董凱，張春軍，曾海，董琦牡丹江醫(yī)學(xué)院;牡丹江醫(yī)學(xué)院附屬紅旗醫(yī)院

銀杏葉制劑對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用研究

董凱1，張春軍1，曾海2，董琦1
1牡丹江醫(yī)學(xué)院;2牡丹江醫(yī)學(xué)院附屬紅旗醫(yī)院

目的：研究銀杏葉制劑對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用。方法：將大鼠隨機(jī)分為模型組、銀杏葉制劑組和偽手術(shù)組，每組12只。模型組和銀杏葉制劑組的大鼠均采用線栓法制備局灶性腦缺血再灌注損傷的模型，并于尾靜脈連續(xù)給藥3天。檢測(cè)三組大鼠的腦神經(jīng)功能損傷程度、腦組織含水量和腦梗死面積。結(jié)果：腦缺血再灌注后，偽手術(shù)組的大鼠未出現(xiàn)神經(jīng)功能的損害和梗死灶，模型組的大鼠神經(jīng)功能缺損癥狀和梗死區(qū)均嚴(yán)重（p＜0.05），腦含水量明顯高于偽手術(shù)組（p＜0.05），銀杏葉制劑組的大鼠給藥3天后神經(jīng)功能缺損癥狀、腦組織含水量和腦梗死面積均顯著改善（p＜0.05）。結(jié)論：銀杏葉制劑可顯著減輕腦水腫，改善大鼠腦缺血再灌注的損傷。

缺血性腦卒中；缺血再灌注損傷；銀杏葉制劑

缺血性腦卒中是腦動(dòng)脈因血栓、栓塞及血液動(dòng)力學(xué)的改變?cè)斐裳鞯亩虝盒曰虺掷m(xù)性減少，導(dǎo)致腦組織缺血和缺氧而出現(xiàn)的神經(jīng)缺損的癥狀和體征[1]。臨床治療以外科手術(shù)為主，目的是盡早恢復(fù)腦組織的供血和供養(yǎng)、促進(jìn)神經(jīng)功能的恢復(fù)[2]。本次試驗(yàn)采用大鼠腦中動(dòng)脈閉塞的模型，研究銀杏葉制劑對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用，以為臨床治療提供依據(jù)，具體如下。

1　材料和方法

1.1藥品和試劑銀杏葉制劑和MCAO線栓。

1.2儀器全自動(dòng)生化檢測(cè)儀，電子天平。

1.3動(dòng)物清潔級(jí)SD的雄性大鼠（250g～280g），均于標(biāo)準(zhǔn)條件下進(jìn)行適應(yīng)性飼養(yǎng)后用于實(shí)驗(yàn)。

1.4方法將大鼠隨機(jī)分為模型組、銀杏葉制劑組和偽手術(shù)組，每組12只，均于腦缺血再灌注后0h進(jìn)行尾靜脈的注射給藥，1次/d，連續(xù)3天。模型組和偽手術(shù)組的大鼠尾靜脈注射等體積的0.9%氯化鈉注射針劑。

1.5建立模型所有大鼠均腹腔注射針劑水合氯醛進(jìn)行麻醉，采用線栓法阻塞大腦中動(dòng)脈制備大鼠腦缺血再灌注損傷的模型，再灌注后立即連續(xù)3天尾靜脈給藥，1次/d，末次給藥2h后將大鼠處死，檢測(cè)三組大鼠的腦神經(jīng)功能學(xué)損傷程度（腦神經(jīng)功能評(píng)分越高說明損傷程度越高）、腦組織含水量的百分比[（腦濕重-腦干重）/腦濕重×100%]和腦梗死面積的百分比[白色區(qū)域面積/（枚紅色區(qū)域面積+白色區(qū)域面積）×100%]。

1.6數(shù)據(jù)處理將研究數(shù)據(jù)準(zhǔn)確錄入到SPSS18.0軟件中，以95%為可信區(qū)間進(jìn)行分析。計(jì)量資料，用（±s）表示，采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料，用[n（%）]表示，使用χ2檢驗(yàn)。若p＜0.05，則差異顯著，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1腦缺血再灌注后大鼠神經(jīng)功能缺損的評(píng)分見表1。

表1　三組大鼠神經(jīng)功能缺損評(píng)分的比較（分，±s）

表1　三組大鼠神經(jīng)功能缺損評(píng)分的比較（分，±s）

注：與偽手術(shù)組相比，*p＜0.05；與模型組相比，#p＜0.05。

組別模型組（n=12）銀杏葉制劑組（n=12）偽手術(shù)組（n=12）神經(jīng)功能缺損評(píng)分第1天2.51±0.48*2.32±0.50 0.00±0.00 第2天2.86±0.58*2.43±0.52 0.00±0.00 第3天2.95±0.41*2.34±0.67#0.00±0.00

2.2腦缺血再灌注后大鼠的腦組織含水量和梗死面積的百分比腦缺血再灌注后，模型組大鼠的腦組織含水量明顯高于偽手術(shù)組（p＜0.05），銀杏葉制劑組大鼠的腦組織含水量顯著少于模型組（p＜0.05）；偽手術(shù)組大鼠未見梗死灶，模型組大鼠的梗死區(qū)明顯（p＜0.05），銀杏葉制劑組大鼠的腦梗死面積明顯小于模型組（p＜0.05），見表2。

表2　腦缺血再灌注后大鼠腦含水量和梗死面積百分比的比較（%）

3　討論

腦缺血再灌注損傷指的是腦缺血后腦組織恢復(fù)血流灌注時(shí)導(dǎo)致的腦細(xì)胞的損傷，該病變的發(fā)生和發(fā)展均比較復(fù)雜。氧自由基的生成是缺血再灌注損傷的重要機(jī)制，大量氧自由基的產(chǎn)生不僅會(huì)引起體內(nèi)氧化-抗氧化系統(tǒng)的失衡，導(dǎo)致腦組織的過氧化，該病例損傷是不可逆的[3]。銀杏葉是臨床上常用的一種中藥，具有活血化瘀、斂肺平喘、止痛的功效，銀杏內(nèi)酯和總黃酮類物質(zhì)是其的主要活性成分，統(tǒng)稱為銀杏葉的提取物，是從銀杏葉中提取的具有特殊藥理作用的活性物質(zhì)，含有黃酮類、萜類和聚異戊烯醇類等化學(xué)成分[4]?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究顯示，銀杏葉制劑不僅可以調(diào)節(jié)血液循環(huán)、增加腦血流，還能對(duì)抗血小板活化因子和氧自由基，改善腦缺氧和腦組織的新陳代謝[5]。

本次研究中，腦缺血再灌注后，偽手術(shù)組的大鼠未出現(xiàn)神經(jīng)功能的損害和梗死灶，模型組的大鼠神經(jīng)功能缺損癥狀和梗死區(qū)均嚴(yán)重（p＜0.05），腦組織含水量明顯高于偽手術(shù)組（p＜0.05），銀杏葉制劑組的大鼠給藥3天后神經(jīng)功能缺損癥狀、腦組織含水量和腦梗死面積均顯著改善（p＜0.05）。

綜上所述，銀杏葉制劑可顯著減輕腦水腫，改善大鼠腦缺血再灌注的損傷。

[1]郭煒.多指標(biāo)系統(tǒng)評(píng)價(jià)血塞通聯(lián)合銀杏葉制劑治療缺血性腦卒中的臨床療效觀察[J].中醫(yī)藥信息,2012,29(3):69-71.

[2]張濤,法志強(qiáng),郭燕舞.Aliskiren預(yù)處理對(duì)腦缺血再灌注損傷的保護(hù)及對(duì)腦能量代謝的影響[J].中華神經(jīng)外科雜志,2013,29(6):626-631.

[3]李肇端,王準(zhǔn),呂丹，等.右美托咪啶聯(lián)合異丙酚預(yù)處理對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷的影響[J].山東醫(yī)藥,2014,54(4):25-27.

[4]陳盼盼,李曉艷,劉楊，等.銀杏葉制劑聯(lián)合他汀類藥物對(duì)高脂血癥患者血脂水平影響的Meta分析[J].海南醫(yī)學(xué),2014,25(22):3407-3411.

[5]李強(qiáng),王紅義,劉立夏，等.銀杏葉制劑及其提取物對(duì)神經(jīng)保護(hù)的研究進(jìn)展[J].中醫(yī)眼耳鼻喉雜志,2011,01(1):51-54.

牡丹江市科學(xué)技術(shù)計(jì)劃項(xiàng)目（Z2014s037）。

董凱（1974-），女，研究生，中級(jí)，從事基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究工作。

張春軍。