李新安+李廣領(lǐng)+謝蘭芬+谷珊山+晁雪庭+陳錫嶺
摘要:為探討長殘效除草劑咪唑乙煙酸在土壤中的殘留對(duì)后茬作物生理指標(biāo)的影響,采用大田試驗(yàn),以后茬作物小麥為研究對(duì)象,測定了不同土壤殘留濃度下小麥的株高、葉綠素、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)和過氧化物酶(POD)活性的變化。研究結(jié)果表明,不同咪唑乙煙酸田間濃度的殘留對(duì)小麥的生長均有脅迫作用,且隨著殘留量增加,脅迫逐漸明顯,表現(xiàn)為對(duì)株高有抑制作用;葉片中抗氧化酶發(fā)生變化,其中SOD、CAT活性降低,POD活性升高;同時(shí)降低葉片中葉綠素的含量,增加MDA的含量。說明咪唑乙煙酸的土壤殘留會(huì)對(duì)后茬作物小麥產(chǎn)生嚴(yán)重的影響,生產(chǎn)中應(yīng)注意嚴(yán)格控制咪唑乙煙酸的使用量和安全間隔期。
關(guān)鍵詞:咪唑乙煙酸;土壤殘留;小麥;生理指標(biāo)
中圖分類號(hào): TQ450.2 文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A
文章編號(hào):1002-1302(2016)09-0492-03
咪唑乙煙酸(imazethapyr)是1984年由美國氰胺公司研發(fā)的一種咪唑啉酮類除草劑,為內(nèi)吸傳導(dǎo)型選擇性芽前及早期苗后除草劑[1]。其作用機(jī)制是通過抑制乙酰乳酸合成酶(ALS)的活性,導(dǎo)致蛋白質(zhì)合成的混亂,從而干擾雜草體內(nèi)DNA的合成和細(xì)胞的生長,從而殺死植物[2]。咪唑乙煙酸廣泛應(yīng)用于花生、大豆等其他豆科植物[3]。此類除草劑在土壤中殘留時(shí)間長,易對(duì)后茬作物產(chǎn)生藥害[4]。在我國種植花生的區(qū)域多采用花生—小麥的種植模式,花生田除草劑的殘留積累,將會(huì)影響到后茬作物小麥的生長,對(duì)我國糧食安全產(chǎn)生造成巨大的影響。
目前,有關(guān)咪唑乙煙酸除草劑殘留對(duì)后茬作物影響的研究,多集中在土壤中的殘留動(dòng)態(tài)[5]、殘留危害劑量[6]、生物測定評(píng)價(jià)方法[7-8]以及對(duì)后茬作物危害[9-10]、安全性[11-14]等方面。蘇旺蒼等報(bào)道了甲咪唑煙酸在土壤中的殘留對(duì)后茬小麥幼苗生長和光合作用的影響[15],但咪唑乙煙酸土壤殘留對(duì)后茬作物小麥的安全性,特別是對(duì)其生理指標(biāo)的影響尚未見報(bào)道。本研究采用大田試驗(yàn),以小麥為研究對(duì)象,測定了不同咪唑乙煙酸土壤殘留濃度下小麥的株高、葉綠素、丙二醛(MDA)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)和過氧化物酶(POD)活性的變化,以期為咪唑乙煙酸田間殘留對(duì)后茬農(nóng)作物的影響提供理論依據(jù)。
1 材料與方法
1.1 藥品、試劑和儀器
咪唑乙煙酸標(biāo)準(zhǔn)樣品(99.7%)由中國計(jì)量科學(xué)研究院提供;50 g/L咪唑乙煙酸水劑由德國巴斯夫公司生產(chǎn);供試小麥品種為百農(nóng)矮抗58;L-蛋氨酸、氮藍(lán)四唑(NBT)、EDTA-Na2、核黃素、30% H2O2、Tris-HCl、三氯醋酸(TCA)、硫代巴比妥酸(TBA)、丙酮、愈創(chuàng)木酚、蔗糖、濃硫酸、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、冰乙酸、氯化鈉和色譜級(jí)乙腈、甲醇。
Agilent-1260型HPLC,美國Agilent公司;TDL-5000B型大容量冷凍離心機(jī),上海安亭科技儀器廠;TG16型高速離心機(jī),長沙英泰儀器有限責(zé)任公司;KH19小型醫(yī)用離心機(jī),湖南凱達(dá)科技有限公司;UV-2601型紫外分光光度計(jì),北京北分瑞利分析儀器有限責(zé)任公司。
1.2 田間藥劑處理
試驗(yàn)地選擇在河南省新鄉(xiāng)市古固寨鎮(zhèn)河南科技學(xué)院試驗(yàn)田,土壤類型為潮土,前茬無咪唑乙煙酸殘留。土壤基本理化指標(biāo)為有機(jī)質(zhì)9.63 g/kg、全氮0.99 g/kg、全鉀13.58 g/kg、全磷1.58 g/kg,pH值為8.17。
根據(jù)咪唑乙煙酸田間推薦使用劑量高劑量100 g/hm2,設(shè)置6個(gè)處理組,分別為田間推薦高劑量的0.5、1、2、4、8、16倍。田間小區(qū)劃分見圖1,每個(gè)小區(qū)20 m2,各小區(qū)之間設(shè)1 m隔離帶,按照小區(qū)所示劑量噴施藥劑,噴藥后第2天種植后茬作物小麥。播種后定期進(jìn)行樣品采集,然后測定土壤中除草劑殘留量和小麥生理指標(biāo)。
1.3 咪唑乙煙酸的田間殘留測定
土壤中咪唑乙煙酸的殘留測定參照李廣領(lǐng)等的方法[16]。
1.4 各項(xiàng)生理指標(biāo)的測定
株高采用測量法測定;葉片中SOD活性測定采用氮藍(lán)四唑(NBT)光還原法[17];CAT活性測定采用紫外吸收法[17];POD活性測定采用愈創(chuàng)木酚法[18];MDA含量測定采用硫代巴比妥酸法[17];葉綠素含量測定采用丙酮提取法[19]。
2 結(jié)果與分析
2.1 土壤中咪唑乙煙酸殘留量
咪唑乙煙酸推薦高劑量的0.5、1、2、4、8、16倍在田間原始沉積量分別為0.126 8、0.201 1、0.317 4、0.581 0、1.256 9、1.854 4 mg/kg。其降解動(dòng)態(tài)曲線見圖2,后茬作物處理52 d后,測定咪唑乙煙酸在土壤中的殘留量分別為0.086 3、0.111 1、0.114 2、0.156 3、0.168 1、0.235 4 mg/kg,降解率分別為31.93%、44.77%、64.02%、73.10%、86.63%、87.31%。結(jié)果表明咪唑乙煙酸田間殘留量隨著時(shí)間的推移而不斷降解,高倍劑量的降解速率大于低倍劑量;處理52 d后,本試驗(yàn)中的最低(0.5倍)施用推薦高劑量的田間殘留降解率為31.93%,仍未達(dá)到50%,這說明咪唑乙煙酸在土壤中屬于難降解農(nóng)藥。
2.2 對(duì)小麥株高的影響
從圖3可以看出,不同劑量的咪唑乙煙酸田間殘留對(duì)小麥株高有一定的抑制作用。小麥播種10 d后,處理組株高均低于對(duì)照水平,且隨著施藥劑量倍數(shù)的增加抑制作用逐漸明顯;處理38 d后,施用推薦高劑量的8倍對(duì)小麥株高的抑制率為33.36%;處理52 d后,施用推薦高劑量的4、8、16倍對(duì)小麥株高的抑制率分別為1.13%、11.02%和20.76%。
2.3 對(duì)小麥葉片中葉綠素含量的影響
咪唑乙煙酸殘留藥害導(dǎo)致小麥葉片中葉綠素含量發(fā)生變化(圖4)。小麥播種10 d后,葉綠素含量低于對(duì)照水平,并隨著施藥劑量倍數(shù)增加葉綠素含量逐漸減少。施用推薦高劑量的16倍處理小麥52 d后,處理組葉綠素含量減少37.98%。
2.4 對(duì)小麥葉片抗氧化酶活性的影響
從圖5、圖6、圖7可以看出,不同濃度的咪唑乙煙酸田間殘留使小麥葉片中抗氧化酶發(fā)生變化。處理10 d后,處理組SOD、CAT活性均低于對(duì)照水平,POD活性高于對(duì)照水平,且隨著時(shí)間的延長與施藥劑量的增加逐漸明顯;施用推薦高劑量的8倍處理38 d后,SOD活性降低了13.11%;施用推薦高劑量的4倍對(duì)小麥處理24 d后,CAT活性降低了30.51%;施用推薦高劑量的8倍處理小麥52 d后,其POD活性升高了40.01%。
2.5 對(duì)小麥葉片中MDA含量的影響
咪唑乙煙酸殘留藥害導(dǎo)致小麥葉片中MDA含量發(fā)生變化,均高于對(duì)照水平(圖8)。處理10 d后,與對(duì)照相比MDA含量明顯增加;38 d后,施用推薦高劑量的0.5、1、2倍與對(duì)照組相比MDA含量增加了186.34%、194.41%和177.02%。
3 結(jié)論
長殘效除草劑的過量使用,給作物帶來了不適宜的生長環(huán)境[20-21],許多研究表明,在逆境脅迫下, 植物體內(nèi)超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化物酶(POD)、過氧化氫酶(CAT)等保護(hù)酶活性和丙二醛(MDA)、葉綠素含量會(huì)發(fā)生相應(yīng)變化,這些變化量目前已作為評(píng)價(jià)逆境傷害程度和植物適應(yīng)性的指標(biāo)而被廣泛應(yīng)用[22-25]。本研究結(jié)論得出,長殘效除草劑咪唑乙煙酸田間殘留對(duì)后茬作物小麥的生長均有脅迫作用,且隨著殘留量增加,脅迫作用逐漸明顯,表現(xiàn)為對(duì)株高有抑制作用;使葉片中抗氧化酶發(fā)生變化,其中SOD、CAT活性降低,POD活性升高;同時(shí)降低葉片中葉綠素含量,增加MDA的含量。以上結(jié)果說明,長殘效除草劑咪唑乙煙酸的土壤殘留會(huì)對(duì)后茬作物小麥的安全生產(chǎn)造成嚴(yán)重的影響,生產(chǎn)中應(yīng)注意嚴(yán)格控制咪唑乙煙酸使用量和安全間隔期。
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