許思遙 李 萍 姜子義 呂雯婷 樊 毅 趙 軍 徐志文 朱 玲

(四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院，成都 611130)

PEDV乳汁黏膜免疫研究進(jìn)展①

許思遙 李 萍 姜子義 呂雯婷 樊 毅 趙 軍 徐志文②朱 玲②

(四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院，成都 611130)

豬流行性腹瀉(Porcine epidemic diarrhea,PED)是一種急性、高度傳染性的豬腸道疾病，其特征是哺乳仔豬水樣腹瀉，嘔吐，脫水后死亡，特別是10日齡下仔豬，具有極高的發(fā)病率和死亡率[1,2]。該病于1971年在英國首次暴發(fā)并報道，其病毒學(xué)病因在1978年確定[3]，病原是豬流行性腹瀉病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)，PEDV是冠狀病毒科內(nèi)的α-冠狀病毒屬的成員。2010年末新一輪PEDV再次在全球流行，其間哺乳仔豬出現(xiàn)了極高的發(fā)病率(90%～100%)和死亡率(70%～100%)，新一輪PEDV造成的臨床癥狀是歷史記錄中最為嚴(yán)重的[4,5]。PEDV的感染與仔豬日齡緊密相關(guān)，低日齡仔豬的感染和發(fā)病情況更為嚴(yán)重，14日齡下仔豬感染PEDV后，其死亡率為90%，而14～28日齡仔豬的死亡率會下降至40%[6]，可見提高低日齡仔豬對PEDV的抵抗力是保護(hù)仔豬的關(guān)鍵。PEDV和豬傳染性胃腸炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus of swine,TGEV)均局限感染腸道，但基于對仔豬血清病毒RNA的檢測發(fā)現(xiàn)，它們也存在短暫的病毒血癥[7,8]。因此誘導(dǎo)腸黏膜免疫以實現(xiàn)保護(hù)腸上皮細(xì)胞是對預(yù)防這兩個疾病的重點。

然而，低日齡仔豬腸絨毛上皮細(xì)胞再生緩慢及其免疫系統(tǒng)發(fā)育不完全[9-15]，對其直接免疫PEDV疫苗無法誘導(dǎo)有效的體液免疫或腸黏膜免疫來實現(xiàn)保護(hù)。此外，實際生產(chǎn)中要實現(xiàn)對仔豬的保護(hù)，就需要新生仔豬在整個哺乳期內(nèi)黏膜免疫存在一定的保護(hù)力。因此母源抗體仍是保護(hù)仔豬預(yù)防PEDV的重要方法，母乳中種類繁多且數(shù)量巨大的免疫細(xì)胞和免疫分子為新生動物提供抵抗病原微生物的免疫保護(hù)作用[16]。母乳中的免疫球蛋白在新生動物免疫保護(hù)中發(fā)揮著不可替代的作用，尤其是初乳中IgG分布在新生動物鼻咽部和胃腸道局部黏膜，對預(yù)防腸道病原微生物作用重大[17]。初乳中擁有極高的IgG和IgM，仔豬采食初乳24～36 h后，其大部分的IgG和IgM可進(jìn)入其循環(huán)系統(tǒng)，對仔豬提供全身性保護(hù)作用[18]。同時乳汁中還含有大量的免疫細(xì)胞，如可直接殺傷、吞噬病原微生物的巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞，針對所感染的病原微生物產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞，以及在病原微生物刺激下，通過一系列反應(yīng)將病原微生物殺傷消滅在局部的T淋巴細(xì)胞，從而對仔豬提供更為持續(xù)和全面的保護(hù)[19,20]。通過疫苗免疫母豬從而誘導(dǎo)乳汁免疫，隨后通過其初乳和乳汁傳遞至新生仔豬，以實現(xiàn)對新生仔豬的早期被動保護(hù)[21,22]。

1 冠狀病毒乳汁黏膜免疫研究

針對目前新一輪PEDV的強毒力和高發(fā)性，綜合新生仔豬免疫系統(tǒng)發(fā)育不完全等因素，多數(shù)學(xué)者認(rèn)為，應(yīng)用類似TGEV的乳汁免疫，通過“腸道-乳腺-SIgA(Secretory immunoglobulin A)軸”實現(xiàn)被動免疫是作為保護(hù)仔豬抵抗PEDV的有效方式[23]。1972年對于豬“腸道-乳腺-SIgA軸”的發(fā)現(xiàn)，也成為較早TGEV乳汁免疫研究的基礎(chǔ)[23-25]。隨后對TGEV乳汁免疫的研究中，發(fā)現(xiàn)母豬在感染TGEV恢復(fù)后，對其仔豬能提供抵抗TGEV的保護(hù)作用，并且這個保護(hù)力與其乳汁中抗體水平有關(guān)，而與其血清中抗體水平無關(guān)[23,24,26]。從TGEV乳汁免疫的早期研究中還獲得了幾個關(guān)鍵的免疫學(xué)發(fā)現(xiàn)：由于母豬胎盤的不滲透性，仔豬出生時血液中缺乏γ球蛋白，僅僅依賴于初乳和乳汁實現(xiàn)機體免疫[27]，這使新生仔豬在生產(chǎn)環(huán)境中極易感染其他病原。母豬血清中滲出的IgG主要存在于初乳中，新生仔豬通過初乳中的IgG獲得首次被動免疫保護(hù)，在出生后的24～48 h內(nèi)就能通過腸道上皮細(xì)胞吸收這些IgG。2～3 d后通過乳汁的不斷攝入，SIgA成為仔豬體內(nèi)的主要抗體并在整個哺乳期持續(xù)發(fā)揮保護(hù)作用。SIgA不僅是乳汁中的主要免疫球蛋白，同樣也是黏膜表面和黏膜分泌物中最重要的免疫球蛋白，SIgA對蛋白水解酶的耐受能力使其在腸道中能維持穩(wěn)定的高水平狀態(tài)[28,29]。值得注意的是，實驗還發(fā)現(xiàn)對于接種TGEV滅活疫苗的母豬，其初乳和血清雖然存在大量的IgG抗體，但是其乳汁中SIgA含量迅速下降，幾乎不能對仔豬提供被動保護(hù)。然而天然感染或口服接種TGEV活疫苗的母豬，其乳汁中有較高的SIgA抗體水平并能有效保護(hù)仔豬預(yù)防TGEV。

2 乳汁黏膜免疫機制的研究

乳汁黏膜免疫主要是哺乳仔豬通過初乳和乳汁的攝入，不斷獲得其中的免疫球蛋白(IgG、IgM和SIgA)而實現(xiàn)，初乳中主要為IgG，乳汁中主要為SIgA[30]。腸道分泌的最主要抗體就是SIgA，它由腸漿細(xì)胞分泌的二聚IgA遷移至腸腔形成的，這個遷移通過腸上皮細(xì)胞基底外側(cè)表面的聚合免疫血球素蛋白受體實現(xiàn)的，SIgA在腸腔形成后并隨即發(fā)揮免疫保護(hù)作用。因此誘導(dǎo)妊娠母豬系統(tǒng)和黏膜免疫是乳汁免疫的基礎(chǔ)，其黏膜免疫產(chǎn)生的IgG和抗體分泌細(xì)胞(Antibody-secreting cells,ASC)/漿母細(xì)胞必須通過“腸道-乳腺-SIgA軸”遷移至乳腺，最后通過乳腺分泌物為仔豬提供被動免疫保護(hù)。對于豬的系統(tǒng)和黏膜免疫已有深入的研究，確定淋巴細(xì)胞通過在血液和淋巴組織中的不斷循環(huán)的方式，提供對病原體的免疫監(jiān)視和維持機體內(nèi)環(huán)境平衡[31,32]。B淋巴細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞在各自的淋巴組織內(nèi)經(jīng)過滾動、黏附、遷移和定位結(jié)合的過程完成從高內(nèi)皮小靜脈的滲出[33,34]。并且發(fā)現(xiàn)，外周淋巴細(xì)胞的遷移是由淋巴細(xì)胞配體α4β1與血管細(xì)胞黏附因子1(Vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1)，L-選擇素與外周淋巴結(jié)血管地址素(PNAdperipheral lymphonode vascular addressin,PNAd)，趨化因子受體(Chemokine receptor,CCR)7與趨化因子配體(Chemokine ligand,CCL)21分別的相互作用實現(xiàn)調(diào)控[35]。但是黏膜組織調(diào)節(jié)是不同的，尤其是腸道黏膜組織淋巴細(xì)胞的遷移主要由α4β7與黏膜地址素細(xì)胞黏附分子1(Mucosal addressin cell adhesion molecule-1,MAdCAM-1)的相互作用[36,37]，以及小腸內(nèi)皮細(xì)胞分泌的CCL25和CCL28分別同淋巴細(xì)胞上的CCR9和CCR10的相互結(jié)合調(diào)控的[38-40]。研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)阻斷母鼠體內(nèi)CCL28的表達(dá)時，會降低乳汁中IgA水平，使哺乳小鼠缺乏IgA的攝入[41]。并且還發(fā)現(xiàn)在CCR10缺失的小鼠模型中，IgA ASC不會在乳腺中積累[42]。雖然這些研究并未在豬體內(nèi)驗證，但是實驗發(fā)現(xiàn)CCL28在哺乳期內(nèi)母鼠和母豬的乳腺中表達(dá)最高，在母豬乳汁中還檢測到CCL28蛋白[43,44]，并且觀察到哺乳期內(nèi)乳腺中CCL28的增加量和IgA B淋巴細(xì)胞的增加數(shù)量一致[45,46]，同時分娩和哺乳早期的母豬乳腺中，MAdCAM-1在血管內(nèi)皮細(xì)胞的表達(dá)增加[45]，上述都說明這些調(diào)控因子與乳汁免疫存在密切聯(lián)系。正如發(fā)現(xiàn)的，小鼠和豬乳腺對IgA漿母細(xì)胞的需求與α4β7和MAdCAM-1的結(jié)合密切相關(guān)[47,48]，但是在小鼠的研究中發(fā)現(xiàn)，限制α4β7和MAdCAM-1的結(jié)合并不影響乳汁中IgA的積累[49]，此外對于豬的研究發(fā)現(xiàn)，只有小部分IgA B淋巴細(xì)胞會在遷移至乳腺后表達(dá)α4β7[45]，說明雖然α4β7和MAdCAM-1結(jié)合對于調(diào)控“腸道-乳腺-SIgA軸”非常重要，但是有可能存在其他的調(diào)控機制。而且對小鼠的研究也發(fā)現(xiàn)α4β1偶聯(lián)蛋白及其地址素VCAM-1與淋巴細(xì)胞遷移至乳腺有關(guān)，因為當(dāng)使用VCAM-1的抗體血清處理小鼠后，發(fā)現(xiàn)其乳汁中的IgA水平下降，但這一假設(shè)并未在豬上驗證[49]。觀察妊娠母豬發(fā)現(xiàn)，妊娠早期乳腺中的IgA B淋巴細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞的數(shù)量很少，并且?guī)缀鯖]有CCR10/CCL28的表達(dá)。妊娠中期時，乳腺中T淋巴細(xì)胞數(shù)量增加，但是IgA、B淋巴細(xì)胞數(shù)量基本與妊娠早期一致。妊娠后期乳腺中T淋巴細(xì)胞的累積已經(jīng)達(dá)到峰值，但是IgA、B 淋巴細(xì)胞的數(shù)量和CCR10/CCR28的表達(dá)只出現(xiàn)一個緩慢增長。直到分娩時，IgA B淋巴細(xì)胞的數(shù)量達(dá)到峰值，而CCR10/CCR28的表達(dá)在哺乳期會持續(xù)增加。說明B 淋巴細(xì)胞的遷移對于乳腺的抗體分泌是重要的[45,46,50]。了解乳汁免疫機制和相關(guān)調(diào)控因子的作用，進(jìn)一步獲知機體對腸道病原免疫應(yīng)答是非常重要，了解妊娠期中免疫細(xì)胞遷移至乳腺的機制和調(diào)控對于調(diào)節(jié)乳汁免疫也是至關(guān)重要的。由上述可知，乳汁免疫調(diào)控的基礎(chǔ)研究對優(yōu)化疫苗設(shè)計方案、提高疫苗保護(hù)對仔豬是必不可少的。

3 PEDV乳汁黏膜免疫實驗研究

新生仔豬消化道內(nèi)蛋白水解酶活性低，并且由于母豬初乳中含有胰蛋白酶抑制劑(Trypsin in-hibitor,TI)，其消化道內(nèi)免疫球蛋白保存完整[51,52]，并且新生未成熟腸上皮細(xì)胞能固定腸腔中的免疫球蛋白，免疫球蛋白在固有層釋放后擴(kuò)散至腸淋巴系統(tǒng)，隨即進(jìn)行循環(huán)系統(tǒng)發(fā)揮免疫作用[53-55]，說明了乳汁免疫存在的可能性。實際生產(chǎn)中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，感染PEDV愈合良好的母豬對其仔豬有更好的保護(hù)[56]，我國也有部分規(guī)模化養(yǎng)殖場通過將PEDV致死仔豬的腸道處理后，通過飼喂妊娠后期母豬以實現(xiàn)保護(hù)其仔豬——即“反飼”的方法有效預(yù)防了PEDV感染。Poonsuk等[57]最近報道了乳汁免疫對PEDV感染仔豬的保護(hù)作用，通過對實驗組和對照組哺乳仔豬腹瀉情況，體溫測定，糞便帶毒情況以及死亡率等分析，證實乳汁免疫能有效保護(hù)仔豬預(yù)防PEDV感染。試驗中，實驗組(存在乳汁免疫)感染PEDV后發(fā)病率(29%)和死亡率(15%)都明顯低于對照組(不存在乳汁免疫)的發(fā)病率(100%)和死亡率(91%)。而且實驗組仔豬體溫變化比對照組更穩(wěn)定，對照組內(nèi)不僅體溫間距很大而且整體體溫低于正常體溫。通過對仔豬體重測定，實驗組仔豬生長速度明顯比對照組高，且組內(nèi)仔豬間差距不大。比較兩組仔豬糞便帶毒量發(fā)現(xiàn)，對照組在攻毒后的前5 d內(nèi)，糞便帶毒量比實驗組高，其余時間沒有區(qū)別。同時美國明尼蘇達(dá)大學(xué)Song等[58]對感染PEDV母豬血清、初乳和乳汁中抗體類型和水平進(jìn)行了研究分析，發(fā)現(xiàn)感染PEDV的母豬血清、初乳和乳汁中都能檢測到流行性腹瀉病毒的特異性N蛋白、特異性S1蛋白和特異性S2蛋白抗體，并且比較還發(fā)現(xiàn)血清中抗體水平差異較小，且?guī)缀醪荒軝z測到流行性腹瀉病毒S1蛋白的特異性IgG抗體。雖然初乳和乳汁中抗體水平差異比血清更大，但是均能檢測到流行性腹瀉病毒的特異性N蛋白、S1蛋白和S2蛋白抗體且水平較高，分析比較還發(fā)現(xiàn)初乳和乳汁中含有的S1蛋白特異性IgG抗體水平都低于N蛋白和S2蛋白特異性IgG抗體水平，但是初乳和乳汁中的S1蛋白特異性IgA水平比它們都高。當(dāng)分別使用稀釋后的血清、初乳和乳汁中和PEDV后，能有效抑制PEDV感染單層非洲綠猴腎細(xì)胞，結(jié)合ELISA中和測定，發(fā)現(xiàn)初乳在1∶1 600或1∶3 200稀釋后依然能有效抑制50%的感染，部分樣品甚至需要1∶6 400稀釋。乳汁1∶800或1∶1 600稀釋后能抑制50%感染，然而血清只能1∶128或1∶256稀釋后能實現(xiàn)上述抑制并且其個體差異更大，這說明了初乳和乳汁有更高的PEDV中和活性。他們也對哺乳期間乳腺分泌物的平均中和抗體效價進(jìn)行了監(jiān)測，發(fā)現(xiàn)哺乳第1天的初乳的平均中和滴度最高(1∶3 220)，隨后發(fā)生減退，第3天下降至1∶1 000，直到第19天為1∶560。值得注意的是，雖然不同母豬的乳腺分泌物抗體水平下降不同，但是大多數(shù)母豬乳腺分泌物中抗體效價在哺乳第12天前后下降最明顯，這也許對于PEDV母豬疫苗的設(shè)計有指導(dǎo)價值。目前對于PEDV乳汁免疫的實驗研究正處于開始階段，但能確定乳汁免疫能提供哺乳仔豬預(yù)防PEDV感染，實現(xiàn)對其免疫保護(hù)。關(guān)于PEDV乳汁免疫的研究仍有很多空白，需要我們進(jìn)行探究。

4 影響PEDV乳汁黏膜免疫的因素

在生產(chǎn)和實驗中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)不同母豬乳汁免疫的保護(hù)情況存在差異，母豬個體差異以外還有很有因素會影響乳汁免疫的情況，乳汁免疫的影響因素也進(jìn)行了相關(guān)研究。

4.1胎次或母豬年齡 在美國的一個生產(chǎn)案例中，6 000只母豬在2013年首次感染PEDV，隨后進(jìn)行了兩次口服活疫苗接種。在第二次疫苗接種9周后，該豬場再次爆發(fā)了PEDV的感染流行，造成了大量的仔豬死亡，但經(jīng)過統(tǒng)計發(fā)現(xiàn)，不同產(chǎn)仔胎次的母豬其仔豬死亡率不同且有一定規(guī)律。初產(chǎn)母豬的仔豬死亡率最高(62%)，而隨胎次增加母豬的仔豬死亡率隨著胎次增多而降低[第二胎(37%)，第三胎(24%)，第四胎(20%)，第五胎(22%)，第六胎(17%)，第七胎(20%)，第八胎(21%)和第九胎(5%)]，并且在更高胎次的母豬，仔豬的死亡率仍在下降。因為初產(chǎn)母豬和經(jīng)產(chǎn)母豬乳腺中的淋巴細(xì)胞總體數(shù)量是不同的，即經(jīng)產(chǎn)母豬具有更多的乳腺組織，能比初產(chǎn)母豬累積更多的漿細(xì)胞[59-61]。 因此，初產(chǎn)母豬在乳腺分泌物中產(chǎn)生較高濃度的SIgA[62,63]。此外在對反芻動物乳汁免疫的研究中也發(fā)現(xiàn)，經(jīng)產(chǎn)母牛相比初產(chǎn)母牛的乳汁分泌物中有更高的抗體滴度[64]。當(dāng)然母豬的年齡也是造成這樣成果的因素，相比而言經(jīng)產(chǎn)母豬的年齡高于初產(chǎn)母豬，年紀(jì)更大的動物在PEDV感染時會產(chǎn)生一個更大的特異性B細(xì)胞記憶庫，對進(jìn)行第二次疫苗接種會產(chǎn)生更多的記憶應(yīng)答細(xì)胞，因此對仔豬產(chǎn)生更大的保護(hù)。目前仍需要更多的研究來探究胎次、母豬年齡或者二者共同影響乳汁免疫和隨后的仔豬保護(hù)。

4.2接種時妊娠階段及相關(guān)激素 動物在不同妊娠階段乳腺中淋巴細(xì)胞的情況是不同的，研究已發(fā)現(xiàn)在母豬妊娠80 d時乳腺中T淋巴細(xì)胞最高，為5個細(xì)胞單位/0.03 mm2(50倍)，而哺乳期下降到3個細(xì)胞單位/0.03 mm2(30倍)。但是，分泌IgA抗體的 B淋巴細(xì)胞在產(chǎn)后8 d時最高，為14個細(xì)胞單位/0.03 mm2(30倍)，并且在哺乳期中維持在大約11個細(xì)胞單位/0.26 mm2(30倍)[45,50]。并且發(fā)現(xiàn)母豬在妊娠末期以及整個哺乳期內(nèi)乳腺中MAdCAM-1表達(dá)隨著分泌整合素α4β7的B淋巴細(xì)胞數(shù)量增加而增加[45]。對小鼠的研究還發(fā)現(xiàn)妊娠末期及哺乳期中，SIgA漿細(xì)胞優(yōu)先從腸系膜淋巴結(jié)遷移到乳腺，而不是從外周淋巴結(jié)遷移[65]。上述結(jié)果表明，妊娠階段影響淋巴細(xì)胞的免疫應(yīng)答和遷移，因而影響乳汁免疫。此外不同妊娠階段母體體內(nèi)激素種類和水平是不同的，較早就報道切除卵巢的小鼠使用雌激素、黃體酮和催乳素能促進(jìn)來源于腸系膜淋巴結(jié)的IgA漿母細(xì)胞遷移至乳腺，說明妊娠相關(guān)激素會影響淋巴細(xì)胞從腸遷移至乳腺的過程[66]。發(fā)現(xiàn)豬乳腺上皮細(xì)胞催乳素受體密度和淋巴細(xì)胞在其乳腺中的積累量存在相關(guān)性[67]。從20世紀(jì)70年代以來部分激素調(diào)控淋巴細(xì)胞的遷移已經(jīng)完成了研究，但是仍有很多問題懸而未決。接種疫苗時母豬妊娠階段和相關(guān)激素對乳汁免疫影響現(xiàn)在還沒有準(zhǔn)確的研究或報道，但有理由相信其對乳汁免疫是存在影響的，不過需要更多實驗探索證明。

4.3接種劑量 疫苗接種劑量會直接影響體內(nèi)免疫應(yīng)答反應(yīng)，目前有實驗證明妊娠期間接種PEDV疫苗的劑量對小豬的乳汁免疫保護(hù)能產(chǎn)生影響[68]。在分別將高劑量組、低劑量組及對照組母豬口服接種PEDV活疫苗后，采用同等劑量的同株P(guān)EDV強毒感染三組母豬及所產(chǎn)仔豬，通過空斑實驗和熒光定量PCR分別檢測血清和乳汁病毒中和滴度和糞便中帶毒量。實驗發(fā)現(xiàn)高劑量組的仔豬獲得更好的保護(hù)，存活率為100%，而低劑量組仔豬存活率僅為63%，對照組仔豬全部死亡。而且可以發(fā)現(xiàn)高劑量組母豬血清中PEDV抗體比低劑量組母豬更早出現(xiàn)，且高劑量組母豬的乳汁在整個哺乳期都用很高的中和抗體滴度，而低劑量組則相對較低，直到母豬免疫后39 d時低劑量組乳汁的中和抗體滴度高于高劑量組約兩倍。最先檢測到對照組母豬糞便帶毒高于低劑量組和高劑量組，并且仔豬糞便帶毒情況同母豬的情況一致。目前需要更多實驗驗證及補充這一發(fā)現(xiàn)，對胎次不同的母豬其影響是否會不同也是值得探究的，并且這一發(fā)現(xiàn)對于涉及母體疫苗的研究也是有意義的。

5 總結(jié)

PEDV新發(fā)流行情況嚴(yán)重，已經(jīng)在世界各地造成巨大損失，乳汁黏膜免疫的新生仔豬保護(hù)力是有實驗和臨床證明的，但是實際生產(chǎn)中新生仔豬需要足夠的免疫乳汁來抵抗PEDV感染而獲得保護(hù)。目前的研究表明，初乳和成熟乳的IgA及其PEDV中和抗體滴度可能與PEDV的保護(hù)性免疫相關(guān)，此外還發(fā)現(xiàn)乳腺分泌物中充足的IgA和PEDV中和抗體滴的水平可能取決于病毒的劑量和在腸道表面復(fù)制的程度。然而，誘導(dǎo)和維持腸道-乳腺-SIgA軸的機制仍有很多尚未明白。并且在實際生產(chǎn)中有眾多因素可能會導(dǎo)致免疫應(yīng)答減弱，這些因素包括接種疫苗劑量，使用病毒株的免疫原性，母豬的年齡，接種疫苗時妊娠階段及動物性成熟狀態(tài)等。將需要更多的實驗探究和驗證，目前的發(fā)現(xiàn)，更多的實驗找出影響乳汁黏膜免疫因素，這將有可能改良妊娠母豬PEDV和其他腸道病原體的疫苗設(shè)計方案，全面提高豬群的免疫力，對養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展提供支持。

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[收稿2017-03-21 修回2017-06-06]

(編輯 許四平 劉格格)

10.3969/j.issn.1000-484X.2017.11.032

①本文為四川省科技支撐計劃(2014NZ0043)和四川省“十三五”育種攻關(guān)項目(2016NYZ0052)。

②同時就職于動物疫病與人類健康四川省重點實驗，成都 611130。

R392.7

A

1000-484X(2017)11-1744-06

許思遙(1993年-)，男，在讀碩士，主要從事動物傳染病病原分子生物學(xué)方面的研究。

及指導(dǎo)教師：朱 玲(1972年-)，女，博士，教授，主要從事動物傳染病病原分子生物學(xué)研究。