田苗

（遼寧省鞍山市岫巖滿族自治縣動物疫病預(yù)防控制中心，遼寧　鞍山114300）

雞新城疫檢驗方法的研究

田苗

（遼寧省鞍山市岫巖滿族自治縣動物疫病預(yù)防控制中心，遼寧鞍山114300）

雞新城；疫病；檢驗方法研究；病理檢查

雞新城疫主要是由病毒引起的通過接觸進(jìn)行傳染的傳染率很高的疫病。最常見的雞新城的疫病檢驗方法有病理檢查、臨床表現(xiàn)檢查和RT-PCR檢測。雞新城疫的主要病理改變可以分為典型和非典型，典型的主要為全身敗血癥樣變化，其中最為嚴(yán)重的病變位于消化道和呼吸道?；加须u新城疫的雞的臨床表現(xiàn)可以分為最急性型、急性型和慢性型，不同類型的臨床表現(xiàn)也不相同。通過提高雞新城的疫病檢驗水平，可以提高雞新城的檢出率和降低感染率。

1　流行狀況

雞新城疫雖然一年四季均可發(fā)生，但以春、秋季多發(fā)，雞舍內(nèi)較為密閉通氣不暢，氨氣濃度含量，溫度忽高忽低，當(dāng)飼養(yǎng)場里雞的數(shù)量較多的時候，容易感染雞新城疫。并且雞新城疫也容易發(fā)生在有過疫情的雞場或者是經(jīng)常從外地購買小雞的雞場。在發(fā)病的雞與健康的雞接觸的過程中，雞新城疫病毒會從雞的口、皮膚、鼻等處進(jìn)行傳染，雞新城疫的傳染率和雞的死亡率都比較高。因此，研究雞新城疫的檢驗方法對提高雞新城疫的檢出率和降低感染率至關(guān)重要。

2　病理變化

典型的雞新城疫的主要病理變化為全身敗血癥樣變化，其中最為嚴(yán)重的病變位于消化道和呼吸道。呼吸道病變最常見的部位是在雞的鼻和喉腔內(nèi)，鼻和喉腔內(nèi)的粘膜充血甚至出血，里面充滿了黏液性分泌物。雞新城疫病雞的盲腸扁桃體發(fā)炎腫大，嚴(yán)重者會出血、壞死。雞的胃底和小腸的前段即十二指腸的粘膜和肌層破壞嚴(yán)重，出血現(xiàn)象明顯。產(chǎn)蛋的老母雞病變會累及輸卵管和卵泡，其粘膜正常結(jié)構(gòu)被破壞，明顯水腫和充血，卵泡膜彈性降低，十分易破裂以致卵黃流入腹腔引起卵黃性腹膜炎。雞新城疫的病毒較少侵及肝臟和脾臟，腎臟因泌尿功能出現(xiàn)問題而發(fā)生水腫，排尿減少尿液濃縮，因此輸尿管內(nèi)積有尿酸鹽。

雞新城疫還有其他的非典型的病理改變，例如十二指腸降段出血和壞死，形成蕈傘狀的隆起，病毒侵入破壞了雞的免疫防御系統(tǒng)，從而使腸道的淋巴濾泡腫大甚至破裂，直腸粘膜破壞出血，出血的形狀為點狀或者是條狀。

3　臨床表現(xiàn)

患雞的臨床表現(xiàn)可以分為最急性型、急性型和慢性型，不同類型的臨床表現(xiàn)也不相同。最急性型最為嚴(yán)重，雞一般無任何征兆就突然倒地不起，常見于雞新城疫流行的前期，雛雞多發(fā)。急性型的初期病雞的精神萎靡不振，體溫升高，進(jìn)食減少飲水增多。產(chǎn)蛋母雞產(chǎn)蛋的數(shù)量減少甚至停產(chǎn)，異形蛋增多，例如畸形蛋和軟殼蛋。感染后的雞因呼吸道病變，開始出現(xiàn)咳嗽、呼吸困難等臨床表現(xiàn)，雞開始張開嘴或者是伸長頸部呼吸，甚至有的會有頭頸震顫的表現(xiàn)。使患病后的雞頭部朝向地面，會有酸臭的液體從雞嘴內(nèi)流出來，并且病雞開始出現(xiàn)腹瀉，腹瀉的糞便比較稀疏，顏色為黃綠色或者是黃白色，有時排出的糞便甚至成混有綠色的蛋清樣。慢性型臨床表現(xiàn)為癱瘓雞、軟頸或者頭頸方向異常，向一側(cè)或者是后部傾斜。病雞出現(xiàn)腹瀉，顏色為黃綠色或者是黃白色，有時排出的糞便甚至成混有綠色的蛋清樣。

4　RT-PCR檢測

RT-PCR檢測是通過提取感染后的雞腦部組織的RNA 即F基因，以該RNA為模板，P1和P2為擴(kuò)增引物進(jìn)行擴(kuò)增。從而觀察擴(kuò)增后的RNA是否與預(yù)期的結(jié)果相同。隨后將擴(kuò)增的F基因與PMD-18T載體相連接，從而被激活轉(zhuǎn)化為感受態(tài)細(xì)胞，在培養(yǎng)基上進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，然后選取其中的陽性菌落，利用PCR進(jìn)行質(zhì)粒的分離提取，然后對提取出來的質(zhì)粒進(jìn)行檢測分析，倘若病雞的F基因轉(zhuǎn)錄出的蛋白裂解以后氨基酸的序列與強(qiáng)毒株的誤解類似，則病雞感染。

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10.3969/J.ISSN.1671-6027.2016.06.111