有毒中藥雄黃質(zhì)量檢測思路淺論

馮偉旭

哈藥集團(tuán)世一堂制藥廠 150000

有毒中藥雄黃質(zhì)量檢測思路淺論

馮偉旭

哈藥集團(tuán)世一堂制藥廠 150000

目的:針對中藥不同種處方的雄黃毒性分析，利用高壓液相色譜法結(jié)合成份分析儀器等電子技術(shù)儀器，將雄黃內(nèi)部價(jià)態(tài)砷的種類進(jìn)行分析，包括其他含有不同可溶性砷的雄黃處方。方法:將根據(jù)不同溶劑中可溶性砷的存在含量的不同，進(jìn)而使用適應(yīng)的提取方法，根據(jù)可溶性特征進(jìn)行鹽酸溶液超聲提取 0.16%，根據(jù)模擬在人體胃的情況調(diào)制人工胃液在恒溫 37℃下震蕩，對于有毒性測試甲醇與水 1:1比例，與進(jìn)行樣品可溶性砷提取之間的比例情況，利用電感耦合等離子體質(zhì)譜對其總量進(jìn)行分析，再利用高壓液相色譜法結(jié)合成份分析儀器對可容性砷的形態(tài)分析。結(jié)果：含雄黃復(fù)方制劑和雄黃酸可溶性砷總量占樣品含砷總量的 0.12%一2.7%。結(jié)論：砷的正常含量要比雄黃和復(fù)方制劑中砷的含量要多，在目前市面上已知的復(fù)方制劑內(nèi)有一定的可以抑制可溶性砷的有毒形態(tài)的成分存在。

中藥;雄黃;毒性研究;砷

在目前中醫(yī)用藥的使用中，根據(jù)雄黃自身特點(diǎn)在近年來白血病的治療當(dāng)中應(yīng)用，起到一定的成效，雄黃主要產(chǎn)于低溫?zé)嵋旱V床中，是一種含有硫和砷的礦石，其質(zhì)軟，較脆，通常為粒狀，緊密狀塊，或者粉末，表面條痕呈淺桔紅色。其主要組成成分為硫化砷和四硫化砷，所以雄黃受到一定的加熱后在空氣中氧化產(chǎn)生一定的劇毒成分三氧化二砷，也就是常見的砒霜，這樣就會造成在儲存時(shí)產(chǎn)生一定的劇毒成分，在其化學(xué)成分中有一定的不穩(wěn)定元素，雖然在醫(yī)學(xué)上雄黃有一定的解毒、除濕等功效但由于其內(nèi)部砷的劇毒成分，在國際上使用時(shí)，有一定含量的規(guī)定。

1、儀器與試藥

1.1 檢測儀器

通過X-射線衍射儀?Bruker和D8,Bruker和D8進(jìn)行中藥雄黃質(zhì)量檢測。測定的條件有負(fù)極管壓40kV?輻射CuKa?掃描范圍5°～55 °?負(fù)極電流,40mA?掃描速度5%min?接收縫寬0.1?發(fā)散縫寬1.0.

1.2 試藥

EDTA和磷酸二氫銨為分析純,鹽酸?甲醇?硝酸?超純水。

1.3 藥物性狀

雄黃的礦物部分是粒狀集合體以及塊狀集合體,為深紅色不規(guī)則塊狀或者橙紅色不規(guī)則塊狀,具有淡橘紅色的條痕,其晶面有著金剛石的光澤。

2、方法與結(jié)果

(1)通過140Ce?205TI?89Y?7Li?調(diào)諧ICP-MS,調(diào)節(jié)89Y和75As的靈敏度。使用全定量模式測定砷總量,通過Ham-iltonPRP-X100陰離子交換色譜柱,流動向50mmol/LNH4H2PO4。

(2)吸取適量的As(III)和As(V)?MMA?DMA?AsC與AsB物質(zhì)溶液,通過0.05mol/LEDTA制作1L含有As(III)和As(V)?MMA?DMA?AsC與AsB的不同價(jià)態(tài)的砷混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。

(3)砷含有量檢測。取0.05g雄黃和水飛雄黃,0.3～0.5g的含雄黃中藥放置在微波消解罐內(nèi),然后加入消解液5mL,之后放置等待30min,把密封罐放入微波消解儀中,按照程序?qū)ζ溥M(jìn)行消解,如果消解效果不明顯,可以再添加1mL消解液,直到罐中的溶液澄清。將消解之后的樣品轉(zhuǎn)到聚四氟乙烯量瓶內(nèi),通過稀釋液稀釋樣品溶液,通過ICP-MS進(jìn)行砷總量的測定。

表1 可溶性砷總量測定

表2 可溶性砷總量和總砷含有量

(4)精密度和準(zhǔn)確度。取0.5g的茶葉標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，通過供試品溶液進(jìn)行方法制備，通過既定方法使用ICP-MS進(jìn)行砷總量的測定，其測定結(jié)果 0.082mg/kg，其 RSD7.6%。含雄黃復(fù)方制劑和雄黃酸可溶性砷總量占樣品含砷總量的0.12%一2.7%。見表1、表2。

3、討論

雄黃內(nèi)部具有與自然硫類似的分子構(gòu)成結(jié)構(gòu)型，由As4S4構(gòu)成環(huán)狀分子，As與S之間以共價(jià)鍵相聯(lián)系；環(huán)間以分子鍵聯(lián)系。在As4S4分子中，四個(gè)S原子排列成正方形，四個(gè)As原子排列成四面體，而正方形和四面體的中心相吻合。每個(gè)S原子與兩個(gè)As原子相連；每個(gè)As原子與兩個(gè)S原子及另一個(gè)As原子相連。雄黃經(jīng)過氧化會變成As2O3也就是砒霜，雄黃是一種胃毒劑有劇毒，所以目前所有的殺蟲劑都為胃毒劑，而且對有抗腫瘤的功效，能夠抑制小鼠肉瘤的生長，并對細(xì)胞有一定的腐蝕作用，被人體吸收后對人體神經(jīng)有一定的鎮(zhèn)靜痙攣、止痛和殺蟲的功效，融水制劑對人體結(jié)核桿菌、變形桿菌、綠膿球菌及多種皮膚真菌均有不同程度的抑制作用，所以經(jīng)常應(yīng)用與皮膚相關(guān)真菌感染類疾病的治療，誤食后由于腸道吸收，會引起嘔吐、腹瀉、眩暈等不良反應(yīng)，造成慢性中毒后會損害肝、腎的正常生理功能，所以在內(nèi)服時(shí)不能過量，更不能持續(xù)服用，短期內(nèi)不會產(chǎn)生反應(yīng)，一旦毒素存于人體太長時(shí)間由于長時(shí)間的積累產(chǎn)生劇毒有害生命健康，有陰虧血虛的情況以及孕婦不能服用。

雄黃的主要成分當(dāng)中含有硫和砷，其主要成分擁有不穩(wěn)定性的特點(diǎn)，硬度在1.5到2之間，密度3.5～3.6g/cm3，熔點(diǎn)低用炭火加熱，會冒出有大蒜臭味的白煙。置于陽光下曝曬，會變?yōu)辄S色的雌黃（As2S3）和砷華，不溶于水和鹽酸，可溶于硝酸，溶液呈黃色。雄黃經(jīng)水飛法炮制后，部分可溶性物質(zhì)去除，剩下的不溶性物質(zhì)中還有一定量的可溶性成分。

通過酸性溶劑提取方法提取出砷的有機(jī)形態(tài)與無機(jī)形態(tài)，并提取出含有較大毒性的無機(jī)砷，通過人工胃液一般在恒溫 37℃下與可溶性砷，進(jìn)行振蕩模擬雄黃類口服藥物進(jìn)入到人體胃中的狀態(tài)，在通過鹽酸溶液超聲提取0.16%砷，利用水浴振蕩和超聲方法進(jìn)而研究含雄黃的可溶性砷形態(tài)，并且還可以通過無機(jī)砷與有機(jī)砷內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行對比研究，從而保證精確度。

通過 0.16%鹽酸溶液超聲提取和人工胃液振蕩提取出的可溶性砷量基本持平,在人體研究模擬中通過超聲方法替代振蕩方法,具有較高的提取效率。使用1:1比例的甲醇與水進(jìn)行快速溶劑萃取和超聲發(fā)現(xiàn),含雄黃和雄黃成藥通過甲醇與酸液提取之后,具有 As(III)與 As(V)兩類價(jià)態(tài),沒有發(fā)現(xiàn)砷甜菜堿?砷膽堿?一甲基砷與二甲基砷。As(III)與 As(V)這兩種砷形態(tài)具有較大的毒性,同樣是中藥復(fù)方內(nèi)具有一定療效的形態(tài),可以對其進(jìn)入深入研究,完善質(zhì)量控制,確保用藥的安全性。

綜上所述,雄黃和復(fù)方制劑酸可溶性砷含砷量小,復(fù)方制劑中具有能夠抑制可溶性砷有毒形態(tài)的成分。

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