馬林 焦麗麗 張曉瑜 劉淑瑩
摘要:目的:探討人參花寡糖抗衰老作用及其機制。方法:采用D-Gal腹腔注射制備衰老小鼠模型,檢測人參花寡糖的抗衰老作用。結(jié)果:與空白組相比,人參花寡糖組小鼠血清、肝臟和腦中的SOD,GSH-Px和CAT活力與D-Gal組比顯著提高,血清中MDA含量顯著下降,10 毫克/公斤作用最明顯。結(jié)論:人參花寡糖可恢復(fù)D-半乳糖誘導(dǎo)的氧化損傷,提高氧化酶活力,減少MDA在體內(nèi)的積累。
關(guān)鍵詞:人參花寡糖;抗衰老;抗氧化
基金項目:吉林省科技廳重點實驗室探索項目(20160101334JC)
中圖分類號: S351.1 文獻標識碼: A DOI編號: 10.14025/j.cnki.jlny.2016.21.034
1材料與方法
研究表明,衰老與自由基損傷密切相關(guān)[1]。過量自由基能損傷DNA,影響細胞膜結(jié)構(gòu)和功能[2]。細胞內(nèi)存抗氧化酶系統(tǒng),能夠清除過多的自由基,維持細胞內(nèi)的氧化還原水平[3]。
人參花是五加科人參屬人參(Panax ginseng C. A. Mey.)的花蕾。目前,人參花寡糖相關(guān)的研究較少。課題組已發(fā)現(xiàn)人參花寡糖具有良好的體外抗氧化活性?;诖耍狙芯繑M對人參花的體內(nèi)抗氧化活性進行深入研究。
1.1材料
超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、過氧化氫酶(CAT)和丙二醛(MDA)試劑盒購于南京建成生物工程研究所。
1.2人參花寡糖的制備
干燥的人參花粉末用乙醇,80℃提取兩次(2h/次),濾過。殘渣加10倍水,70℃提取兩次(2小時/次),合并濾液。濾液透析(Mw<3500Da),收集透析外液,濃縮,凍干,得人參花寡糖。
1.3 動物模型的建立及分組
雄性昆明小鼠(20±2克,8周齡),自由攝取食物、水。小鼠隨機分為6組,按照表1分組并連續(xù)灌胃42天。
1.4 生化指標檢測
每天記錄小鼠體重,末次給藥24小時后,小鼠眼球取血,離心,收集血清。移除肝臟,用生理鹽水清洗后制成10%(w/v)勻漿,離心,收集上清[4]。血清和肝臟中SOD、CAT、T-AOC、GSH-Px的活力和MDA水平按試劑盒說明書操作。
2 結(jié)果與分析
2.1 人參花寡糖對衰老小鼠血清SOD、GSH-PX、CAT活性及MDA產(chǎn)量影響
由表2可知,與空白組相比,D-gal組小鼠血清中SOD,GSH-Px和CAT活性均顯著下降(P<0.05),MDA含量顯著增加(P<0.05)。人參花寡糖組小鼠的酶活力有所提高,且呈劑量依賴性。SOD 、GSH-Px和CAT酶活力呈現(xiàn)上升趨勢;與D-gal組相比,均顯著增加,MDA含量顯著降低。
2.2 人參花寡糖對衰老小鼠肝臟SOD、GSH-PX、CAT活性影響
人參花寡糖組小鼠肝臟中SOD和CAT活力明顯提高,且低、中劑量組與D-gal組呈現(xiàn)顯著差異(P<0.05);GSH-Px活力也明顯提高。
3討論
SOD、GSH-Px和CAT是抑制自由基最重要的抗氧化酶[5]。本實驗結(jié)果表明人參花寡糖給藥后能增強小鼠內(nèi)源性抗氧化酶活性,降低MDA 的水平,能夠減輕D-半乳糖誘導(dǎo)的脂質(zhì)過氧化和氧化應(yīng)激程度[6]。人參花寡糖能夠通過提高體內(nèi)抗氧化酶活力和降低MDA含量,D-半乳糖誘導(dǎo)的氧化損傷有一定的修復(fù)作用,進而實現(xiàn)抗衰老作用。
參考文獻
[1]陳勤.抗衰老研究實驗方法[M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,1996:32-33.
[2]徐敏.臨床和實驗醫(yī)學(xué)雜志.2006.5(3):289-290.
[3]魏來,趙春景.番茄紅素抗氧化和調(diào)節(jié)血脂作用的研究進展[J].藥學(xué)專論,2004,13(10):21-22.
[4]Hsieh, HM, Wu, WM, Hu, ML. Soy isoflavones attenuate oxidative stress and improve parameters related to aging and Alzheimer's disease in C57BL/6J mice treated with d-galactose[J]. Food and Chemical Toxicology, 2009, 47: 625-632.
[5]Chunlin Ke, Deliang Qiao, Dan Gan., et al. Antioxidant acitivity in vitro and in vivo of the capsule polysaccharides from Streptococcus equi subsp. Zooepidemicus[J]. Carbohydrate Polymers, 2009, 75: 677-682.
[6]Li, XM, Shi, YH, Wang, F., et al. In vitro free radical scavenging activities and effect of synthetic oligosaccharides on antioxidant enzymes and lipid peroxidation in aged mice[J]. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 2007, 43: 364-370.
作者簡介:馬林,碩士,長春中醫(yī)藥大學(xué)吉林省人參科學(xué)研究院,研究方向:中藥有效成分與應(yīng)用開發(fā)。
通訊作者:劉淑瑩,博士,長春中醫(yī)藥大學(xué)吉林省人參科學(xué)研究院,中國科學(xué)院長春應(yīng)用化學(xué)研究所,教授,博士生導(dǎo)師,研究方向:中藥化學(xué)。