吳新濤　石晶　高樂才　孫國(guó)昌　吳文元　龐石磊

?

·論著·

柚皮素對(duì)去卵巢所致大鼠骨質(zhì)疏松癥的影響

吳新濤石晶高樂才孫國(guó)昌吳文元龐石磊

目的觀察柚皮素對(duì)去卵巢所致大鼠骨質(zhì)疏松癥的治療作用。方法50只雌性SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、柚皮素低、中、高劑量組，每組10只。假手術(shù)組施行假手術(shù)，其余4組均行卵巢摘除術(shù)，術(shù)后4周開始灌胃給予35、70、140 mg/kg柚皮素。12周后分別檢測(cè)5組大鼠血清雌二醇(E2)、孕激素(P)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)、堿性磷酸酶(ALP)、骨鈣素(BGP)，尿液鈣(Ca)、磷(P)及脫氧吡啶啉(DPD)、骨密度(GMD)、股骨三點(diǎn)彎曲應(yīng)力、L5腰椎抗壓縮載荷及骨小梁形態(tài)變化。結(jié)果與假手術(shù)組比較，模型組大鼠體重明顯增加，子宮臟器系數(shù)明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；柚皮素低、中、高劑量組大鼠體重較模型組明顯降低，子宮臟器系數(shù)較模型組明顯增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，并呈劑量依賴性。與假手術(shù)組比較，模型組大鼠血清E2、P明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；柚皮素低、中、高劑量組大鼠血清E2、P較模型組明顯增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，呈劑量依賴性。與假手術(shù)組比較，模型組大鼠血清TRACP及尿液Ca、P、DPD明顯增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；柚皮素低、中、高劑量組血清TRACP及尿液Ca、P、DPD較模型組明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，且呈劑量依賴性。與假手術(shù)組比較，模型組大鼠血清ALP明顯增加，BGP明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；柚皮素低、中、高劑量組大鼠血清ALP較模型組明顯降低，BGP較模型組明顯增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，呈劑量依賴性。與假手術(shù)組比較，模型組大鼠BMD明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；柚皮素低、中、高劑量組大鼠BMD較模型組明顯增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，呈劑量依賴性。與假手術(shù)組比較，模型組大鼠股骨三點(diǎn)彎曲應(yīng)力、L5腰椎抗壓縮載荷明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；柚皮素低、中、高劑量組大鼠股骨三點(diǎn)彎曲應(yīng)力、L5腰椎抗壓縮載荷較模型組明顯增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，呈劑量依賴性。與假手術(shù)組比較，模型組大鼠骨小梁面積百分?jǐn)?shù)、骨小梁數(shù)、骨小梁厚度明顯降低，骨小梁分離度明顯增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；柚皮素低、中、高劑量組大鼠骨小梁面積百分?jǐn)?shù)、骨小梁數(shù)、骨小梁厚度較模型組明顯增加，骨小梁分離度較模型組明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，呈劑量依賴性。結(jié)論柚皮素對(duì)去卵巢所致大鼠骨質(zhì)疏松癥具有良好的治療作用。

柚皮素；去卵巢；骨質(zhì)疏松

model group were obviously increased, however, the seum levels of BGP were significantly decreased (P<0.05).The serum levels of ALP in the three medication groups were significantly decreased,however,the serum levels of BGP were significantly increased,as compared with those in model group (P<0.05),with a dose-dependent manner. As compared with that in sham-operation group,the BMD was significantly decreased in model group (P<0.05).The levels of BMD in the three medication groups were significantly increased, as compared with those in model group (P<0.05), with a dose-dependent manner. As compared with those in sham-operation group,the maximum bending stress and loading force of the 5th lumbar vertebra in model group were significantly decreased (P<0.05). The maximum bending stress and loading force of the 5th lumbar vertebra in low-dose,median-dose and high-dose naringenin groups were significantly increased, as compared with those in model group (P<0.05),with a dose-dependent manner. As compared with those in sham-operation group,the percentage of bone trabecula area, bone trabecula number and thickness of bone trabecula were significantly increased in model group (P<0.05). The percentage of bone trabecula area, bone trabecula number and thickness of bone trabecula in the three medication groups were significantly increased, as compared with those in model group (P<0.05),however the resolution of bone trabecula area in the three medication groups was significantly decreased (P<0.05), with a dose-dependent manner.ConclusionNaringenin has better therapeutic effects on ovariectomy-induced osteoporosis in rats.

骨質(zhì)疏松癥是好發(fā)于絕經(jīng)后女性、老年人和慢性疾病患者的常見病、多發(fā)病，發(fā)病原因是由于全身骨量減少、骨微細(xì)結(jié)構(gòu)退化導(dǎo)致骨脆性及骨折風(fēng)險(xiǎn)增加。近年來，骨質(zhì)疏松癥發(fā)病率逐漸升高，我國(guó)60歲以上的老年人中約80%患有不同程度的骨質(zhì)疏松癥，其中以女性患者為主[1]。目前，臨床用于預(yù)防和治療骨質(zhì)疏松癥的藥物主要有雌激素受體調(diào)節(jié)劑、雙膦酸鹽類、降鈣素、氟制劑等，雖然取得了一定療效，但長(zhǎng)期服藥不良反應(yīng)大，且價(jià)格昂貴[2]。因此，尋找安全有效的防治骨質(zhì)疏松癥的藥物已經(jīng)成為當(dāng)前的研究熱點(diǎn)。中草藥柚皮苷屬黃酮類物質(zhì)，具有抗氧化、保護(hù)神經(jīng)、治療骨質(zhì)疏松癥等藥理作用。柚皮素是柚皮苷的主要代謝產(chǎn)物，體外實(shí)驗(yàn)表明柚皮素對(duì)大鼠成骨細(xì)胞促骨形成活性要優(yōu)于柚皮苷[3,4]。然而，柚皮素是否具有抗骨質(zhì)疏松能力目前研究尚少。本研究通過建立去卵巢大鼠骨質(zhì)疏松模型，觀察柚皮素對(duì)骨質(zhì)疏松癥的改善作用，旨在為柚皮素在骨質(zhì)疏松癥的臨床應(yīng)用方面提供理論依據(jù)和實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

1　材料與方法

1.1動(dòng)物及分組雌性SD大鼠50只，購(gòu)自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司[動(dòng)物合格證號(hào)：SCXK-(京)2012-0001]體重180～215 g，恒溫、恒濕條件下飼養(yǎng)，期間可自由飲食，飲水，采血前禁食12 h。50只大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、柚皮素低、中、高劑量組，每組10只。

1.2藥品與儀器柚皮素購(gòu)自南昌昌幫中藥行。雌二醇(E2)、孕激素(P)放射免疫試劑盒及骨鈣素(BGP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)、堿性磷酸酶(ALP)、尿液脫氧吡啶啉(DPD)ELISA試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所。超低溫冰箱購(gòu)自美國(guó)Thermo Fisher公司。雙能X線骨密度測(cè)量?jī)x購(gòu)自美國(guó)GE公司。MRXⅡ型酶標(biāo)儀購(gòu)自美國(guó)Dynex公司。

1.3模型制備除假手術(shù)組外，其余4組大鼠均摘除雙側(cè)卵巢。操作過程：乙醚麻醉大鼠后，經(jīng)背側(cè)切口摘除雙側(cè)卵巢，送病理切片判斷是否切除完整。假手術(shù)組大鼠麻醉后切除卵巢周圍部分脂肪組織，保留卵巢，逐層縫合切口。大鼠術(shù)后肌內(nèi)注射青霉素5萬U/只，共3 d，分籠飼養(yǎng)。5組大鼠飲水、飲食均相同，喂養(yǎng)4周后灌藥給藥。柚皮素低、中、高劑量組分別按35、70、140 mg/kg灌胃給予柚皮素12周。假手術(shù)組灌胃給予等體積0.9%氯化鈉溶液2 ml·kg-1·d-1。

1.4觀察指標(biāo)及方法

1.4.1一般狀況、子宮臟器系數(shù):每天觀察并記錄大鼠飲食、活動(dòng)情況、皮毛色澤，治療結(jié)束后稱量一次體重，取大鼠子宮，稱重，計(jì)算子宮臟器指數(shù)。子宮臟器指數(shù)=臟器質(zhì)量(mg)/體重(g)。

1.4.2雌激素水平檢測(cè):采用放射免疫法檢測(cè)大鼠血清E2、P水平，嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作。

1.4.3生化指標(biāo)檢測(cè):給藥12周后采集大鼠頸動(dòng)脈血10 ml，4 000 r/min離心5 min，取上清，-80℃?zhèn)溆?。采用ELISA法檢測(cè)BGP、TRACP、ALP、DPD含量，嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作。采用生化分析儀檢測(cè)尿Ca、P含量。

1.4.4BMD檢測(cè):5組大鼠腹腔注射10%水合氯醛(3 ml/kg)麻醉后，四肢展開固定在雙能X線骨密度檢測(cè)儀上，對(duì)大鼠全身、腰椎、右側(cè)股骨干骺端進(jìn)行掃描，數(shù)據(jù)采用高分辨率的小動(dòng)物軟件進(jìn)行分析。

1.4.5生物力學(xué)指標(biāo)檢測(cè):實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，處死大鼠，切開下肢皮膚，分離右下肢和L5腰椎，在不傷及骨膜情況下輕輕剝離肌肉，用浸潤(rùn)0.9%氯化鈉溶液的紗布包裹，-20℃冰箱保存。采用微機(jī)控制電子萬能試驗(yàn)機(jī)進(jìn)行右股骨三點(diǎn)彎曲試驗(yàn)，計(jì)算最大應(yīng)力和L5腰椎抗壓縮載荷。

1.4.6形態(tài)指標(biāo)檢測(cè):測(cè)量股骨遠(yuǎn)端干骺端生長(zhǎng)板下1～4 mm范圍內(nèi)的次級(jí)松質(zhì)骨，隨機(jī)選取內(nèi)、中、外3點(diǎn)處圖像，采用Giemsa及VonKossa染色測(cè)定骨小梁面積、骨小梁數(shù)、骨小梁厚度、骨小梁分離度。

2　結(jié)果

2.15組一般情況比較假手術(shù)組大鼠飲食、運(yùn)動(dòng)正常，皮毛顏色光澤；模型組大鼠飲食、活動(dòng)次數(shù)明顯減少，皮毛顏色無光澤；柚皮素低、中、高劑量組大鼠飲食、活動(dòng)次數(shù)較模型組逐漸增多，皮毛顏色光亮。

2.25組體重、子宮臟器系數(shù)比較與假手術(shù)組比較，模型組大鼠體重明顯增加，子宮臟器系數(shù)明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；柚皮素低、中、高劑量組大鼠體重較模型組明顯降低，子宮臟器系數(shù)較模型組明顯增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，呈劑量依賴性。見表1。

組別體重(g)子宮(mg/g)假手術(shù)組276.32±15.510.0187±0.0013模型組340.11±19.06*0.0021±0.0006*柚皮素低劑量組328.26±18.33*#0.0042±0.0007*#柚皮素中劑量組317.63±17.22*△0.0051±0.0008*△柚皮素高劑量組306.25±14.53*▲0.0060±0.0010*▲

注：與假手術(shù)組比較,*P<0.05;與模型組比較,#P<0.05;與柚皮素低劑量組比較,△P<0.05;與柚皮素中劑量組比較,▲P<0.05

2.32組性激素比較與假手術(shù)組比較，模型組大鼠血清E2、P明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；

柚皮素低、中、高劑量組大鼠血清E2、P較模型組明顯增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，呈劑量依賴性。見表2。

組別E2(ng/L)P(μg/L)假手術(shù)組26.79±3.777.02±1.23模型組6.98±0.85*3.13±0.45*柚皮素低劑量組9.46±1.21*#4.09±0.43*#柚皮素中劑量組14.68±1.90*△5.12±0.57*△柚皮素高劑量組19.23±2.32*▲6.20±0.85*▲

注：與假手術(shù)組比較,*P<0.05;與模型組比較,#P<0.05;與柚皮素低劑量組比較,△P<0.05;與柚皮素中劑量組比較,▲P<0.05

2.45組骨生成指標(biāo)比較與假手術(shù)組比較，模型組大鼠血清ALP明顯增加，BGP明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；柚皮素低、中、高劑量組大鼠血清ALP較模型組明顯降低，BGP較模型組明顯增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，呈劑量依賴性。見表3。

組別ALP(U/L)BGP(μg/L)假手術(shù)組71.34±6.5629.04±4.35模型組170.13±10.53*9.67±1.12*柚皮素低劑量組156.32±9.56*#13.28±1.65*#柚皮素中劑量組117.64±8.58*△17.44±2.67*△柚皮素高劑量組87.54±6.50*▲22.69±3.25*▲

注：與假手術(shù)組比較,*P<0.05;與模型組比較,#P<0.05;與柚皮素低劑量組比較,△P<0.05;與柚皮素中劑量組比較,▲P<0.05

2.55組骨吸收指標(biāo)比較與假手術(shù)組比較，模型組大鼠血清TRACP及尿液Ca、P、DPD明顯增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；柚皮素低、中、高劑量組血清TRACP及尿液Ca、P、DPD較模型組明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，呈劑量依賴性。見表4。

組別TRACP(U/L)Ca(mmol/L)P(mmol/L)DPD(nmol/L)假手術(shù)組18.57±2.410.38±0.0528.45±4.3740.42±6.29模型組49.33±7.24*1.35±0.18*54.20±6.51*89.55±9.12柚皮素低劑量組40.51±6.37*#1.08±0.14*#47.97±6.18*#75.18±8.36柚皮素中劑量組32.44±5.12*△0.83±0.16*△40.12±5.43*△63.44±7.09*△柚皮素高劑量組27.77±4.20*▲0.60±0.09*▲34.65±4.35*▲52.14±7.24*▲

注：與假手術(shù)組比較,*P<0.05;與模型組比較,#P<0.05;與柚皮素低劑量組比較,△P<0.05;與柚皮素中劑量組比較,▲P<0.05

2.65組BMD比較與假手術(shù)組比較，模型組大鼠BMD明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；柚皮素低、中、高劑量組大鼠BMD較模型組明顯增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，呈劑量依賴性。見表5。

組別全身腰椎右股骨假手術(shù)組0.158±0.0020.239±0.0040.185±0.003模型組0.110±0.001*0.156±0.002*0.148±0.002*柚皮素低劑量組0.125±0.001*#0.169±0.002*#0.158±0.001*#柚皮素中劑量組0.137±0.002*△0.182±0.003*△0.169±0.002*△柚皮素高劑量組0.149±0.003*▲0.201±0.004*▲0.178±0.003*▲

注：與假手術(shù)組比較,*P<0.05;與模型組比較,#P<0.05;與柚皮素低劑量組比較,△P<0.05;與柚皮素中劑量組比較,▲P<0.05

2.75組病理指標(biāo)比較與假手術(shù)組比較，模型組大鼠骨小梁面積百分?jǐn)?shù)、骨小梁數(shù)、骨小梁厚度明顯降低，骨小梁分離度明顯增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；柚皮素低、中、高劑量組大鼠骨小梁面積百分?jǐn)?shù)、骨小梁數(shù)、骨小梁厚度較模型組明顯增加，骨小梁分離度較模型組明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，呈劑量依賴性。見表6。

組別骨小梁面積百分?jǐn)?shù)(%)骨小梁數(shù)(mm-1)骨小梁厚度(μm)骨小梁分離度(μm)假手術(shù)組57.22±7.358.87±0.12147.78±18.65155.02±19.45模型組34.16±4.45*4.13±0.56*89.56±10.43*277.12±23.45柚皮素低劑量組39.32±5.17*#4.99±0.62*#99.58±11.56*#230.67±20.23柚皮素中劑量組45.56±5.82*△6.14±0.78*△111.44±13.09*△216.68±18.87*△柚皮素高劑量組51.63±6.34*▲7.65±1.12*▲125.65±16.05*▲190.77±17.98*▲

注：與假手術(shù)組比較,*P<0.05;與模型組比較,#P<0.05;與柚皮素低劑量組比較,△P<0.05;與柚皮素中劑量組比較,▲P<0.05

2.85組生物力學(xué)指標(biāo)比較與假手術(shù)組比較，模型組大鼠股骨三點(diǎn)彎曲應(yīng)力、L5腰椎抗壓縮載荷明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；柚皮素低、中、高劑量組大鼠股骨三點(diǎn)彎曲應(yīng)力、L5腰椎抗壓縮載荷較模型組明顯增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，呈劑量依賴性。見表7。

組別股骨三點(diǎn)彎曲應(yīng)力(MPa)L5腰椎抗壓縮載荷(N)假手術(shù)組21.78±3.23249.21±18.65模型組13.07±2.15*160.22±12.24*柚皮素低劑量組15.33±2.26*#189.43±10.68*#柚皮素中劑量組17.24±2.47*△210.35±12.46*△柚皮素高劑量組19.57±3.03*▲229.62±15.38*▲

注：與假手術(shù)組比較,*P<0.05;與模型組比較,#P<0.05;與柚皮素低劑量組比較,△P<0.05;與柚皮素中劑量組比較,▲P<0.05

3　討論

骨質(zhì)疏松癥的主要病理過程是由于骨代謝過程中骨形成相對(duì)減弱或骨吸收相對(duì)增強(qiáng)，造成機(jī)體鈣磷代謝失衡、骨質(zhì)丟失和骨微結(jié)構(gòu)紊亂，最終導(dǎo)致骨質(zhì)疏松癥發(fā)生[5]。Ca、P、DPD是反應(yīng)骨吸收過程的重要指標(biāo)。Ca、P具有促進(jìn)骨基質(zhì)合成和骨礦沉積的作用，在骨質(zhì)丟失狀況下尿液Ca、P含量增加。DPD是骨吸收過程中Ⅰ型膠原的分解產(chǎn)物，以原型經(jīng)腎臟排出[6]。TRACP是由破骨細(xì)胞合成的反映破骨細(xì)胞活性和骨吸收狀況的敏感指標(biāo)[7]。ALP是廣泛分布于各組織中參與骨礦化和骨形成的酶，當(dāng)骨礦沉積不足時(shí)，成骨細(xì)胞分泌ALP增多，是反應(yīng)成骨細(xì)胞活性和骨礦化障礙的最佳指標(biāo)[8]。BMD、骨生物力學(xué)改變直接反映骨礦含量和骨質(zhì)狀態(tài)，BMD降低提示骨礦含量減少，骨彎曲應(yīng)力和抗壓載荷下降提示骨質(zhì)脆弱。本研究采用切除雙側(cè)卵巢模擬骨質(zhì)疏松癥的經(jīng)典方法，結(jié)果顯示，與假手術(shù)組比較，大鼠去除卵巢后體質(zhì)量、血清TRACP、ALP、BGP及尿液Ca、P、DPD含量明顯增加，子宮臟器系數(shù)、血清E2、P含量及BMD、股骨三點(diǎn)彎曲應(yīng)力、L5腰椎抗壓縮載荷明顯降低，股骨骨小梁微體系紊亂，說明大鼠去除卵巢后，體內(nèi)性激素水平及子宮發(fā)育質(zhì)量降低，骨代謝處于高轉(zhuǎn)換狀態(tài)，因此本研究大鼠骨質(zhì)疏松癥模型建立成功[9]。

研究發(fā)現(xiàn)，中草藥柚皮苷能夠?qū)琴|(zhì)疏松小鼠模型發(fā)揮一定程度保護(hù)作用，而柚皮苷經(jīng)口服途徑進(jìn)入體內(nèi)后的主要代謝物為柚皮素。體外實(shí)驗(yàn)表明柚皮素對(duì)大鼠成骨細(xì)胞也具有促骨形成活性，且較柚皮苷有所增加[3,4]。本研究通過分析柚皮素對(duì)去卵巢所致大鼠骨質(zhì)疏松的影響，結(jié)果顯示，治療12周后柚皮素能夠明顯降低去卵巢所致大鼠體重增加、血清TRACP、ALP、BGP及尿液Ca、P、DPD含量，增加血清E2、P含量及BMD、股骨三點(diǎn)彎曲應(yīng)力、L5腰椎抗壓縮載荷，改善子宮臟器系數(shù)、股骨骨小梁微體系結(jié)構(gòu)，說明柚皮素通過促進(jìn)骨形成、抑制骨吸收維持骨量平衡，從而治療骨質(zhì)疏松癥。

綜上所述，柚皮素能夠明顯調(diào)節(jié)骨質(zhì)疏松癥大鼠骨代謝，抑制高骨轉(zhuǎn)換速率，改善骨質(zhì)疏松癥的病理學(xué)改變。本研究表明柚皮素在骨質(zhì)疏松癥治療中具有廣闊的應(yīng)用前景。

1Kaku M, Rocabado JMR, Kitami M, et al. Royal jelly affects collagen crosslinking in bone of ovariectomized rats. Journal of Functional Foods,2014,13:398-406.

2史傳道，樊曉晨，鄧海東. 抗疏健骨顆粒對(duì)骨質(zhì)疏松模型大鼠骨密度和骨生物力學(xué)的影響. 河南中醫(yī)，2012，32：831-833.

3Pang WY, Wang XL, Mok SK, et al. Naringin improves bone properties in ovariectomized mice and exerts oestrogen-like activities in rat osteoblast-like (UMR-106) cells. Br J Pharmacol,2010,159: 1693-1703.

4Ang ES, Yang X, Chen H, et al. Naringin abrogates osteoclastogenesis and bone resorption via the inhibition of RANKL-induced NF-kappaB and ERK activation. FEBS Lett,2011,585: 2755-2762.

5劉明，潘薇，陳德才. 甲狀旁腺激素治療骨質(zhì)疏松的研究進(jìn)展.中華骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病雜志，2012，5：151-156.

6程敏，王慶偉，劉雪英，等. 女貞子治療去卵巢大鼠骨質(zhì)疏松的實(shí)驗(yàn)研究.中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)，2013，29：229-233.

7汪四海，劉健，張金山，等. 按不同臨床因素分組比較強(qiáng)制性脊柱炎患者血清骨鈣素、抗酒石酸酸性磷酸酶的變化.中國(guó)臨床保健雜志，2013，16：587-590.

8肖恩. 骨質(zhì)疏松骨代謝生化指標(biāo)的研究進(jìn)展.中國(guó)骨質(zhì)疏松雜志，2008，14：212-216.

9Zhang YY,Zhang RH，Xue Y，et al. The relationship of obesity and estrogen and their impact on uterus.Acta Univ Med Nanjing,2013: 060-1065.

Effects of naringenin on osteoporosis in ovariectomized rats

WUXintao,SHIJing,GAOLecai,etal.

DepartmentofOsteology,CangzhouHospitalofIntegratedTCMwithWesternMedicine,Hebei,Cangzhou061001,China

ObjectiveTo evaluate the therapeutic effects of naringenin on osteoporosis in ovariectomized rats.MethodsFifty female SD rats were randomly divided into sham-operation group, model group, low-dose naringenin group,median-dose naringenin group and high-dose naringenin group,with 10 rats in each group. Except for the rats in sham-operation group,the rats in the other 4 groups underwent ovariectomy. On 4 weeks after operation, the rats in low-dose naringenin group,median-dose naringenin group and high-dose naringenin group were given naringenin by gavage, with the dosage of 35mg/kg, 70mg/kg, 140mg/kg, respectively for 12 weeks. Then the serum levels of estradiol (E2), progesterone (P), tartrate resistant acid phosphatase (TRACP), bone alkaline phosphatase (ALP), osteocalcin (BGP), urine calcium (Ca), phosphorus (P) and deoxypyridinoline (DPD), bone mineral density (BMD), the maximum bending stress,loading force of the 5th lumbar vertebra and morphologic changes of bone trabecula were detected and compared among the 5 groups. ResultsAs compared with that in sham-operation group,the body weight in model group was obviously increased, however, uterus organ coefficient was significantly decreased (P<0.05). The body weight in the three medication groups was obviously decreased, however, uterus organ coefficient was significantly increased,as compared with that in model group (P<0.05),with a dose-dependent manner.As compared with those in sham-operation group,the serum levels of E2 and P in model group were significantly decreased (P<0.05). However the serum levels of E2 and P in the three medication groups were significantly increased, as compared with those in model group (P<0.05),with a dose-dependent manner. As compared with those in sham-operation group,the serum levels of TRACP,Ca,P,DPD in model group were significantly increased (P<0.05),however, which in the three medication groups were significantly decreased,as compared with that in model group (P<0.05), with a dose-dependent manner. As compared with those in sham-operation group,the serum levels of ALP in

naringenin;ovariectomized;osteoporosis

10.3969/j.issn.1002-7386.2016.17.004

061001河北省滄州中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院骨科(吳新濤、石晶、高樂才、吳文元、龐石磊)；河北省滄州市南大港醫(yī)院骨科(孫國(guó)昌)

R 681.4

A

1002-7386(2016)17-2575-04

2016-03-18)

項(xiàng)目來源：河北省中醫(yī)藥管理局科研計(jì)劃項(xiàng)目(編號(hào):2016267)