何闊，楊淞，湯巨平，趙柳蘭，吳浩，吳應(yīng)斌

（1.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院，四川成都 611130；2.四川省似鮎高原鰍省級原種場，四川峨眉山 614224）

5種常用水產(chǎn)藥品對似鯰高原鰍魚苗的急性毒性實驗

何闊1，楊淞1，湯巨平2，趙柳蘭1，吳浩1，吳應(yīng)斌2

（1.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院，四川成都 611130；2.四川省似鮎高原鰍省級原種場，四川峨眉山 614224）

本文選擇在似鯰高原鰍適宜的水溫，采用靜水法生物測試的方法，研究了氰戊菊酯、硫酸銅、高錳酸鉀、聚維酮碘和甲醛5種藥物對似鯰高原鰍魚苗的急性毒性實驗。實驗結(jié)果表明：5種常用水產(chǎn)藥物對似鯰高原鰍24 h半致死濃度（24 h LC50）依次為0.183、0.261、3.69、16.3、77.4 mg/L；48 h LC50分別為0.143、1.87、3.33、13.2、75.4 mg/L；96 h LC50分別為0.13、1.42、3.1、11.1、69.7 mg/L；對似鯰高原鰍的安全濃度分別為0.013、0.142、0.31、1.11、6.97 mg/L。5種藥物對似鯰高原鰍的毒性強度依次為：氰戊菊酯＞硫酸銅＞高錳酸鉀＞聚維酮碘＞甲醛。似鯰高原鰍對氰戊菊酯、硫酸銅等殺蟲劑非常敏感，而對聚維酮碘、甲醛等殺菌劑相對不太敏感，但對高錳酸鉀這種殺菌劑較為敏感，所以在使用高錳酸鉀時注意濃度的控制。本文就5種藥物對似鯰高原鰍的急性毒性效應(yīng)特征進行分析和探討。

似鯰高原鰍；半致死濃度；急性毒性；安全濃度

似鯰高原鰍（Triplopysa siluroides）隸屬于鯉形目（Cypriniformes）、鰍科（Cobitidae）、條鰍亞科（Nemacheilinae），高原鰍屬（Triplophysa）[1]，俗稱老虎魚、黃河鰱魚、土鲇魚，是鰍科魚類中個體較大者。在國內(nèi)，其主要分布于青海、四川、甘肅的黃河干流中上游及其支流中，寧夏黃河干流也偶有分布。似鯰高原鰍棲息于河流、湖泊多礫石處，以小魚或水生昆蟲、蠕蟲為食，體色隨個體生長及環(huán)境而有變化。由于在自然分布區(qū)域被大量捕撈，從而導(dǎo)致資源大幅度下降，目前僅在人煙稀少的高原地區(qū)有一定數(shù)量，所以對似鯰高原鰍的合理利用和保護管理極其重要與急切。

似鯰高原鰍是一種高蛋白低脂肪，肉味香美的名貴經(jīng)濟魚類[2]，目前為了更好地開發(fā)利用這一珍貴高檔水產(chǎn)品，其人工繁殖已經(jīng)取得突破，近年來四川與青海等地逐漸開始了似鯰高原鰍的人工養(yǎng)殖和繁殖，諸多學(xué)者也從繁殖、養(yǎng)殖、病害等方面進行了似鯰高原鰍的基礎(chǔ)研究[3-7]。但由于使用配合飼料以及高密度養(yǎng)殖等方式，改變了似鯰高原鰍的自然生活習(xí)性，導(dǎo)致其免疫能力下降，不時有疾病發(fā)生。如車輪蟲病以及愛德華氏菌引起的出血、爛鰓等癥狀，以上疾病可通過硫酸銅和高錳酸鉀或聚維酮碘進行防治[6，8]。但這類藥物對似鯰高原鰍的毒性試驗還未見報道。因此，本文研究了5種常用水產(chǎn)藥物氰戊菊酯、硫酸銅、高錳酸鉀、聚維酮碘和甲醛對似鯰高原鰍的急性毒性實驗，為評價常用水產(chǎn)藥物對似鯰高原鰍生長、發(fā)育和繁殖過程中疾病的防控與治療提供理論參考依據(jù)，也為山區(qū)河流的人工放流、資源恢復(fù)提供種源保障，具有顯著的經(jīng)濟效益和生態(tài)效益。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

1.1.1 實驗動物似鯰高原鰍[體質(zhì)量（1.30±0.26）g，體長（5.78±0.28）cm]若干尾，從中選擇體長體質(zhì)量差異較小的進行實驗。實驗魚由四川省似鲇高原鰍原種場提供。

1.1.2 實驗藥品高錳酸鉀（分析純），硫酸銅（晶體，分析純），甲醛（37%～40%），氰戊菊酯，聚維酮碘。實驗藥物先用清水配成母液，再根據(jù)實驗需求配成相應(yīng)的濃度。

1.2 實驗方法

1.2.1 飼養(yǎng)管理實驗用水為充分曝氣后的自來水，水溫在（18±1）℃，pH為弱堿。實驗在直徑為36 cm、高度為18 cm的實驗盆中進行。試驗期間不充氣，不投餌料，每個實驗盆加入5 L水，并隨機放入12尾似鯰高原鰍。

1.2.2 預(yù)實驗為確定藥液的大致濃度范圍，參考已報道其他魚類的相關(guān)資料[9-12]，設(shè)計3個藥物濃度，每個濃度放入5尾似鯰高原鰍，觀察12 h似鯰高原鰍對各種藥物的最大耐受濃度和完全死亡濃度。

1.2.3 正式實驗根據(jù)預(yù)實驗，對5種藥物設(shè)計以下不同的實驗濃度（表1）。根據(jù)靜水法生物測試[13]，實驗期間不更換藥液（除甲醛24 h換一次外），實驗期間不投喂餌料，避免飼料的影響，也不需要充氣。根據(jù)預(yù)實驗結(jié)果按等比或等差級數(shù)設(shè)5個濃度梯度（各設(shè)3個平行組）及1個空白對照組。每一濃度組放12尾似鯰高原鰍，觀察其行為表現(xiàn)、中毒現(xiàn)象，同時記錄死亡情況并計算病死率。似鯰高原鰍中毒后，經(jīng)過玻璃棒多次刺激無反應(yīng)則判斷為死亡，撈出。

“我國石化行業(yè)大而不強，發(fā)展受到資源、能源、環(huán)境的嚴重制約。在新時代背景下，亟需運用新的信息化、智能化等現(xiàn)代信息技術(shù)，推進以高效化和綠色化為目標的智能優(yōu)化制造，實現(xiàn)新舊動能全面轉(zhuǎn)型發(fā)展?！敝袊こ淘涸菏俊⑷A東理工大學(xué)教授錢鋒積從事工業(yè)過程建模與控制及工業(yè)過程先進控制研究幾十年之經(jīng)驗，對石化行業(yè)推進智能制造提出了獨到見解。

1.3 數(shù)據(jù)處理

表1 實驗藥物濃度

記錄各實驗組似鯰高原鰍的24、48、96 h的死亡數(shù)，并計算出平均病死率。

半致死濃度：用直線內(nèi)插法，以濃度為橫坐標，病死率為縱坐標，求出各藥物的半致死濃度LC50。

安全濃度：采用常規(guī)方法計算安全濃度，即按96 h的LC50×0.1計算安全濃度。

用SPSS18.0進行數(shù)據(jù)分析，數(shù)據(jù)均用平均值±標準差表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 行為表現(xiàn)

在氰戊菊酯實驗中觀察到似鯰高原鰍在高濃度0.40 mg/L 1 h后，出現(xiàn)中毒現(xiàn)象，其表現(xiàn)為狂躁不安，在實驗盆中狂游。似鯰高原鰍深度中毒后，出現(xiàn)呼吸障礙現(xiàn)象、間接性呼吸，并身體抽搐，時不時往水面竄，翻滾側(cè)游，身體抽搐扭曲。死亡后，有的似鯰高原鰍肚子脹大，體色發(fā)白。

似鯰高原鰍放入高錳酸鉀實驗液后，在高濃度8.0 mg/L 45 min后開始表現(xiàn)煩躁不安，隨后側(cè)臥于水底，呼吸困難。死亡后其躺于盆底，腹部呈現(xiàn)出一團紅塊。

在聚維酮碘實驗中，似鯰高原鰍先呼吸頻率加快，在最高濃度40 mg/L從110次/min經(jīng)過20 min增加至178次/min，表現(xiàn)性情暴躁，偶爾出現(xiàn)狂游。深度中毒后，其呼吸頻率減慢，出現(xiàn)側(cè)游，使勁往水面竄，游泳能力減弱，體色變淡，慢慢沉入水底刺激反應(yīng)極弱，直至死亡。

在甲醛實驗組觀察到，似鯰高原鰍放入實驗液中，最高濃度150 mg/L實驗組先呼吸頻率略微加快，從108次/min變?yōu)?20次/min。其受刺激后，出現(xiàn)間歇性狂游，表現(xiàn)為狂躁不安；明顯中毒后，開始側(cè)游，運動能力減弱，呼吸頻率減慢，對外界刺激反應(yīng)減弱，體色發(fā)白，死亡后有掉皮現(xiàn)象。

2.2 病死率

試驗開始，低濃度組似鯰高原鰍活動情況與對照組基本相似大多成群靜伏于實驗盆底部，少數(shù)緩慢游動，而高濃度組似鯰高原鰍反應(yīng)激烈，顯得十分興奮，呼吸頻率加快。一段時間后，低濃度組似鯰高原鰍活動情況變化不大，而高濃度組活動能力開始減弱，呼吸頻率也隨之變緩，受外界刺激后反應(yīng)遲鈍，體色變淺。隨著時間延長，不同藥物中高濃度組似鯰高原鰍均出現(xiàn)死亡，低濃度少有死亡出現(xiàn)，具體病死率見表2。

表2 5種藥物不同濃度下似鯰高原鰍病死率

2.3 安全濃度與半致死濃度

5種藥物對似鯰高原鰍的安全濃度依次為氰戊菊酯0.0131 mg/L、硫酸銅0.142 mg/L、高錳酸鉀0.31 mg/L、聚維酮碘1.11 mg/L、甲醛6.97 mg/L。若以安全濃度為衡量標準，該試驗表明似鯰高原鰍對5種藥物敏感程度依次氰戊菊酯＞硫酸銅＞高錳酸鉀＞聚維酮碘＞甲醛。似鯰高原鰍對氰戊菊酯和硫酸銅兩種殺蟲劑敏感程度較高，而對殺菌劑甲醛和聚維酮碘的敏感程度相對較低。5種藥物的半致死濃度和安全濃度見表3。

3 討論

菊酯類農(nóng)藥是一類人工合成與天然除蟲菊素的化學(xué)結(jié)構(gòu)相似的殺蟲藥，菊酯類農(nóng)藥和有機磷農(nóng)藥一樣，對魚類仍屬于高效高毒，而且作用迅速，致死率高，對漁業(yè)生產(chǎn)造成很大危害。該研究中氰戊菊酯對似鯰高原鰍96 h的LC50值為0.131 mg/L，遠超鯉魚的48 h LC50為0.005 mg/L[14]，以及斑馬魚96 h LC50為0.9×10-4mg/L[15]。由此可見，似鯰高原鰍對氰戊菊酯反應(yīng)遠沒有其他魚類敏感，安全濃度也遠高于這兩種魚。其中斑馬魚平均體長為2.8 cm，比本實驗選用似鯰高原鰍（平均體長5.78 cm）的規(guī)格小，因此可能有斑馬魚魚苗較小的關(guān)系，使得斑馬魚比似鯰高原鰍敏感。生產(chǎn)上可以考慮使用氰戊菊酯對似鯰高原鰍進行殺蟲，但由于其氣味大，也要根據(jù)實際情況使用。

表3 5種藥物對似鯰高原鰍的半致死濃度與安全濃度

有關(guān)硫酸銅對魚類的急性毒性研究國內(nèi)已有許多報道，長薄鰍的安全濃度為0.005 mg/L[16]，梭鱸魚的安全濃度為0.481 mg/L[17]，唐魚的安全濃度0.061 mg/L[18]?？赡懿煌聂~類具有不同的生理特性，對硫酸銅敏感度都不相同。硫酸銅常用來毒殺魚體上的寄生的原生動物、水體中大量藻類等，常用濃度為0.5～0.8 mg/L，通常的使用濃度遠高于似鯰高原鰍的安全濃度0.142 mg/L。因此，在似鯰高原鰍魚苗階段注意使用，盡量減少或避免使用硫酸銅，以免造成重金屬中毒而大量死亡。

高錳酸鉀是一種強氧化劑，遇有機物即放出氧，從而起到殺菌、殺蟲、解毒作用。生產(chǎn)上常用于防治魚、蝦等細菌、真菌和寄生蟲類疾病和設(shè)施、工具的消毒，漁業(yè)生產(chǎn)常用劑量為2～5 mg/L[19]，而高錳酸鉀對似鯰高原鰍的安全濃度為0.31 mg/L，低于常用藥浴和遍灑濃度[20]，高于虹鱒的0.217 mg/L[21]，低于金魚的0.80 mg/L[22]和黃顙魚的1.11 mg/L[23]。由此可見，似鯰高原鰍對高錳酸鉀比較敏感，特別是在堿性和微酸性條件下，高錳酸鉀易產(chǎn)生二氧化錳沉淀，對水生動物的鰓組織有較高的損壞作用，使用時應(yīng)該根據(jù)實際情況調(diào)整使用。

聚維酮碘可用于養(yǎng)殖水體，養(yǎng)殖器具的消毒，也可用于治療弧菌、嗜水氣單胞菌、愛德華氏菌等細菌引起出血、爛鰓、癤瘡、腐皮等細菌性疾病。似鯰高原鰍的96 h半致死濃度11.1 mg/L與藍點笛鯛幼魚48 h的半致死濃度12.98 mg/L[24]和斑馬魚96 h半致死濃度17.63 mg/L[25]相差不多，與異育銀鯽的96 h LC50為74.77 mg/L[25]相比敏感許多。不同的魚對聚維酮碘的耐受力不同，可能由于似鯰高原鰍是冷水型魚，實驗水溫也偏低的原因，影響聚維酮碘的藥效。

甲醛是一種有刺激性臭味的化學(xué)制劑，在氣態(tài)或液態(tài)下，均呈現(xiàn)強大的殺菌作用。甲醛能溶解類脂，能與蛋白質(zhì)的氨基結(jié)合而使蛋白質(zhì)凝固變性，具有較強的廣譜殺菌和殺蟲功能，在水產(chǎn)養(yǎng)殖中有其獨特的作用[26]，因此廣泛應(yīng)用于水產(chǎn)動物疾病防治[27]。由本實驗結(jié)果顯示，甲醛對似鯰高原鰍的安全濃度6.97 mg/L，參照其他魚類的甲醛毒性實驗[18，28]，如甲醛對孔雀魚的96 h安全濃度8.33 mg/L，月光魚的96 h安全濃度6.74 mg/L。甲醛相對其他水產(chǎn)藥品毒性較低，在生產(chǎn)上作為遍灑藥物時，用藥量大，經(jīng)濟上不合算，因此一般情況下不作為全塘潑灑，而只作為浸洗藥物。

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Acute toxicity of five commonly-used aquatic drugs to Triplopysa siluroides fry

He Kuo1，Yang Song1，Tang Juping2，Zhao Liulan1，Wu Hao1，Wu Yingbing2
(1.College of Animal Science and Technology，Sichuan Agricultural University，Chengdu 611130，China；2.Breed farm of mountain loach，E'mei shan 614224，China）

In this paper，the experiment was conducted to investigate the acute toxicity effect of five aquatic drugs to Triplopysa siluroides fry under their suitable water temperature indoor.The results showed that the 24 hhalf lethal concentrations（24 h LC50）of the five medicaments were:0.183，0.261，3.69，16.3，77.4 mg/L；and 48 h LC50were 0.143，1.87，3.33，13.2，75.4 mg/L;while 96 h LC50were 0.13，1.42，3.1，11.1，69.7 mg/L respectively.The safe concentrations（SC）were 0.013，0.0142，0.31，1.11 and 6.97 mg/L for experiment fry，respectively.Through analysis and comparison，the toxicities of five medicaments were in order of phenvalerate> CuSO4>KMnO4>povidone-iodone>formaldehyde.At the same time the results indicated that povidone-iodone and formaldehyde were low toxicity to Triplopysa siluroides，while phenvalerate，CuSO4and KMnO4were high toxicity.So it is a good suggestion that povidone iodone and formaldehyde could be recommended to use for disease control，while phenvalerate，CuSO4and KMnO4should be used carefully because of their high toxicities. Lastly，the acute toxicity effect of five drugs on Triplopysa siluroides were also analyzed and discussed in this paper.

Triplopysa siluroides；half lethal concentration；acute toxicity；safe concentration

10.3969/j.issn.1004-2091.2016.10.004

Q176

A

1004-2091（2016）10-0017-06

2016-03-14）

四川省科技廳“十三五”水產(chǎn)育種攻關(guān)子項目

何闊（1994-），男，主要從事魚類健康養(yǎng)殖研究.E-mail:897285204@qq.com

楊淞（1979-），男，副教授.E-mail:ysys210@hotmail.com