升，搖勻。將其置于40℃水浴中緩慢蒸至全部為水相，以0.1%磷酸水溶液重新定容至20.0毫升。

凈化：首先2毫升甲醇活化C18固相萃取小柱0.1%磷酸水溶液2毫升過C18柱平衡；再將上述20.0毫升水樣緩慢過C18柱凈化，待全部水樣通過C18柱后；抽干約2分鐘，最后以含0.1%磷酸的乙腈5毫升淋洗小柱，接收淋洗液，定容至5.0毫升。

測(cè)定：過0.22微米濾膜后稀釋至標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi)，LC-MS/MS檢測(cè)。

1.2.2 儀器條件 LC/MS/MS儀器型號(hào)：

島津LC-20AD /AB Q TRAP 4000

色譜柱：Agilent Zorbax Extend C18

（ 2.1×50毫米，3.5微米）

離子源：電噴霧離子源ESI

離子源電壓：4500；

離子源溫度：500 Curtain gas：25

進(jìn)樣量：10微升 Gas 1：50 Gas 2：40

檢測(cè)方式：多重反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）

2 結(jié)果與分析

2.1 方法的線性條件

將硝磺草酮與莠去津標(biāo)準(zhǔn)溶液用乙腈稀釋配制出0.5、1.0、2.0、5.0、20.0、50.0、250微克/升系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，在上述分析條件下進(jìn)行測(cè)定，以峰面積對(duì)質(zhì)量濃度做線性回歸得到標(biāo)準(zhǔn)曲線。硝磺草酮標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為Y=5.25e+003X+797，R=0.9924；莠去津標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為Y=1.17e+004X+1.05e+004，R=0.9971；其中Y為峰面積，X為標(biāo)準(zhǔn)溶液質(zhì)量濃度。

2.2 方法的準(zhǔn)確度與精密度

分別在空白玉米粒、植株樣品中添加0.01、0.1、1.0毫克/公斤的硝磺草酮與莠去津，每個(gè)濃度重復(fù)5次，用上述方法測(cè)定回收率，結(jié)果見表3、表4。該方法的平均回收率為82.6%～100.0%，RSD為1.6%～7.3%，符合《農(nóng)藥殘留試驗(yàn)準(zhǔn)則》（NY/T788-2004）中相關(guān)規(guī)定，具有準(zhǔn)確度與精密度較高的優(yōu)點(diǎn)。

2.3 方法檢出限

該方法條件下硝磺草酮與莠去津的檢出限均為0.5微克/升， 硝磺草酮與莠去津的最小檢出量均為5×10-12克。

2.4 方法定量限

該方法條件下硝磺草酮與莠去津的定量限均為0.01毫克/公斤。

2.5 市售玉米檢測(cè)結(jié)果

我國(guó)規(guī)定硝磺草酮在玉米中的最大殘留限量MRL為0.01毫克/公斤，莠去津?yàn)?.05毫克/公斤（GB2763-2014）。從沈陽(yáng)市區(qū)隨機(jī)挑選了5家農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)，購(gòu)得在售玉米，檢測(cè)其中硝磺草酮與莠去津的殘留含量。經(jīng)該方法測(cè)定，購(gòu)得的5份玉米中硝磺草酮與莠去津含量均低于0.01毫克/公斤，未超過規(guī)定的MRL值。

3 結(jié)論

本試驗(yàn)考查了分析方法的線性范圍、檢出限、定量限、準(zhǔn)確度與精密度。結(jié)果表明，該方法具有簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確、穩(wěn)定、靈敏度高、選擇性強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn)，可用于玉米樣品中硝磺草酮與莠去津殘留量的檢測(cè)分析。