劉娥娥，劉國(guó)勝（北京市豐臺(tái)區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，北京豐臺(tái)100071）

預(yù)濕紗布團(tuán)蘸取犬貓唾液采樣法

劉娥娥，劉國(guó)勝
（北京市豐臺(tái)區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，北京豐臺(tái)100071）

為配合上級(jí)疫控部門(mén)開(kāi)展狂犬病免疫效果監(jiān)測(cè)和唾液帶毒情況檢查，本單位受委托做部分血液和唾液樣品的采集工作。每份唾液2mL。在為寵物犬、貓采集唾液的過(guò)程中，我們根據(jù)采樣要求和寵物生理特點(diǎn)摸索總結(jié)出一種寵物主人易于接受、對(duì)寵物刺激相對(duì)較小的采樣法——紗布團(tuán)蘸取法，使采樣任務(wù)順利完成。采集唾液方法在文獻(xiàn)搜索中有直接抽取法、制造腮腺漏法，但沒(méi)有發(fā)現(xiàn)相同的方法，現(xiàn)介紹如下。

1 用具與方法

1.1 采樣用具

1.1.1 采樣醮取材料 紗布繃帶 （四列、列寬6cm）經(jīng)試驗(yàn)比較，選擇長(zhǎng)度分別為90cm和120 cm兩種規(guī)格。90cm的可用于貓和小型犬，120cm適用體型稍大的犬，為保證效果，長(zhǎng)度最好不低于90cm。紗布團(tuán)可現(xiàn)用現(xiàn)做，也可事先做好備用。制作方法是將紗布繃帶呈索狀在食指上纏繞后，將尾收于中間的孔中。

1.1.2 乳膠手套 目的是加強(qiáng)個(gè)人防護(hù)，因?yàn)椴僮髦杏惺謹(jǐn)D唾液的步驟。有條件還可戴護(hù)目鏡、口罩。

1.1.3 彎頭止血鉗（18cm） 用來(lái)夾住紗布團(tuán)。

1.1.4 塑料棒 用于開(kāi)口。圓滑的塑料材質(zhì)便于消毒，也不會(huì)硌傷牙齒，可用牙刷把等一些物品來(lái)替代。

1.1.5 平皿（8cm） 用于盛接從紗布團(tuán)擠出的唾液。

1.1.6 一次性注射器（2.5mL） 用來(lái)吸取唾液并移入5mL離心管。

1.1.7 生理鹽水 用于紗布團(tuán)的預(yù)濕。

1.1.8 食鹽 市售食用鹽，用于刺激寵物產(chǎn)生唾液。

1.1.9 離心管或試管（5mL）帶蓋 用于保存唾液。

1.2 采樣方法

1.2.1 保定 將寵物置于診臺(tái)上并戴上伊麗莎白圈，一位助手雙手于圈外固定住頭部，主人可幫助保定住四肢（尤其是貓）以防被抓傷。

1.2.2 準(zhǔn)備 采樣者雙手配戴一次性乳膠手套，將紗布繃帶團(tuán)滴加生理鹽水后用力擠干，夾于止血鉗上。注意要將止血鉗頭埋于紗布球中，以免露出的鉗尖使寵物受傷，再將濕紗布球沾滿食鹽。

1.2.3 采集 采樣者左手持塑料棒從口腔一側(cè)齒間隙伸入寵物口中，使其張口。再將其向后保持在上下臼齒間，使犬口不能閉合。右手持止血鉗把紗布繃帶團(tuán)伸到寵物舌下，在舌下阜處翻滾，使食鹽充分刺激犬口腔黏膜。隨著唾液產(chǎn)生，術(shù)者緩慢的翻轉(zhuǎn)紗布團(tuán)使之充分吸收唾液。當(dāng)感覺(jué)紗布團(tuán)在口腔中被按壓時(shí)有滋滋聲、并有濕潤(rùn)光澤時(shí)取出。

1.2.4 收集保存 采樣者用力將紗布團(tuán)中唾液擠于平皿中，用去除針頭的注射器吸取2mL唾液，推入離心管中編號(hào)后冷凍保存。

2 采樣效果

在這次采樣任務(wù)中，我們最終應(yīng)用紗布團(tuán)蘸取法順利地完成了采樣任務(wù)，共采唾液27份（表1）。

由于沒(méi)有現(xiàn)成的操作方法可學(xué)習(xí)借鑒，剛開(kāi)始采樣時(shí)是向?qū)櫸锟谇恢腥鳆}，待唾液流出時(shí)用試管接，但寵物因條件反射總是不停地舔，結(jié)果把唾液舔光咽凈、收獲甚微，且反復(fù)操作費(fèi)時(shí)耗力招來(lái)主人不滿，導(dǎo)致采樣失敗。改用紗布團(tuán)蘸取法，因操作簡(jiǎn)單、刺激小，使主人易于接受，提高了唾液采樣成功率。采樣用具簡(jiǎn)單易得，方法易于推廣。

3 方法討論

采樣中主要的用具是紗布繃帶，它纏成卷后具有很強(qiáng)的吸水性。通過(guò)本人的一個(gè)小試驗(yàn)可以表明90cm和120cm兩種規(guī)格紗布團(tuán)大小和吸收生理鹽水效果（cm、mL）（表2）。

表1 使用兩種方法效果比較

表2 不同規(guī)格紗布要求

由于唾液比生理鹽水粘稠、表面張力大，紗布吸收唾液時(shí)的量還會(huì)有提高。干燥的紗布吸取粘稠張力大的唾液時(shí)速度慢且要浪費(fèi)3－4mL的唾液，如使用預(yù)濕紗布團(tuán)就能較好解決這些問(wèn)題。不但使唾液吸取的速度提高，減少唾液浪費(fèi)，而且使操作時(shí)間減少，同時(shí)濕紗布沾附食鹽的效果很好，使撒鹽吸唾液兩步合二為一。

唾液檢毒采樣不要求無(wú)菌，但要求清潔無(wú)污染。在操作中紗布繃帶、乳膠手套、注射器、試管均為一次性使用；平皿、塑料棒和止血鉗進(jìn)行常規(guī)清洗、消毒后備用；滴加生理鹽水可專(zhuān)用一只注射器；盛放食鹽的容器不允許已進(jìn)過(guò)口腔的紗布團(tuán)重復(fù)蘸取，以免污染。采樣用具除紗布繃帶外，其他的用具可根據(jù)各單位不同情況靈活運(yùn)用，但必須要注意個(gè)人防護(hù)和用具的清洗、消毒。

當(dāng)前人獸共患病狂犬病的疫情嚴(yán)峻，為檢測(cè)寵物是否攜帶狂犬病病毒，在診斷時(shí)開(kāi)始利用先進(jìn)的捕捉病毒基因片段的PCR技術(shù)。該項(xiàng)技術(shù)可以檢測(cè)活體犬、貓唾液樣本，快速查毒。這項(xiàng)診斷技術(shù)的推廣會(huì)使犬、貓唾液樣品采集成為基層獸醫(yī)工作者的一項(xiàng)重要任務(wù)，紗布團(tuán)蘸取法能為他們今后的犬貓唾液采樣工作帶來(lái)一些幫助。

S 852.167 ［文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼］ A

1004－6704（2016）03－0137－02

2015－09－17

劉娥娥（1967－），中級(jí)畜牧師，北京市豐臺(tái)區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心。