孫　妍　遇文婧　王　琪　宋小雙　劉　欣

（黑龍江省森林保護(hù)研究所，哈爾濱　150040）

兩種植物粗提物對楊小舟蛾的殺蟲活性初探

孫妍遇文婧王琪宋小雙劉欣

（黑龍江省森林保護(hù)研究所，哈爾濱150040）

通過溫浸—超聲波連用的提取法，得到走馬芹和豚草的80%乙醇提取物，稀釋后進(jìn)行了楊小舟蛾的殺蟲活性研究，其結(jié)果表明：走馬芹和豚草的粗提液對楊小舟蛾都具有較強(qiáng)的毒殺作用，且走馬芹的殺蟲活性高于豚草。關(guān)鍵詞：走馬芹；豚草；楊小舟蛾；殺蟲活性

走馬芹 （Angelica dahurica）與豚草（Ambrosia artemisiifolia）均為黑龍江省常見的草本植物。走馬芹的主要化學(xué)成分為香豆精類化合物［1-2］，在民間作為中草藥用于清熱解毒，消腫止痛；豚草作為入侵植物，生命力極強(qiáng)，影響人類健康及農(nóng)牧業(yè)生產(chǎn)，其化學(xué)成分中含有豐富的倍半萜內(nèi)酯類化合物［3］。楊小舟蛾（Micromelalopha troglodyte）為鱗翅目舟蛾科，是以幼蟲為害楊樹人工林的主要食葉害蟲，大發(fā)生時葉片被害蟲吃光，嚴(yán)重影響楊樹的正常生長，并對其資源構(gòu)成威脅。本研究采用溫浸-超聲波提取方法對走馬芹和豚草的粗提物進(jìn)行制備，并對其殺蟲活性進(jìn)行初探，以確定這兩種提取物對楊小舟蛾的毒力作用，為日后的生產(chǎn)與應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1　材料和方法

1.1供試植物和蟲源

在黑龍江省采集走馬芹1～2年生整株植株和豚草當(dāng)年生整株植株；試驗(yàn)用蟲為3齡幼蟲，野外采集，室內(nèi)飼養(yǎng)。

1.2儀器和試劑

1.2.1儀器

DHG-9240電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱、FDV高速風(fēng)選式超細(xì)粉碎機(jī)、DK-S26型電熱恒溫水浴鍋、AS20500A型超聲波清洗器、RE-52A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、SHB-IIIA循環(huán)水式多用真空泵、透明手持常量噴霧器、塑料瓶、鑷子、無紡紗布。

1.2.2試劑

1.3植物提取物母液的制備

將新鮮的植物清洗后置于通風(fēng)處陰干，在50℃干燥箱中烘干至恒重，粉碎后得到植物粉末，保存于棕色干燥容器中，備用。將10 g植物粉末和250 mL 80%乙醇裝入三角瓶中，于50℃恒溫水浴鍋內(nèi)溫浸3 h，然后放到超聲波提取器中振蕩40 min，取出后再置于50℃恒溫水浴鍋內(nèi)溫浸3 h，而后將浸好的藥液減壓抽濾，在40℃下用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀進(jìn)行減壓濃縮至原液呈現(xiàn)出濃油狀為止，用10%的聚山梨酯—80作為溶媒進(jìn)行溶解定容至50 mL（即質(zhì)量濃度為200 mg/mL），物理滅菌后放入4℃冰箱中保存?zhèn)溆茫?-5］。

1.4殺蟲效果測定方法

葉片浸藥飼蟲法［6］：將母液稀釋成3個不同濃度梯度，即5倍、10倍、50倍藥液，同時設(shè)清水為對照，采用常量噴霧至均勻而不下滴狀態(tài)。然后把經(jīng)過處理的和對照葉片與健康的未處理的3齡試蟲一起放進(jìn)塑料瓶中，每個瓶中放30頭蟲，對照每個濃度設(shè)3組，并編號，使其有足夠的空間，每天及時換新鮮樹葉，分別在陽光充足直射24、48、72、96、120、144、168 h后調(diào)查試蟲的死亡情況，并計算死亡率。

2　結(jié)果與分析

2.1殺蟲效果測定結(jié)果

采用溫浸—超聲波連用提取法提取走馬芹和豚草的乙醇粗提物，其對楊小舟蛾3齡幼蟲殺蟲效果測定的結(jié)果（表1）顯示：隨著走馬芹和豚草粗提物濃度的升高，對楊小舟蛾3齡幼蟲的作用效果也明顯增強(qiáng)。

表1　走馬芹和豚草粗提物殺蟲效果測定

由不同濃度走馬芹與豚草粗提物的殺蟲效果（圖1）可知：走馬芹與豚草的粗提物對楊小舟蛾的殺蟲活性高峰均出現(xiàn)在施藥后48 h，而后逐漸減弱。在稀釋5倍液的處理中，每個重復(fù)的殺蟲率都能達(dá)到80%以上，具有較高的殺蟲活性。

圖1　不同濃度的走馬芹與豚草的粗提物的殺蟲效果

當(dāng)走馬芹與豚草的粗提物濃度相同時，對楊小舟蛾都具較好的毒力作用，且走馬芹的毒性略高于豚草（圖2）。

圖2　相同濃度時兩種植物粗提物藥效隨時間的變化

2.2供試植物粗提物對楊小舟蛾致死中濃度LC50的測定

以走馬芹粗提物的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)、楊小舟蛾的殺蟲率為縱坐標(biāo)作圖3，由此可知不同濃度的走馬芹提取物對楊小舟蛾的殺蟲作用呈對數(shù)增長趨勢。曲線方程為：Y=7.063 5Ln（X）+9.147 5，復(fù)合系數(shù)R2（%）為99.9，相關(guān)性較好，由此可計算出LC50為324.928 μg/mL（質(zhì)量濃度）。

以豚草粗提物的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)、楊小舟蛾的殺蟲率為縱坐標(biāo)作圖4，由此可知不同濃度的豚草提取物對楊小舟蛾的殺蟲作用呈對數(shù)增長趨勢。曲線方程為：Y=7.453 4Ln（X）+1.818 4，復(fù)合系數(shù)R2（%）為99.54，相關(guān)性較好，由此可計算出LC50為641.865 μg/mL（質(zhì)量濃度）。

圖3　走馬芹粗提物對楊小舟蛾的藥效曲線

圖4　豚草粗提物對楊小舟蛾的藥效曲線

3　結(jié)　論

3.1當(dāng)稀釋5倍液和10倍液時，走馬芹和豚草的植物粗提物對楊小舟蛾3齡幼蟲累計校正死亡率都能達(dá)到50%以上；當(dāng)稀釋5倍液時，這2種植物粗提物對楊小舟蛾3齡幼蟲累計校正死亡率均能達(dá)到80%以上，具有較高的殺蟲活性。相同濃度時，走馬芹對楊小舟蛾3齡幼蟲的殺蟲作用大于豚草。

3.2觀察藥效顯示，藥效與時間呈反比，與濃度成正比，施藥后的第2天試蟲死亡出現(xiàn)高峰，隨后呈現(xiàn)出下降的趨勢。

3.3走馬芹和豚草粗提物對楊小舟蛾的致死中濃度分別為：324.928 μg/mL（質(zhì)量濃度）和641.865 μg/mL（質(zhì)量濃度）。該試驗(yàn)結(jié)果較為理想，可為以這兩種植物作為植物源農(nóng)藥的開發(fā)與利用和對楊小舟蛾的防治提供一點(diǎn)理論基礎(chǔ)。

［1］聶紹荃，袁曉穎.黑龍江省植物資源志［M］.東北林業(yè)大學(xué)出版社，2003.

［2］吳壽金，李德玉，張麗，等.走馬芹中香豆素成分的研究［J］.藥學(xué)學(xué)報，1986，21（8）:599-604.

［3］王浦海，徐軍，吳美玉.豚草化學(xué)成分的研究［J］.中國中藥雜志，1993，18（3）:164-165.

［4］孫妍，張國財，劉瑞鵬，等.走馬芹提取物對楊樹爛皮病的抑制作用研究［J］.中國林副特產(chǎn)，2010，2（105）:11-12.

［5］孫妍，趙紅盈，宋小雙，等.豚草提取物對楊樹爛皮病菌的抑制作用［J］.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014，42（34）:12111-12112，12192.

［6］紀(jì)淑娟.丁香抑菌成分超聲波提取工藝研究［J］.食品科學(xué)，2008，29（05）:201-204.

第1作者簡介：孫妍（1981-），女，博士在讀，助理研究員，主要從事森林保護(hù)研究。

（責(zé)任編輯：李丹）

Study on the Insecticidal Active of the Crude Extracts of two Kinds of Plants to the Micromelalopha Troglodyte（Graeser）

SUNYan
（Heilongjiang Forest Protection Research Institute，Harbin150040）

In this paper，we have studied the insecticidal active of the 80%ethanol crude extracts of Angelica dahurica and Ambrosia artemisiifolia with the method of warm immersion with Ultrasonic to the Micromelalopha troglodyte（Graeser）.The results showed that the crude extracts of Angelica dahurica and Ambrosia artemisiifolia have the higher virulence to Micromelalopha troglodyte（Graeser），and Angelica dahurica was higher than Ambrosia artemisiifolia.

Angelica dahurica；Ambrosia artemisiifolia；Micromelalopha troglodyte；Insecticidal active

S763.306.4，S763.42

C

1001-9499（2016）04-0074-03

2016-06-30