6銅制劑對(duì)蘋果輪紋病菌的抑制作用持效期及其影響因素

唐興敏++任立瑞++楊金鳳

摘要：為了篩選出對(duì)蘋果輪紋病菌抑制效果好、持效期長(zhǎng)并且對(duì)果樹(shù)安全的銅制劑，選取生產(chǎn)上常用的6種銅制劑，以代森錳鋅和石硫合劑作為對(duì)照藥劑，采用載玻片孢子萌發(fā)法測(cè)定了不同銅制劑對(duì)蘋果輪紋病菌分生孢子萌發(fā)抑制作用的持效期，并進(jìn)行了光照與降雨對(duì)不同藥劑持效期的影響以及各藥劑對(duì)果實(shí)的藥害等方面的試驗(yàn)。結(jié)果表明：在6種銅制劑和2種對(duì)照藥劑中，倍量式波爾多液、硫酸銅和松脂酸銅是抑制蘋果輪紋病菌分生孢子萌發(fā)最好的藥劑，藥后15 d抑菌率仍達(dá)到95%左右，維持抑菌效果在50%以上的持效期長(zhǎng)達(dá)20 d以上；其次是氫氧化銅，藥后7 d抑制作用65%左右，持效期為7 d；其他藥劑持效期短，抑制效果較差。藥劑抑制作用持效期受降雨和光照影響，但影響程度不同，藥后15 d之內(nèi)，光照和降雨處理對(duì)倍量式波爾多液和硫酸銅的抑菌作用無(wú)顯著性影響，但使松脂酸銅的抑菌作用顯著性降低；藥害試驗(yàn)表明，硫酸銅對(duì)蘋果幼果有藥害，其他藥劑在本研究使用濃度條件下對(duì)幼果安全。

關(guān)鍵詞：蘋果輪紋病；銅制劑；抑菌作用；持效期

中圖分類號(hào)： S436.611.1+9文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A文章編號(hào)：1002-1302（2016）05-0163-04

蘋果輪紋病[Botryosphaeria dothidea （Moug.） Ces. et de Not.]別稱粗皮病[1]，是我國(guó)蘋果生產(chǎn)中的一個(gè)重要病害，該病病菌不僅能夠侵染蘋果果實(shí)導(dǎo)致?tīng)€果，還能侵染枝干，引起枝干潰瘍、枝條枯死，導(dǎo)致樹(shù)勢(shì)衰弱。近年來(lái)，主栽品種的更迭，以及優(yōu)質(zhì)但感病的品種栽培面積不斷擴(kuò)大，再加上大量矮砧密植富士蘋果的種植，蘋果輪紋病已與蘋果樹(shù)腐爛病、蘋果早期落葉病成為我國(guó)蘋果的三大主要病害[2]，逐漸成為生產(chǎn)上的突出問(wèn)題。目前國(guó)內(nèi)外仍以化學(xué)藥劑防治為主，銅制劑作為礦物源農(nóng)藥，是比較常用的一類藥劑，自開(kāi)發(fā)利用至今已有200余年歷史，具有殺菌譜廣、無(wú)抗藥性、持效期較長(zhǎng)、對(duì)農(nóng)產(chǎn)品和環(huán)境比較安全等優(yōu)點(diǎn)，已成為果樹(shù)、蔬菜、農(nóng)作物病害防治的主要藥劑[3-4]。在現(xiàn)代農(nóng)作物無(wú)公害生產(chǎn)中，銅制劑使用前景非常廣闊[5]，但市場(chǎng)上銅制劑種類較多，各有特點(diǎn)，如果選用或使用不當(dāng)，銅離子常常會(huì)導(dǎo)致果樹(shù)發(fā)生藥害[6]，尤其在幼果期易產(chǎn)生藥害[7]。在眾多銅制劑中篩選出抑菌效果良好、持效期長(zhǎng)、對(duì)環(huán)境穩(wěn)定性好、對(duì)果樹(shù)安全的一種或幾種較好的銅制劑，對(duì)蘋果輪紋病的防治具有重要指導(dǎo)意義。

1材料與方法

1.1供試材料

供試蘋果品種：富士，為蘋果輪紋病感病品種，由河北農(nóng)業(yè)大學(xué)植物病害流行與綜合防控研究室試驗(yàn)基地提供。供試病原菌：蘋果輪紋病菌（Botryosphaeria dothidea），由河北農(nóng)業(yè)大學(xué)植物病害流行與綜合防治研究室提供。供試藥劑：本研究根據(jù)藥劑的有效成分種類，選擇生產(chǎn)上常用的6種銅制劑及2種對(duì)照藥劑，藥劑的詳細(xì)信息見(jiàn)表1。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1蘋果輪紋病菌分生孢子的獲得接種未成熟蘋果果實(shí)，黑光燈下誘導(dǎo)蘋果輪紋病菌產(chǎn)生分生孢子[8]。將分生孢子在無(wú)菌水中混勻，配制成孢子濃度為1×105～1×106個(gè)/mL 的孢懸液備用。

1.2.2藥劑對(duì)病菌抑制作用的測(cè)定方法本試驗(yàn)采用玻片孢子萌發(fā)法，即先在載玻片上滴定量藥液，待藥液自然干燥后，再在滴藥部位滴30 μL孢子懸浮液，對(duì)其進(jìn)行保濕培養(yǎng)，25 ℃黑暗培養(yǎng)8～9 h后，采用5點(diǎn)取樣法，在顯微鏡下計(jì)數(shù)分生孢子萌發(fā)情況，每個(gè)處理總計(jì)檢查不少于100個(gè)分生孢子，計(jì)算孢子萌發(fā)率和藥液對(duì)孢子萌發(fā)的抑制率。分生孢子的萌發(fā)率和抑制率計(jì)算公式為：

孢子萌發(fā)率= 萌發(fā)的孢子總數(shù)/檢查的孢子總數(shù)×100%；

孢子萌發(fā)抑制率=（對(duì)照孢子萌發(fā)率-處理孢子萌發(fā)率）/對(duì)照孢子萌發(fā)率×100%。

1.2.3室內(nèi)條件下不同藥劑抑制作用持效期的測(cè)定供試藥劑按照表1建議用量進(jìn)行稀釋。于檢測(cè)前20、15、7、3、1 d，用移液器吸取30 μL銅制劑藥液分別均勻滴于載玻片上，同時(shí)設(shè)代森錳鋅、石硫合劑和清水對(duì)照，4次重復(fù)。待藥液自然干燥后，置于室內(nèi)保存，到達(dá)處理時(shí)間后，運(yùn)用“1.2.2”節(jié)的檢測(cè)方法測(cè)定各處理的孢子萌發(fā)率，并計(jì)算抑制率。

1.2.4降雨和光照對(duì)藥劑抑制作用持效期的影響藥液的稀釋濃度同“1.2.3”節(jié)，于接種前20、15、7、3、1 d，取30 μL銅制劑藥液分別均勻滴于載玻片上，同時(shí)設(shè)代森錳鋅、石硫合劑和清水對(duì)照，4次重復(fù)。待藥液自然干燥后，進(jìn)行不同處理。為了明確室外氣象因素中降雨和光照對(duì)不同藥劑持效期的影響，設(shè)置了4種處理，分別是避光避雨、避光淋雨、光照避雨、光照淋雨。避光處理，用完全遮光的遮陽(yáng)網(wǎng)將滴有藥液的載玻片覆蓋；光照處理，即不覆蓋遮陽(yáng)網(wǎng)，直接將滴有藥液的載玻片置于自然光照處。淋雨處理即在接種前1 d對(duì)滴藥載玻片噴水，模擬雨量為中雨量（降雨量20 mm），避雨處理即不進(jìn)行模擬降雨。到達(dá)處理時(shí)間后，運(yùn)用“1.2.2”節(jié)的檢測(cè)方法測(cè)定各處理的孢子萌發(fā)率，并計(jì)算抑制率。表1供試藥劑一覽

藥劑生產(chǎn)廠家劑型建議用量田間用藥成本

（元/667m2）硫酸銅鈣江蘇龍燈化學(xué)有限公司77%可濕性粉劑2 142.7 g/hm221.4氫氧化銅澳大利亞紐發(fā)姆有限公司37.5%懸浮劑1 000.0 mL/hm210.7松脂酸銅天津施普樂(lè)有限公司12%乳油3 062.5 mL/hm230.6硫酸銅天津天大化工實(shí)驗(yàn)廠99%分析純晶體7 500.0 g/hm214.0波爾多液美國(guó)仙農(nóng)有限公司80%可濕性粉劑3 000.0 g/hm220.0倍量式波爾多液河北農(nóng)業(yè)大學(xué)植物病害流行與綜合防治研究室配制—7 500.0 mL/hm234.0代森錳鋅陶氏益農(nóng)科技有限公司80%可濕性粉劑2 142.2 g/hm29.1石硫合劑天津匯源化學(xué)品有限公司29%水劑19 950.0 mL/hm213.3

1.2.5不同藥劑對(duì)幼果藥害的測(cè)定于晴朗無(wú)風(fēng)的上午（2015年5月12日）在河北農(nóng)業(yè)大學(xué)國(guó)家蘋果產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系蘋果病蟲(chóng)害防控實(shí)驗(yàn)基地選取富士品種蘋果樹(shù)，在其上、中、下各選取3個(gè)幼果，測(cè)量直徑并記錄。按照藥劑建議用量稀釋藥劑，隨后用小噴壺將藥液均勻噴到幼果的表面，直到有液滴滴下為止，設(shè)代森錳鋅、石硫合劑和清水對(duì)照，3次重復(fù)。施藥后，每15 d檢查1次是否出現(xiàn)藥害。

1.3數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析方法

數(shù)據(jù)分析軟件采用了DPS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)（data processing system，DPS v7.05，杭州睿豐信息技術(shù)有限公司）完成。

2結(jié)果與分析

2.1室內(nèi)條件下藥劑抑制作用持效期測(cè)定結(jié)果

室內(nèi)條件下檢測(cè)（表2）表明，倍量式波爾多液、硫酸銅、松脂酸銅有較好的抑菌作用，施藥后15 d接種蘋果輪紋病菌的抑制率分別為100%、100%和94.62%，施藥后20 d分別為98.32%、97.41%和77.51%；氫氧化銅在施藥后1、3、7 d抑制率分別為87.30%、67.64%和65.60%，15 d后抑制作用下降至46.02%；波爾多液和硫酸銅鈣抑菌效果差，施藥后1 d的抑菌率僅為37.20%和18.33%。對(duì)照藥劑代森錳鋅和石硫合劑持效期較短，施藥后3 d抑制率分別為100%和5089%，施藥后7 d分別下降至19.68%和4.23%，基本失去抑菌效果。如果以抑菌率達(dá)到50% 以上的持續(xù)時(shí)間作為藥劑抑制作用的持效期，那么，倍量式波爾多液、硫酸銅、松脂酸銅3種藥劑的抑制作用持效期可達(dá)20 d以上；氫氧化銅的持效期在7 d以上；波爾多液和硫酸銅鈣抑制效果差，基本無(wú)抑制效果；對(duì)照藥劑代森錳鋅和石硫合劑持效期僅為 3 d。

2.2光照和降雨對(duì)藥劑抑菌作用持效期的影響

光照和降雨對(duì)藥劑抑菌作用持效期影響作用的測(cè)定結(jié)果（圖1至圖8）表明：避光淋雨、光照避雨和光照淋雨處理后，藥劑對(duì)分生孢子的抑制作用較避光避雨處理均有不同程度的下降。不同藥劑的持效期受降雨和光照影響的程度不同。光照處理?xiàng)l件下，硫酸銅鈣（圖1）的抑制作用顯著小于避光處理，降雨處理抑制作用較避雨小，但差異不顯著；氫氧化銅（圖2）施藥1 d后，不同處理間抑制作用差異不顯著，施藥 3 d 后降雨對(duì)其抑制作用持效期有顯著性影響；松脂酸銅（圖3）的抑菌作用受降雨影響大，降雨處理抑制作用顯著低于避雨處理，施藥后1 d和20 d，光照淋雨處理?xiàng)l件下抑菌作用顯著低于避光淋雨，而施藥后3 d，光照淋雨處理?xiàng)l件下抑菌作用卻顯著高于避光淋雨，施藥后7 d和15 d，2個(gè)處理間無(wú)顯著性差異，這說(shuō)明松脂酸銅對(duì)光照因素穩(wěn)定性差；硫酸銅（圖4）抑制作用持效期長(zhǎng)，施藥20 d后，4個(gè)處理的抑制率仍能達(dá)到96%以上；波爾多液（圖5）抑菌效果差，施藥1 d后，4個(gè)處理中避光避雨條件下抑菌率最高，僅為63.67%，其他處理都低于50%，且光照和降雨都對(duì)其持效期有顯著影響；自制倍量式波爾多液（圖6）持效期長(zhǎng)，施藥20 d后，各處理抑菌率仍達(dá)90%以上，光照淋雨處理的抑菌率顯著低于其他處理；代森錳鋅（圖7）受光照影響小，受降雨影響大，降雨處理的抑菌率均顯著低于避雨處理；石硫合劑（圖8）持效期短，施藥后1 d，光照淋雨處理抑菌率72.38%顯著低于其他處理，接種后3 d抑菌率低至16%。

6種銅制劑和2種對(duì)照藥劑中，硫酸銅鈣抑菌作用持效期受光照影響顯著，松脂酸銅、波爾多液持效期受光照和降雨影響顯著，氫氧化銅、代森錳鋅和石硫合劑持效期受降雨影響顯著，硫酸銅和倍量式波爾多液對(duì)光照和降雨較穩(wěn)定，在施藥20 d后，降雨對(duì)藥劑抑制作用影響顯著。

2.3不同藥劑對(duì)幼果藥害的測(cè)定結(jié)果

噴藥時(shí)間為2015年5月12日，2015年8月25日調(diào)查發(fā)現(xiàn)幼果期噴施硫酸銅的果實(shí)上出現(xiàn)黑色小斑點(diǎn)，經(jīng)鑒定為藥害癥狀，其他藥劑均未出現(xiàn)藥害（圖9）。

3結(jié)論與討論

本研究明確了6種銅制劑及對(duì)照藥劑在噴藥后不同時(shí)間以及在不同環(huán)境條件下對(duì)蘋果輪紋病菌的抑制作用。倍量式波爾多液、硫酸銅和松脂酸銅是抑制蘋果輪紋病菌效果最好的藥劑，藥后15 d抑菌率能達(dá)到95%左右，防效達(dá)50%以上的持效期長(zhǎng)達(dá)20 d以上，其次是氫氧化銅，藥后7 d抑制作用在65%左右，持效期為7 d，其他藥劑持效期短，抑制效果較差；藥劑持效期受降雨和光照影響，但影響程度不同，光照和降雨處理對(duì)倍量式波爾多液和硫酸銅的抑菌作用無(wú)顯著性影響，但使松脂酸銅的抑菌作用顯著性降低。藥害試驗(yàn)證明，硫酸銅對(duì)幼果有藥害，其他藥劑未出現(xiàn)藥害現(xiàn)象。

有相關(guān)報(bào)道表明，200倍倍量式波爾多液的保護(hù)作用持效期為15 d[9]，本研究結(jié)果與之稍有差別，主要是衡量持效期所用的防效標(biāo)準(zhǔn)不一致，但均說(shuō)明了倍量式波爾多液的持效期較長(zhǎng)。從實(shí)際生產(chǎn)來(lái)看，人們通過(guò)噴霧防控蘋果病害，都有10～15 d噴1次藥的習(xí)慣。因此，用藥后15 d藥劑的防效應(yīng)該是評(píng)價(jià)不同藥劑的重要參考。以藥后15 d的防效來(lái)看，倍量式波爾多液、硫酸銅和松脂酸銅是最好的藥劑，藥后15 d保護(hù)效果達(dá)95%左右，且倍量式波爾多液和硫酸銅耐光解，耐雨水沖刷，對(duì)環(huán)境的穩(wěn)定性好，松脂酸銅不耐雨水沖刷，對(duì)環(huán)境的穩(wěn)定性差。盡管使用倍量式波爾多液較為麻煩，而且價(jià)格較貴，但考慮到其防控效果，推薦倍量式波爾多液為首選藥劑。硫酸銅防效和持效期不亞于倍量式波爾多液，價(jià)格只是倍量式波爾多液的二分之一，但鑒于其對(duì)幼果有藥害，所以在套袋果園可作為首選藥劑，在不套袋果園則須謹(jǐn)慎使用。

本研究所采取的測(cè)試方法簡(jiǎn)便易行、受其他因素干擾較小，對(duì)于評(píng)價(jià)不同藥劑的殘效期具有很強(qiáng)的可操作性和準(zhǔn)確性。但是，由于本研究持效期試驗(yàn)均是室內(nèi)條件下的研究結(jié)果，與田間藥效持效期會(huì)有一定差異；另外載玻片和蘋果葉片對(duì)藥劑的附著力會(huì)有一定差異，這也可能會(huì)影響持效期測(cè)定的結(jié)果，但是并不妨礙不同藥劑之間的相互比較。有關(guān)這些藥劑在田間條件下的持效期，還有待于今后進(jìn)一步測(cè)定。

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