張 波，董建明，李 雯，羅洪英，畢 丹

(1.宜賓市第三人民醫(yī)院藥劑科，宜賓 644000；2.宜賓市第一人民醫(yī)院藥劑科，宜賓 644000)

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肺炎克雷伯菌和大腸埃希菌的分布與耐藥性監(jiān)測(cè)

張 波1，董建明1，李 雯2，羅洪英1，畢 丹1

(1.宜賓市第三人民醫(yī)院藥劑科，宜賓 644000；2.宜賓市第一人民醫(yī)院藥劑科，宜賓 644000)

目的 了解我院肺炎克雷伯菌與大腸埃希菌在不同臨床標(biāo)本中的分布及耐藥特點(diǎn)。方法 采用K-B法藥敏進(jìn)行藥敏試驗(yàn)并應(yīng)用WHONET 5.4軟件和SPSS 17.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果 醫(yī)院產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌總檢出率分別為30.9%和22.7%，且對(duì)絕大多數(shù)抗菌藥物的耐藥率高于30%；產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌在不同標(biāo)本間對(duì)同一抗菌藥物的耐藥率有顯著差別。結(jié)論 肺炎克雷伯菌和大腸埃希菌在各類(lèi)臨床標(biāo)本中的檢出率和耐藥率有差異，及時(shí)了解其耐藥特點(diǎn)對(duì)合理應(yīng)用抗菌藥物十分重要。

肺炎克雷伯菌；大腸埃希菌；ESBLs；耐藥性；分布

A.stract:Objective To investigate the distribution of different clinical specimens and the surveillance of drug resistance inK.pneumoniaeandE.coli.Methods Kirby-Bauer method was adopted for antibiotic sensitivity test.Data was analyzed by WHONET 5.4 software and SPSS 17.0.Results The detection rates of ESBLs producingE.coliandK.pneumoniaewere 30.9% and 22.7%，respectively，and the resistant rate was higher than 30% for the vast majority of antimicrobial drugs.There was significant different of resistant rate of the same ESBLs producingK.pneumoniaeandE.colifor the same antimicrobial drug among the different clinical specimens.ConclusionK.pneumoniaeandE.colidistributed in various clinical specimens in different proportion，timely investigate their resistance characteristics in different clinical specimens is very important for rational application of antimicrobial agents.

大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌是臨床常見(jiàn)的分離菌，也是導(dǎo)致患者發(fā)病和死亡的重要病原菌。產(chǎn)ESBLs是大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌對(duì)β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗菌藥物耐藥的主要機(jī)制之一[1]。本文主要報(bào)道大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌在不同臨床分離標(biāo)本中的分布、產(chǎn)ESBLs菌株檢出率及細(xì)菌耐藥性分析，為臨床合理使用抗菌藥物、有效預(yù)防感染和控制醫(yī)院感染提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 臨床標(biāo)本和菌株 標(biāo)本、菌株：我院2010～2014年檢驗(yàn)科藥敏實(shí)驗(yàn)室分離的臨床標(biāo)本(剔除同一患者同部位重復(fù)分離菌株)，包括尿液、痰液、血液以及鼻咽拭子等。質(zhì)控菌株：大腸埃希菌ATCC25922和肺炎克雷伯菌ATCC70063。

1.2 分離鑒定方法 標(biāo)本接種、培養(yǎng)菌株、分離鑒定嚴(yán)格按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》進(jìn)行；產(chǎn)ESBLs鑒定包括初篩試驗(yàn)和確認(rèn)試驗(yàn)，嚴(yán)格按照《產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶細(xì)菌感染防治專(zhuān)家共識(shí)》[2]規(guī)定進(jìn)行。1.3 藥敏試驗(yàn) 采用臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(CLSI)推薦的K-B藥敏法，藥敏結(jié)果判讀按照其制定的2012年確定的標(biāo)準(zhǔn)判斷。

1.4 統(tǒng)計(jì)處理 采用WHONET 5.4軟件統(tǒng)計(jì)分析、匯總，并應(yīng)用 SPSS 17.0軟件處理數(shù)據(jù)。

2 結(jié)果

2.1 細(xì)菌檢出情況 2010～2014年送檢樣本共檢出大腸埃希菌792例，肺炎克雷伯菌232例，其中尿液、痰液、血液和鼻咽拭子檢出大腸埃希菌為745例，肺炎克雷伯菌為211例；產(chǎn)ESBLs的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌分別為230例和48例。

2.2 ESBLs的檢出率 不同臨床標(biāo)本中大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌ESBLs的檢出率不同，同一標(biāo)本中的2種細(xì)菌ESBLs的檢出率也有區(qū)別，具體情況見(jiàn)表1。

表1 4類(lèi)主要標(biāo)本中大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌ESBLs的檢出情況

Tab.1 The detection of ESBLs ofK.pneumoniaeandE.coliin four types of main specimens

送檢樣本大腸埃希菌標(biāo)本/株檢出產(chǎn)ESBLs/株肺炎克雷伯菌標(biāo)本/株檢出產(chǎn)ESBLs/株尿液333112263痰液2488511635血液9218142咽拭子7215558合計(jì)74523021148

2.3 耐藥率

2.3.1 大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌對(duì)抗菌藥物的耐藥率 不產(chǎn)ESBLs的大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌對(duì)絕大多數(shù)抗菌藥物的耐藥率低于30%；產(chǎn)ESBLs的大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌對(duì)青霉素類(lèi)、頭孢菌素類(lèi)及其他類(lèi)抗菌藥物的耐藥率有差異，具體耐藥率見(jiàn)表2～4。

表2 大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌對(duì)青霉素類(lèi)抗菌藥物的耐藥率及敏感率

Tab.2 The resistance and sensitive rate ofK.pneumoniaeandE.colifor penicillins(%)

青霉素類(lèi)大腸埃希菌不產(chǎn)ESBLs敏感率耐藥率產(chǎn)ESBLs敏感率耐藥率肺炎克雷伯菌不產(chǎn)ESBLs敏感率耐藥率產(chǎn)ESBLs敏感率耐藥率替卡西林/棒酸90.66.24.493.787.710.39.490.6替卡西林47.652.40.399.760.433.60.999.1阿莫西林/棒酸92.24.737.160.391.18.931.866.2阿莫西林55.342.61.298.870.021.80.999.1哌拉西林/他唑巴坦97.20.170.924.697.82.229.967.3哌拉西林61.127.90.0100.080.118.50.0100.0合計(jì)80.716.423.874.682.213.615.982.3

表3 大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌對(duì)頭孢菌素類(lèi)抗菌藥物的耐藥率及敏感率

Tab.3 The resistance and sensitive rate ofK.pneumoniaandE.colifor cephalosporins(%)

頭孢菌素類(lèi)大腸埃希菌不產(chǎn)ESBLs敏感率耐藥率產(chǎn)ESBLs敏感率耐藥率肺炎克雷伯菌不產(chǎn)ESBLs敏感率耐藥率產(chǎn)ESBLs敏感率耐藥率頭孢噻吩88.111.67.992.180.913.80.0100.0頭孢呋辛88.510.16.893.285.912.18.191.9頭孢噻肟90.89.22.497.682.017.50.899.2頭孢他啶92.43.663.936.196.93.134.262.8頭孢吡肟90.91.740.853.998.91.144.955.1頭孢西丁95.62.958.841.290.57.764.134.6合計(jì)90.76.828.970.191.17.220.377.2

表4 大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌對(duì)其他類(lèi)抗菌藥物的耐藥率及敏感率

Tab.4 The resistance and sensitive rate ofK.pneumoniaandE.colifor other antimicrobials(%)

其他類(lèi)大腸埃希菌不產(chǎn)ESBLs敏感率耐藥率產(chǎn)ESBLs敏感率耐藥率肺炎克雷伯菌不產(chǎn)ESBLs敏感率耐藥率產(chǎn)ESBLs敏感率耐藥率阿米卡星99.40.688.610.397.52.580.519.5慶大霉素87.212.834.364.380.816.940.158.7奈替米星90.18.940.155.288.710.348.850.6妥布霉素91.88.235.162.185.513.631.266.8環(huán)丙沙星64.333.68.891.282.517.511.488.6復(fù)方新諾明70.528.317.882.275.622.315.684.4亞胺培南100.00.099.10.09100.00.099.90.01美羅培南100.00.0100.00.0100.00.0100.00.0合計(jì)87.510.343.254.486.811.352.145.9

2.3.2 不同標(biāo)本中大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌對(duì)抗菌藥物的耐藥率 不同標(biāo)本分布的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對(duì)同類(lèi)抗菌藥物的耐藥率不同，具體見(jiàn)表5～6。

表5 各類(lèi)標(biāo)本中大腸埃希菌對(duì)抗菌藥物的耐藥率和敏感率

Tab.5 The resistance and sensitive rate ofE.colifor antimicrobial among different specimens(%)

抗菌藥物血液產(chǎn)ESBLs耐藥率不產(chǎn)ESBLs耐藥率尿液產(chǎn)ESBLs耐藥率不產(chǎn)ESBLs耐藥率痰液產(chǎn)ESBLs耐藥率不產(chǎn)ESBLs耐藥率*P1**P2***P3青霉素類(lèi)80.614.872.919.771.812.6<0.05<0.05>0.05頭孢菌素類(lèi)76.98.770.76.970.16.2<0.05<0.05>0.05其他類(lèi)59.919.252.310.653.714.3<0.01<0.05>0.05

注：*P1血液中的 ESBLs(+)耐藥率與尿液中的 ESBLs(+)耐藥率比較；**P2血液中的 ESBLs(+)耐藥率與痰液中的 ESBLs(+)耐藥率比較；***P3尿液中的 ESBLs(+)耐藥率與痰液中的 ESBLs(+)耐藥率比較。

表6 各類(lèi)標(biāo)本中肺炎克雷伯菌對(duì)抗菌藥物的敏感率和耐藥率

Tab.6 The resistance and sensitive rate ofK.pneumoniaefor antimicrobial among different specimens(%)

抗菌藥物血液產(chǎn)ESBLs耐藥率不產(chǎn)ESBLs耐藥率尿液產(chǎn)ESBLs耐藥率不產(chǎn)ESBLs耐藥率痰液產(chǎn)ESBLs耐藥率不產(chǎn)ESBLs耐藥率*P1**P2***P3青霉素類(lèi)81.211.583.914.784.210.3>0.05<0.05>0.05頭孢菌素類(lèi)94.910.790.78.989.89.3<0.05<0.05>0.05其他類(lèi)79.99.273.113.271.911.1<0.05<0.05>0.05

注：*P1血液中的 ESBLs(+)耐藥率與尿液中的 ESBLs(+)耐藥率比較；**P2血液中的 ESBLs(+)耐藥率與痰液中的 ESBLs(+)耐藥率比較；***P3尿液中的 ESBLs(+)耐藥率與痰液中的 ESBLs(+)耐藥率比較。

3 討論

3.1 大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌檢出情況 我院2010～2014年5年間，產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌的檢出率不斷上升，這可能與我院抗菌藥物的使用頻度較高有關(guān)。臨床分離標(biāo)本中產(chǎn)ESBLs菌株的檢出率各有差異，產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌的檢出率以尿液和痰液標(biāo)本較高，產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌的檢出率以痰液標(biāo)本為高。從產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌對(duì)頭孢他啶與頭孢噻肟的耐藥率可推斷其菌株以CTX-M為主[3]，這為臨床醫(yī)師更精確針對(duì)耐藥機(jī)制選擇抗菌藥物提供了依據(jù)。

3.2 大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌對(duì)抗菌藥物的總耐藥情況 非產(chǎn)ESBLs菌株對(duì)青霉素類(lèi)、頭孢菌素類(lèi)及其他類(lèi)抗菌藥物的耐藥率低于20%，產(chǎn)ESBLs菌株對(duì)青霉素類(lèi)、頭孢菌素類(lèi)的耐藥率較高，達(dá)70.0%以上，可能是由于長(zhǎng)期大量使用第二、三代頭孢菌素類(lèi)藥物所致，使產(chǎn)酶株通過(guò)DNA轉(zhuǎn)移酶變異和外膜蛋白通透性降低而對(duì)此類(lèi)抗菌藥物耐藥，也可能是產(chǎn)酶菌株攜帶有針對(duì)此類(lèi)抗菌藥物的耐藥基因檢出于相同標(biāo)本[4-6]，應(yīng)當(dāng)引起臨床重視。產(chǎn)ESBLs的肺炎克雷伯菌和大腸埃希菌對(duì)碳青霉烯類(lèi)耐藥率低，提示碳青霉烯類(lèi)仍然是抗產(chǎn)ESBLs細(xì)菌最有效的藥物；對(duì)阿米卡星的耐藥率均小于20%，提示該藥對(duì)產(chǎn)ESBLs細(xì)菌具有良好的抗菌作用，臨床醫(yī)生可按藥敏試驗(yàn)結(jié)果合理選擇抗菌藥物。

3.3 不同標(biāo)本中大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌對(duì)抗菌藥物的耐藥情況 不同標(biāo)本分離的不產(chǎn)ESBLs的大腸埃希菌或肺炎克雷伯菌對(duì)不同類(lèi)抗菌藥物的耐藥率無(wú)明顯差別，血液與尿液分離的產(chǎn)ESBLs的大腸埃希菌對(duì)不同類(lèi)抗菌藥物的耐藥率有差別(P<0.05)，血液與尿液分離的產(chǎn)ESBLs的肺炎克雷伯菌對(duì)不同類(lèi)抗菌藥物的耐藥率無(wú)差別，血液與痰液分離的產(chǎn)ESBLs的大腸埃希菌或肺炎克雷伯菌對(duì)不同類(lèi)抗菌藥物的耐藥率也有差別(P<0.05)，尿液與痰液分離的產(chǎn)ESBLs的大腸埃希菌或肺炎克雷伯菌對(duì)不同類(lèi)抗菌藥物的耐藥率無(wú)明顯差別，可以為臨床醫(yī)師的經(jīng)驗(yàn)性用藥提供理論依據(jù)。

總的來(lái)說(shuō)，ESBLs菌株的出現(xiàn)給臨床抗菌治療帶來(lái)了很大的困難，為防止多重耐藥、泛耐藥和產(chǎn)ESBLs菌株感染的出現(xiàn)和爆發(fā)流行，應(yīng)廣泛開(kāi)展多重耐藥、泛耐藥和產(chǎn)ESBLs菌株感染的前瞻性監(jiān)測(cè)[7]。醫(yī)務(wù)人員應(yīng)該認(rèn)真對(duì)待醫(yī)院細(xì)菌分布和耐藥的情況，綜合患者病情，合理使用抗菌藥物，這樣可有效預(yù)防和控制感染爆發(fā)流行，對(duì)提高醫(yī)療質(zhì)量有重要意義。

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The distribution and resistanece detection of K.pneumoniae and E.coli

ZHANG Bo1，DONG Jianming1，LI Wen2，LUO Hongying1，BI Dan1

(1.The Third People′s Hospital of Yibin， Yibin 644000，China； 2.The First People′s Hospital of Yibin，Yibin 644000，China)

K.pneumoniae；E.coli；ESBLs；drug resistance；distribution

10.3969/j.issn.1004-2407.2016.06.027

R969.3

A

1004-2407(2016)06-0640-04

2016-02-03)