ET、PCT和CRP在鑒別診斷細(xì)菌性肺炎中的作用

張 瑾，夏秋風(fēng)，段秀杰，肖大平△，邵 潔

(1.解放軍第三五九醫(yī)院檢驗(yàn)病理科，江蘇鎮(zhèn)江 212001；2.江蘇大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇鎮(zhèn)江 212001)

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·論 著·

ET、PCT和CRP在鑒別診斷細(xì)菌性肺炎中的作用

張 瑾1，夏秋風(fēng)2，段秀杰2，肖大平1△，邵 潔1

(1.解放軍第三五九醫(yī)院檢驗(yàn)病理科，江蘇鎮(zhèn)江 212001；2.江蘇大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇鎮(zhèn)江 212001)

目的 探討內(nèi)毒素(ET)、降鈣素原(PCT)和C-反應(yīng)蛋白(CRP)在鑒別診斷革蘭陰性桿菌和革蘭陽(yáng)性球菌感染肺炎中的價(jià)值。方法 將肺炎患者根據(jù)肺部感染的病原體分為革蘭陰性桿菌感染組(49例)和革蘭陽(yáng)性球菌感染組(46例)，并設(shè)對(duì)照組(40例)，檢測(cè)3組ET、PCT 和CRP值，將3組數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)比較，并分析3個(gè)指標(biāo)的相關(guān)性。結(jié)果 革蘭陰性桿菌感染組的ET水平和陽(yáng)性率最高，其次分別為革蘭陽(yáng)性球菌感染組和對(duì)照組，3組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。3組PCT水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，革蘭陰性桿菌感染組的陽(yáng)性率與革蘭陽(yáng)性球菌感染組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，2組均大于對(duì)照組；革蘭陰性桿菌感染組的CRP水平和陽(yáng)性率與革蘭陽(yáng)性球菌感染組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，2組均大于對(duì)照組。ET和PCT、CRP均無相關(guān)關(guān)系(P>0.05)，PCT和CRP呈正相關(guān)關(guān)系(P<0.05)。結(jié)論 革蘭陰性桿菌和革蘭陽(yáng)性球菌分別感染患者時(shí)，肺炎患者體內(nèi)的PCT和CRP的表達(dá)差異不大，但革蘭陰性桿菌感染患者體內(nèi)的ET水平更高。ET比PCT和CRP在鑒別診斷革蘭陰性桿菌感染性肺炎時(shí)有更高的特異性。

內(nèi)毒素； 降鈣素原； C-反應(yīng)蛋白； 細(xì)菌感染性肺炎

肺炎多數(shù)是由革蘭陰性桿菌和(或)革蘭陽(yáng)性球菌引起。對(duì)于機(jī)體免疫反應(yīng)低下、合并多種基礎(chǔ)疾病的患者，其病死率及并發(fā)癥發(fā)生率較高，因此早期抗感染治療非常關(guān)鍵。臨床上常用輔助診斷細(xì)菌性肺炎的手段[包括血/痰細(xì)菌培養(yǎng)、外周血中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)及血清C-反應(yīng)蛋白(CRP)檢測(cè)等]存在特異性和敏感性低、耗時(shí)長(zhǎng)等缺點(diǎn)，往往會(huì)延誤臨床治療，或誤導(dǎo)臨床醫(yī)師對(duì)患者使用不必要的抗菌藥物治療。因此，對(duì)于細(xì)菌性肺炎的診斷有必要尋求新的高敏感性和特異性檢測(cè)指標(biāo)。目前，細(xì)菌性感染特異性檢測(cè)指標(biāo)包括降鈣素原(PCT)和內(nèi)毒素(ET)，非特異性指標(biāo)包括CRP和白細(xì)胞介素(IL)-6等。

ET主要成分為脂多糖(LPS)，后者為革蘭陰性桿菌的細(xì)胞壁成分。PCT在健康人體內(nèi)水平極低(小于0.1 ng/mL)，當(dāng)出現(xiàn)嚴(yán)重的細(xì)菌、真菌或寄生蟲感染時(shí)，血清PCT水平可顯著升高，且其水平與炎性反應(yīng)的嚴(yán)重程度有正相關(guān)關(guān)系，而在非感染性炎性反應(yīng)、病毒感染或輕微細(xì)菌局灶性感染時(shí)，PCT水平正?；蜉p度升高[1]。有研究指出，LPS能在短時(shí)間內(nèi)誘導(dǎo)大量PCT生成，提示LPS可能直接促進(jìn)PCT mRNA的表達(dá)和蛋白翻譯[2]。Charles等[3]研究證明，革蘭陰性桿菌感染患者的PCT比革蘭陽(yáng)性球菌感染患者水平高，進(jìn)一步說明革蘭陰性桿菌釋放ET是促進(jìn)PCT大量表達(dá)的主要因素。CRP對(duì)細(xì)菌感染缺乏特異性，除細(xì)菌感染外，病毒感染、急性排異反應(yīng)及手術(shù)等均可引起CRP的升高。本研究通過比較革蘭陰性桿菌和革蘭陽(yáng)性球菌感染的肺炎患者體內(nèi)ET、PCT和CRP水平，分析ET、PCT和CRP的相關(guān)性，以得出ET在鑒別診斷革蘭陰性桿菌感染肺炎中的效率?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015年1月至2016年4月于解放軍第三五九醫(yī)院住院確診為肺炎的患者95例，分為2組：革蘭陰性桿菌感染組49例和革蘭陽(yáng)性球菌感染組46例。選取健康體檢人員40例作為對(duì)照組。各組研究對(duì)象年齡、性別比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性，見表1。

表1 各組一般資料和ET、 PCT、CRP水平比較

1.2 儀器與試劑 全自動(dòng)細(xì)菌鑒定及藥敏分析系統(tǒng)(型號(hào)VITEK 2 COMPACT 60)、細(xì)菌鑒定卡由法國(guó)生物梅里埃公司提供。特種蛋白分析儀(型號(hào)IMMAGE 800)和CRP檢測(cè)試劑盒由美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特公司提供。循環(huán)增強(qiáng)熒光分析儀(型號(hào)Pylon Core)和PCT檢測(cè)試劑盒由星童醫(yī)療技術(shù)(蘇州)有限公司提供。血平板和巧克力平板由上?？片敿挝⑸锛夹g(shù)有限公司提供。微生物動(dòng)態(tài)檢測(cè)系統(tǒng)(型號(hào)DL-ET32)和細(xì)菌ET測(cè)定試劑盒由珠海迪爾生物工程有限公司提供。

1.3 方法

1.3.1 標(biāo)本收集 患者組：嚴(yán)格按照無菌操作要求留取患者的痰標(biāo)本，分別接種血平板和巧克力平板，并做細(xì)菌涂片革蘭染色檢查，發(fā)現(xiàn)如僅有革蘭陽(yáng)性球菌或革蘭陰性桿菌時(shí)，于當(dāng)日空腹抽取肝素抗凝血3 mL、乙二胺四乙酸二鉀抗凝靜脈血2 mL、無抗凝靜脈血4 mL，分別用于ET、PCT和CRP水平測(cè)定。對(duì)照組：采集健康體檢人員的血液行ET、PCT和CRP水平測(cè)定。

1.3.2 細(xì)菌鑒定及藥敏試驗(yàn) 將患者入院后首次留取的痰標(biāo)本接種血平板和巧克力平板培養(yǎng)24 h，次日觀察細(xì)菌生長(zhǎng)情況，選取單個(gè)致病菌感染患者的血平板，從中挑取單個(gè)菌落轉(zhuǎn)種血平板，于次日挑取部分菌落用全自動(dòng)細(xì)菌鑒定及藥敏分析系統(tǒng)同時(shí)進(jìn)行細(xì)菌鑒定和藥敏檢測(cè)。

1.3.3 CRP檢測(cè) 采用免疫比濁法定量測(cè)定血清標(biāo)本中的CRP水平， 以CRP>10 mg/L判斷為陽(yáng)性。

1.3.4 PCT檢測(cè) 采用循環(huán)增強(qiáng)熒光免疫法(CEFA)檢測(cè)血漿標(biāo)本中的PCT水平。以PCT>0.5 ng/mL判斷為陽(yáng)性。

1.3.5 ET檢測(cè) 采用動(dòng)態(tài)濁度法檢測(cè)血漿標(biāo)本中的ET水平。以ET>0.1 U/mL判斷為革蘭陰性桿菌感染，ET在0.03～0.10 U/mL水平范圍時(shí)，患者應(yīng)視為臨床觀察期。

2 結(jié) 果

2.1 各組ET、 PCT和CRP水平比較 比較3組的ET水平和陽(yáng)性率，結(jié)果均為革蘭陰性桿菌感染組大于革蘭陽(yáng)性球菌感染組且大于對(duì)照組；3組PCT水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而陽(yáng)性率為革蘭陰性桿菌感染組約等于革蘭陽(yáng)性球菌感染組且大于對(duì)照組；3組的CRP水平和陽(yáng)性率結(jié)果均為革蘭陰性桿菌感染組約等于革蘭陽(yáng)性球菌感染組且大于對(duì)照組。見表1～2。

表2 各組ET、PCT和CRP陽(yáng)性率比較(%)

2.2 PCT、ET和CRP間相關(guān)性比較 分別對(duì)肺炎患者ET、PCT和CRP在定量和定性條件下進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果表明：ET和PCT、CRP均無相關(guān)關(guān)系(P>0.05)，PCT和CRP呈正相關(guān)關(guān)系(P<0.05)。見表3。

表3 PCT、ET和CRP間相關(guān)性比較

2.3 ET鑒別診斷革蘭陰性桿菌感染肺炎的效率 以革蘭陰性桿菌感染組為分析組，革蘭陽(yáng)性球菌感染組為比較組，做ET水平的受試者特征曲線(ROC曲線)分析,得出曲線下面積(AUC)為0.657(P=0.008)，ET為0.115 U/mL時(shí)，判斷為革蘭陰性桿菌感染肺炎的敏感性為75.5%，特異性為52.1%。見圖1。

圖1 ET水平ROC曲線分析

3 討 論

本研究比較3組ET水平和陽(yáng)性率，結(jié)果表明革蘭陰性桿菌感染組水平最高(與理論相符合)，革蘭陽(yáng)性球菌感染組較對(duì)照組高，可能因?yàn)楦锾m陽(yáng)性球菌感染的患者使用了某些廣譜抗菌藥物治療細(xì)菌感染，誘導(dǎo)了腸道菌群失調(diào)，使得條件致病菌選擇為腸道優(yōu)勢(shì)菌群，加劇腸道細(xì)菌易位，引起腸源性感染[4]，最終又誘導(dǎo)了腸源性ET血癥[5]。

本研究中3組PCT水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，革蘭陰性桿菌感染組和革蘭陽(yáng)性球菌感染組的陽(yáng)性率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，2組顯著高于對(duì)照組。由于PCT水平與炎性反應(yīng)程度呈正相關(guān)關(guān)系，某些輕微的細(xì)菌局灶性感染可使PCT的水平正?；騼H輕度升高，因此筆者認(rèn)為本研究中大部分肺炎患者可能由于炎性反應(yīng)并不重，導(dǎo)致3組的PCT水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。雖然有研究表明，LPS能在短時(shí)間內(nèi)大量誘導(dǎo)PCT產(chǎn)生，使患者體內(nèi)PCT水平快速升高[2]，但本研究中革蘭陰性桿菌感染組雖然ET水平較高，但是PCT水平并沒有較其他組增高，推斷革蘭陰性桿菌感染組的ET水平可能還不足以誘導(dǎo)患者體內(nèi)表達(dá)大量的PCT。

CRP是非特異性炎性指標(biāo)，本研究中，肺炎患者CRP水平比對(duì)照組顯著增高。CRP在診斷肺炎時(shí)比PCT和ET有更高的敏感性，但在鑒別診斷細(xì)菌性肺炎和病毒性肺炎時(shí)無特異性。此外，本研究分析得出CRP與PCT呈正相關(guān)關(guān)系，這與相關(guān)研究結(jié)果一致[6-7]，而與ET無相關(guān)關(guān)系。

綜上所述，PCT和CRP在鑒別診斷革蘭陰性桿菌和革蘭陽(yáng)性球菌感染的肺炎時(shí)并沒有特異性，而革蘭陽(yáng)性球菌感染的肺炎患者可能因?yàn)槠渚哂胁豢捎X察的腸源性ET血癥，要通過ET水平鑒別2種類型肺炎相對(duì)困難。本研究通過ROC曲線分析獲得1個(gè)可用以鑒別2種類型肺炎的ET閾值(ET=0.115 U/mL)，但特異性仍不高(僅為52.1%)。因此，臨床上在鑒別診斷革蘭陰性桿菌和革蘭陽(yáng)性球菌感染的肺炎時(shí)不能僅依靠ET水平，仍然要同時(shí)進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)鑒定。由于抗菌藥物濫用導(dǎo)致腸源性ET血癥發(fā)生，給進(jìn)一步治療帶來了困難，因此，臨床醫(yī)師在保證有效殺菌的前提下，應(yīng)盡可能選擇誘導(dǎo)ET釋放少的抗菌藥物。

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The role of endotoxin,procalcitonin and C-reactive protein in the differential diagnosis of bacterial pneumonia

ZHANGJin1,XIAQiufeng2,DUANXiujie2,XiaoDaping1△，SHAOJie1

(1.DepartmentofPathology,the359HospitalofPLA,Zhenjiang,Jiangsu212001,China;2.DepartmentofClinicalLaboratory,theAffiliatedHospitalofJiangsuUniversity,Zhenjiang,Jiangsu212001,China)

Objective To investigate the clinical value of endotoxin(ET),procalcitonin(PCT) and C-reactive protein(CRP) in the differential diagnosis of bacterial pneumonia with gram negative bacilli or gram positive cocci infection.Methods 49 and 46 pneumonia patients were enrolled in gram negative bacilli infection group and gram positive cocci infection group respectively according to the pathogens of pneumonia.40 healthy people were enrolled in the control group.The leveland positive rate of ET,PCT and CRP of the three groups were determined and compared with each other,and correlations among the three outcomes were analysed.Results The ET level and positive rate of gram negative bacilli infection group were the highest,followed by gram positive cocci infection group and the control group,the difference among the three groups was statistically significant(P<0.05).The difference of PCT level in the three groups had no statistical significance(P>0.05).The PCT positive rates of gram negative bacilli infection group and gram positive cocci infection group had no statistical significance(P>0.05),but they were significantly greater than the control group.The CRP level and positive rates of gram negative bacilli infection group and gram positive cocci infection group had no statistical significance(P>0.05),but they were greater than the control group.There was no correlation between ET and PCT or ET and CRP(P>0.05),but positive correlation between PCT and CRP(P<0.05).Conclusion There is little difference in the expression of PCT and CRP between gram negative bacilli and gram positive cocci respectively infected pneumonia patients.The ET level in gram negative bacilli infected patients is higher than that in gram positive cocci infected patients.ET is the most special outcome in the differential diagnosis of Gram negative bacilli and gram positive cocci respectively infected pneumoniaamong the three outcomes.

endotoxin; procalcitonin; C-reactive protein; bacterial pneumonia

張瑾，女，技師，主要從事臨床微生物免疫學(xué)檢驗(yàn)方面的研究?！?/p>

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.22.017

A

1673-4130(2016)22-3139-03

2016-05-11

2016-07-18)