畢東敏，魏建芬，張萬壯，李秀芝，張瑞鳳，劉海濤，蔡江南，苗 柳，袁 強，王志文

（1.華北理工大學(xué)附屬醫(yī)院，唐山 063000；；2.華北理工大學(xué)，唐山 063000）

麝香烏龍丸對中醫(yī)不同證型類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎血清MIF、ICAM-1、VCAM-1表達的影響

畢東敏1，魏建芬1，張萬壯1，李秀芝1，張瑞鳳1，劉海濤1，蔡江南2，苗 柳2，袁 強1，王志文1

（1.華北理工大學(xué)附屬醫(yī)院，唐山 063000；；2.華北理工大學(xué)，唐山 063000）

目的：探討麝香烏龍丸對中醫(yī)不同證型類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）血清巨噬細胞移動抑制因子（MIF）、細胞間黏附分子1（ICAM-1）、血管細胞粘附分子1（VCAM-1）表達的影響。方法：選取華北理工大學(xué)附屬醫(yī)院風(fēng)濕免疫門診及住院收治的類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者90例，按照隨機數(shù)字表法分為兩組，每組45例；對照組采用白芍總苷膠囊治療，觀察組采用麝香烏龍丸；對比兩組患者治療前后血清C反應(yīng)蛋白（CRP）、血沉（ESR）、類風(fēng)濕因子（RF）、腫瘤壞死因子α（TNF-α）、白介素1β（IL-1β）、MIF、ICAM-1、VCAM-1的水平變化。結(jié)果：觀察組總有效率93.33%，明顯高于對照組73.33%；兩組治療后血清CRP、ESR、RF、TNF-α、IL-1β的水平均顯著下降；觀察組治療后血清CRP、ESR、RF、TNF-α、IL-1β的水平顯著低于對照組；兩組治療后血清MIF、ICAM-1、VCAM-1的水平均顯著下降；觀察組治療后血清MIF、ICAM-1、VCAM-1的水平顯著低于對照組。結(jié)論：麝香烏龍丸能顯著減輕類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的炎性反應(yīng)，降低血清MIF、ICAM-1、VCAM-1的水平。

麝香烏龍丸；類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎；MIF；ICAM-1；VCAM-1

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）的西藥治療主要是針對炎癥的各個環(huán)節(jié)，主要治療藥物包括非甾體抗炎藥、改善病情藥物、糖皮質(zhì)激素、生物制劑等［1］。許多藥物有明顯的副作用，患者耐受性及依從性差。而生物制劑療效好但價格昂貴，給患者造成較大的經(jīng)濟負擔(dān)。因此，探討中醫(yī)藥治療RA的機制，發(fā)掘有效且毒副作用小的中藥制劑，成為國內(nèi)RA治療的一個研究熱點［2］。麝香烏龍丸是在挖掘宋代《普濟本事方》麝香圓的基礎(chǔ)上，經(jīng)反復(fù)工藝研究和多年臨床應(yīng)用研制而成的純中藥制劑，臨床上治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎具有較好療效［3］。我們通過探討該藥對患者血清MIF、ICAM-1、VCAM-1的影響，進一步明確可能的作用靶點及機制，從而為臨床有效運用麝香烏龍丸治療RA提供新的理論依據(jù)?，F(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2014年7月～2015年6月華北理工大學(xué)附屬醫(yī)院風(fēng)濕免疫門診及住院收治的類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者90例，按照隨機數(shù)字表法分為兩組，每組45例。觀察組男28例，女17例，年齡39～73歲，平均（47.98±6.14）歲，病程3～12年，平均（6.17±1.05）年，按關(guān)節(jié)功能可分為Ⅰ級9例，Ⅱ級25例，Ⅲ級11例；按X線分期可分為Ⅰ期12例，Ⅱ期21例，Ⅲ期12例；按中醫(yī)病證可分為風(fēng)寒濕痹證19例，風(fēng)濕熱痹證17例，痰瘀凝滯證6例，肝腎虧損證3例。對照組男27例，女18例，年齡37～75歲，平均（48.04±5.83）歲，病程2～13年，平均（6.01±1.24）年，按關(guān)節(jié)功能可分為Ⅰ級11例，Ⅱ級24例，Ⅲ級10例；按X線分期可分為Ⅰ期13例，Ⅱ期22例，Ⅲ期10例；按中醫(yī)病證可分為風(fēng)寒濕痹證19例，風(fēng)濕熱痹證17例，痰瘀凝滯證6例，肝腎虧損證3例。兩組性別、年齡、病程、關(guān)節(jié)功能、X線分期、中醫(yī)病證對比差異無顯著性意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn) 西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)［4］：符合①關(guān)節(jié)晨僵至少持續(xù)1個小時；②出現(xiàn)軟組織水腫或積液的關(guān)節(jié)數(shù)≥3個；③指間關(guān)節(jié)、掌指關(guān)節(jié)、腕關(guān)節(jié)中至少1個出現(xiàn)關(guān)節(jié)腫脹；④有對稱性關(guān)節(jié)炎；⑤有類風(fēng)濕結(jié)節(jié)；⑥血清類風(fēng)濕因子（RF）呈陽性；⑦X線片顯示關(guān)節(jié)間隙狹窄、骨質(zhì)疏松或其它骨損病變。上述7項中滿足4項即可診斷為類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。

中醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)：符合《實用中醫(yī)風(fēng)濕病學(xué)》中相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)［5］，①風(fēng)寒濕痹證，主癥，關(guān)節(jié)腫脹、疼痛、屈伸不利，有灼熱感，晨僵；次癥，全身酸痛、惡寒惡濕；舌紅苔白黃，脈濡數(shù)。②風(fēng)濕熱痹證，主癥，關(guān)節(jié)紅腫、疼痛，得涼疼痛減輕；次癥，關(guān)節(jié)晨僵、腫脹、活動不利、灼熱感，舌紅苔黃或膩，脈滑數(shù)或濡數(shù)。③痰瘀凝滯證，主癥，關(guān)節(jié)畸形、腫脹、刺痛；次癥，活動痛甚，屈伸不利，皮膚干燥、無彈性或有瘀斑、紫癜，皮下結(jié)節(jié)；舌暗紫或淡苔白膩，脈沉細。④肝腎虧損證，主癥，關(guān)節(jié)畸形，消瘦，骨節(jié)煩痛；次癥，關(guān)節(jié)僵硬，活動不利，肌肉萎縮，疲乏、氣短、心悸、大便稀，舌淡苔白，脈沉細。

1.3 納入和排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：①關(guān)節(jié)功能及X線分期I～III級者；②30d內(nèi)未接受相關(guān)治療者；③患者同意知情；④符合西醫(yī)及中醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①關(guān)節(jié)功能IV級或X線分期IV級；②關(guān)節(jié)嚴(yán)重畸形；③合并其他免疫系統(tǒng)病變；④心、肝、肺、腎、造血系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)等嚴(yán)重疾病患者；⑤嚴(yán)重消化性潰瘍患者；⑥依從性差或精神異常者。

1.4 治療方法 對照組：口服白芍總苷膠囊（寧波立華制藥有限公司，批準(zhǔn)文號：國藥準(zhǔn)字H20055058，規(guī)格：0.3g/片），每日3次，每次2片，連續(xù)治療60d。

觀察組：口服麝香烏龍丸（由頸復(fù)康藥業(yè)集團加工），每日2次，每次30粒，連續(xù)治療60d。

1.5 療效標(biāo)準(zhǔn) 參照《實用中醫(yī)風(fēng)濕病學(xué)》中相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)擬定。如下6項內(nèi)容：①晨僵低于15分鐘；②無疲乏感；③關(guān)節(jié)無壓痛；④關(guān)節(jié)疼痛消失；⑤關(guān)節(jié)無軟組織腫脹；⑥患者ESR（男）≤20mm/h，（女）≤30mm/h。

痊愈：滿足6項內(nèi)容；顯效：符合5項內(nèi)容；有效：符合3～4項內(nèi)容；無效：符合＜3項內(nèi)容?？傆行?（痊愈例數(shù)+顯效例數(shù)+有效例數(shù)）/全部例數(shù)×100%。

1.6 觀察指標(biāo) 于治療前及末次治療后晨起空腹條件下抽取靜脈血5mL，留存于無菌非抗凝試管中，在采集后2h內(nèi)，3000r/min 條件下離心 10min，留取上清液分裝于Eppendorf管中，快速冷凍，置-80 ℃深低溫冰箱保存待測。應(yīng)用免疫速率散射比濁法檢測患者血清CRP、RF水平變化；采用血沉分析儀（Ves-matic20型）運用魏氏法檢測ESR水平變化；采用放射免疫法檢測血清TNF-α、IL-1β水平變化；應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附雙抗體夾心法測定各組患者治療前后血清中MIF、ICAM-1、VCAM-1的含量，試劑盒均由美國貝克曼公司生產(chǎn)。

1.7 統(tǒng)計學(xué)處理 運用SPSS21.0數(shù)據(jù)處理，療效等計數(shù)資料運用百分率表示，行χ2檢驗；生化指標(biāo)等計量資料采用mean±SD表示，符合正態(tài)分布的計量資料組內(nèi)比較行配對t檢驗，組間比較行獨立樣本t檢驗，以P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組療效比較 觀察組總有效率93.33%，對照組為73.33%，兩組對比差異有顯著性意義（P＜0.05）。見表1。

表1 兩組療效比較

2.2 兩組治療前后血清CRP、ESR、RF、TNF-α、IL-1β水平變化 兩組治療后血清CRP、ESR、RF、TNF-α、IL-1β的水平均顯著下降（P＜0.05）；觀察組治療后血清CRP、ESR、RF、TNF-α、IL-1β的水平顯著低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表2 兩組治療前后血清CRP、ESR、RF、TNF-α、IL-1β水平變化

2.3 兩組治療前后血清MIF、ICAM-1、VCAM-1水平變化 兩組治療后血清MIF、ICAM-1、VCAM-1的水平均顯著下降（P＜0.05）；觀察組治療后血清MIF、 ICAM-1、VCAM-1的水平顯著低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表3。

表3 兩組治療前后血清MIF、ICAM-1、VCAM-1水平變化

3 討論

RA是以關(guān)節(jié)炎癥為主的慢性反復(fù)發(fā)作的全身性疾病，是最常見的系統(tǒng)性自身免疫病。我國類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的患病率約為0.32%～0.36%，且有增長趨勢。RA的基本病理變化為滑膜炎和血管翳形成，多種細胞因子、抗原抗體及粘附分子等參與［6］?；ぱ追磸?fù)發(fā)作可導(dǎo)致骨質(zhì)、關(guān)節(jié)軟骨和關(guān)節(jié)囊的破壞，最終可致關(guān)節(jié)變形及活動明顯受限。近年來在分子生物學(xué)、免疫學(xué)、遺傳學(xué)等方面對RA的研究不斷深入，發(fā)現(xiàn)了RA的發(fā)生與影響滑膜組織細胞增生及血管生成的因子有關(guān)［7］。其中，巨噬細胞移動抑制因子（MIF）、細胞間粘附分子-1 （ICAM-1）、血管細胞黏附分子（VCAM-1）與RA發(fā)病密切相關(guān)［8］。 MIF是一種重要的調(diào)節(jié)細胞生長、分化的前炎癥細胞因子，能起到調(diào)節(jié)炎癥程度的作用，作為TNF-α和IL-1β的上游細胞因子，其調(diào)控作用在RA發(fā)病機制中發(fā)揮重要作用［9］。唐茜等研究表明，MIF可作為RA治療的新靶點［10］。ICAM-1和VCAM-1屬免疫球蛋白超家族，ICAM-1可介導(dǎo)滑膜細胞與細胞以及滑膜細胞與細胞外基質(zhì)之間的粘附，導(dǎo)致滑膜細胞的移行增生，引起一系列病理改變；正常情況下VCMA-1呈現(xiàn)低表達，當(dāng)機體受到炎性因子刺激時，其表達增強，并能促進免疫細胞浸潤，使單核細胞和淋巴細胞緊密地粘附于內(nèi)皮，并進一步促進炎癥反應(yīng)［11-12］。

中醫(yī)認為，RA屬“痹癥”范疇，又稱為“歷節(jié)”、“白虎歷節(jié)”、“鶴膝風(fēng)”、“頑痹”、“尫痹”等。主要病機為風(fēng)、寒、濕、熱、痰、瘀痹阻氣血，治療以祛邪通絡(luò)為基本原則。研究顯示，多種中藥治療RA既能抗炎鎮(zhèn)痛，又可調(diào)節(jié)免疫，有獨特的臨床優(yōu)勢［13］。麝香烏龍丸是在挖掘宋·許叔微《普濟本事方》“麝香圓”的基礎(chǔ)上，結(jié)合現(xiàn)代臨床和反復(fù)工藝研制而成。該藥由麝香、川烏、全蝎、地龍、黑豆組成，具有溫經(jīng)散寒，舒筋活絡(luò)，行血祛瘀，消腫止痛的作用。其中對于緩解關(guān)節(jié)疼痛、晨僵、消除關(guān)節(jié)腫脹、恢復(fù)關(guān)節(jié)功能等方面療效顯著。前期動物實驗研究表明麝香烏龍丸有明顯的抗炎、鎮(zhèn)痛作用［14］。該藥可抑制基質(zhì)降解素-1（MMP-3）和明膠酶-B（MMP-9）的高表達和膠原過度降解，上調(diào)骨保護素（OPG），下調(diào)核因子-KB 受體活化因子配體（RANKL）的表達，降低 RANKL /OPG 的比例，從而阻止大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎軟骨破壞及促進軟骨修復(fù)。可調(diào)節(jié)垂體促腎上腺皮質(zhì)激素、β-內(nèi)啡肽的表達，從而發(fā)揮鎮(zhèn)痛作用。麝香烏龍丸可調(diào)節(jié)MIF、ICMA-1、VCAM-1的失衡，與抑制滑膜組織血管生成和抑制AA大鼠炎癥進展有關(guān)［15］。

本研究結(jié)果顯示，觀察組治療后患者血清中炎性指標(biāo)（CRP、ESR、RF、TNF-α、IL-1β）及MIF、ICMA-1、VCAM-1的水平均顯著下降，且下降的程度優(yōu)于對照組。結(jié)果進一步證實了，麝香烏龍丸可通過多靶點、多途徑改善類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎臨床癥狀，提高治療效果。本研究也存在一些不足，由于研究時間有限，未對患者遠期療效進行對比；由于樣本量限制，未對中醫(yī)不同證型的類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎進行分類對比分析；這些方面不足也為后期進一步研究指明的方向。

［1］ 高泉， 周磊， 張婷， 等. 來氟米特與甲氨蝶呤治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的療效及安全性［J］. 中國老年學(xué)雜志， 2012， 32（21）: 4816-4817.

［2］ 侯勇， 趙巖. 類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的診斷和治療進展［J］. 實用醫(yī)院臨床雜志， 2011， 8（2）: 8-10.

［3］ 李健， 郭洪濤， 牛旭艷， 等. 治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎中藥方劑作用原理的網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究策略［J］. 中國實驗方劑學(xué)雜志， 2012， 18（6）: 267-270.

［4］ 張乃崢. 臨床風(fēng)濕病學(xué)［M］. 上海: 上?？茖W(xué)技術(shù)出版社， 2001: 292.

［5］ 路志正， 焦樹德. 實用中醫(yī)風(fēng)濕病學(xué)［M］. 北京: 人民衛(wèi)生出版社，2001， 5-60.

［6］ 黃蓓， 汪慶童， 劉亢亢， 等. 類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎發(fā)生發(fā)展中TNF-α信號通路與CD4+T細胞的關(guān)系［J］. 中國藥理學(xué)通報， 2013， 29（7）: 900-903.

［7］ 姜一真， 唐若余， 潘嬌嬌， 等. 潑尼松聯(lián)合甲氨蝶呤或來氟米特治療老年類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的療效比較［J］. 中國老年學(xué)雜志， 2015， （21）: 6199-6201.

［8］ 向?qū)В?袁林， 蘇林沖， 等. 金邊祛風(fēng)飲對類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜細胞IL-1β、TNF-α及MMP-3表達的影響［J］. 中國免疫學(xué)雜志， 2013，29（9）: 952-954， 959.

［9］ 邵耀明， 倪芳穎， 陳國千， 等. 類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎實驗診斷指標(biāo)的比較分析［J］. 中國實驗診斷學(xué)， 2011， 15（10）: 1655-1656.

［10］ 唐茜， 徐建華， 趙晟， 等. 類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者血清巨噬細胞移動抑制因子白細胞介素-17及-23表達與合并動脈粥樣硬化的相關(guān)性研究［J］. 中華風(fēng)濕病學(xué)雜志， 2011， 15（5）: 305-308.

［11］ 安新， 高利常， 張英杰， 等. 類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者血清白細胞介素-32細胞間黏附分子-1白細胞介素-10的檢測及意義［J］. 山西醫(yī)藥雜志， 2014， 7（1）: 13-16.

［12］ 王志文， 丁春菊， 張愛國， 等. 麝香烏龍丸對佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠滑膜病理形態(tài)及血管內(nèi)皮生長因子、內(nèi)皮抑素表達的影響［J］. 中國實驗方劑學(xué)雜志， 2011， （19）: 241-244.

［13］ 李怡良， 董玉山， 徐丁潔， 等. 麝香烏龍丸對佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠軟骨病變及IL-1β、IL-1Ra、PGE2表達的影響［J］. 中國中醫(yī)急癥，2013， 22（6）: 922-924.

［14］ 陳守中， 袁強， 張愛國， 等. 麝香烏龍丸對佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠滑膜組織病理形態(tài)及TNF-α， IL-6表達的影響［J］. 中國實驗方劑學(xué)雜志， 2012， 18（6）: 234-236.

［15］ 李瑞昌， 李娟. 正清風(fēng)痛寧聯(lián)合甲氨蝶呤治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的系統(tǒng)評價［J］. 中國實驗方劑學(xué)雜志， 2012， 18（11）: 1-4.

Effect of ShexiangWulong Pill on different TCM Syndromes of rheumatoid arthritis serum MIF， ICAM-1， VCAM-1 expression

Bi Dong-min1， Wei Jian-fen1， Zhang Wan-zhuang1， Li Xiu-zhi1， Zhang Rui-feng1， Liu Hai-tao1， Cai Jiang-nan2， Miao Liu2， Yuan Qiang1， Wang Zhi-wen1
（1. Affiliated Hospital of North China University of Science & technology， Hebei， Tangshan 063000；2. North China Institute of technology， Hebei， Tangshan 063000）

Objective To explore the relationship of ShexiangWulong Pill on different TCM Syndromes of rheumatoid arthritis（RA）of serum macrophage mobile inhibition factor（MIF）， intercellular adhesion molecule 1（ICAM-1）， vascular cell adhesion molecule 1（VCAM-1）expression of affect. Methods North Polytechnic University hospital rheumatology outpatient and inpatient patients admitted 90 cases of rheumatoid arthritis. They were randomly divided into two groups， 45 cases in each group. Control group with total glucosides of paeony capsule in the treatment of. Observation group was treated with Shexiang-Wulong pill. Changes of serum CRP， ESR， RF， TNF-α， MIF， IL-1β， ICAM-1 and VCAM-1 levels before and after treatment were compared between two groups. Results The total efficiency of 93.33% in observation group， the control group was 73.33%. There was a significant difference between the two groups. The two group after treatment， serum CRP， ESR， RF， TNF-α， IL-1β levels were significantly decreased. The levels of serum CRP， ESR， RF， TNF-α， IL-1β of the observation group after treatment was significantly lower than the control group. The difference was statistically significant. The two group after treatment， serum MIF， ICAM-1 and VCAM-1 were significantly decreased. The levels of serum MIF， ICAM-1， VCAM-1 of the observation group after treatment was significantly lower than the control group， the difference was statistically significant. Conclusion the inflammatory reaction of ShexiangWulong pill can significantly reduce rheumatoid arthritis， reduce serum MIF，ICAM-1 and VCAM-1 levels.

shexiangWulong pill； rheumatoid arthritis； MIF； ICAM-1； VCAM-1

R259

A

1673-016X（2016）04-0129-04

2016-01-10

畢東敏，E-mail: 2844521391@qq.com