王 睿
(貴州省流通環(huán)節(jié)食品安全檢驗(yàn)中心,貴州貴陽(yáng) 550002)
分析食品安全檢測(cè)中重要有機(jī)有害化學(xué)物質(zhì)的殘留檢測(cè)技術(shù)
王 睿
(貴州省流通環(huán)節(jié)食品安全檢驗(yàn)中心,貴州貴陽(yáng) 550002)
針對(duì)食品安全檢測(cè)過(guò)程中的重要有機(jī)有害化學(xué)物質(zhì)殘留檢測(cè)技術(shù),以CLIA技術(shù)為例,在介紹技術(shù)原理和分類的基礎(chǔ)上,分別對(duì)該技術(shù)在生物毒素檢測(cè)和病原微生物檢測(cè)中的應(yīng)用進(jìn)行分析,以為提高食品安全檢測(cè)水平提供技術(shù)支撐。
食品安全;有害物質(zhì);檢測(cè)技術(shù);CLIA
食品安全是國(guó)際公共衛(wèi)生的重點(diǎn)問(wèn)題之一,目前各國(guó)正致力于采取有效措施保障食品安全,減少食源性疾病。在此期間,有機(jī)有害化學(xué)物質(zhì)殘留檢測(cè)技術(shù)具有不可替代的重要作用,是切實(shí)保證每一位消費(fèi)者健康的關(guān)鍵舉措。
CLIA(Chemiluminescence Immunoassay,化學(xué)發(fā)光免疫分析法)主要包含兩大系統(tǒng),即為免疫分析系統(tǒng)與化學(xué)發(fā)光分析系統(tǒng)。在CLIA中,免疫分析系統(tǒng)通過(guò)酶與化學(xué)發(fā)光物質(zhì),標(biāo)記被檢測(cè)物質(zhì)抗原與抗體,待二者通過(guò)結(jié)合形成免疫復(fù)合物之后,注入發(fā)光底物,此時(shí)氧化反應(yīng)會(huì)使注入的發(fā)光底物變成中間體,并以某種反應(yīng)達(dá)到相對(duì)穩(wěn)定的形態(tài),最后即可利用儀器檢測(cè)光強(qiáng)。檢測(cè)時(shí),由于標(biāo)記物濃度大小與光強(qiáng)有關(guān),二者成正比關(guān)系,因此在檢測(cè)后可根據(jù)數(shù)據(jù)得出待測(cè)物實(shí)際含量[1]。
按標(biāo)記物種類可將CLIA技術(shù)分成三種類型,即CLIA、cLELA和ECL。在這三種類型中,CLIA實(shí)質(zhì)上是在待測(cè)物體中直接注入化學(xué)發(fā)光劑,以此完成標(biāo)記和含量檢測(cè),目前常用標(biāo)記物為魯米諾類化學(xué)發(fā)光劑或吖啶酯類;cLELA主要以酶促反應(yīng)底物為發(fā)光劑實(shí)施后續(xù)操作。在具體的檢測(cè)過(guò)程中,常用的酶促反應(yīng)底物有堿性磷酸酶與HRP(Horseradish Peroxidase,辣根過(guò)氧化物酶)兩種;ECL主要利用電流引起的發(fā)光反應(yīng)進(jìn)行檢測(cè),其常用發(fā)光底物有TPA和三聯(lián)吡啶釕兩種。
3.1 生物毒素殘留檢測(cè)
生物毒素一般由動(dòng)植物及微生物生成,會(huì)使其他生物出現(xiàn)中毒現(xiàn)象。生物毒素自身有很多種類,如植物毒素、動(dòng)物毒素和海洋毒素等。生物吸入不同量的毒素,會(huì)表現(xiàn)出不同的影響差異。以麥角堿為例,如果麥角堿實(shí)際含量很低,則會(huì)發(fā)揮一定藥理功能,但如果含量超出限度,將產(chǎn)生極大的毒性。一些毒素,即使攝入微量,也會(huì)使人或其他生物出現(xiàn)中毒現(xiàn)象,甚至造成死亡,如河豚毒素等;還有一些毒素在攝入后會(huì)出現(xiàn)慢性中毒現(xiàn)象,雖然攝入后沒(méi)有及時(shí)出現(xiàn)反應(yīng),但當(dāng)攝入量達(dá)到限度后就會(huì)出現(xiàn)中毒現(xiàn)象,而此時(shí)的毒性往往已經(jīng)十分嚴(yán)重。由此可見,準(zhǔn)確檢出食物中的生物毒素殘留與含量對(duì)保障食品安全至關(guān)重要?,F(xiàn)階段較為常用的生物毒素檢測(cè)方法有生物法、化學(xué)法與免疫化學(xué)法等。以上檢測(cè)方法雖然各具優(yōu)勢(shì),但都存在一定不足。以化學(xué)法為例,雖然該方法檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確,但卻對(duì)檢測(cè)技術(shù)有著極高的要求,儀器設(shè)備也十分昂貴,操作流程復(fù)雜繁瑣,無(wú)法在現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)中應(yīng)用。而CLIA通過(guò)對(duì)高特異性反應(yīng)及化學(xué)發(fā)光技術(shù)的充分結(jié)合,可在檢測(cè)過(guò)程中發(fā)揮出高靈敏度、強(qiáng)特異性及寬線性范圍等優(yōu)勢(shì),而且還不會(huì)造成污染、檢測(cè)成果穩(wěn)定、儀器普遍價(jià)格低廉,正常條件下的檢測(cè)限可以達(dá)到ng/kg,適宜在生物毒素檢測(cè)過(guò)程中應(yīng)用[2]。
3.2 病原微生物殘留檢測(cè)
食品殘留微生物主要有細(xì)菌、真菌與病毒三種。目前針對(duì)以上微生物的檢測(cè),主要使用分子生物學(xué)法、免疫檢測(cè)技術(shù)、免疫磁珠法和基因芯片法,其中的分子生物學(xué)法又包含核酸探針?lè)ê蚉CR法。以上檢測(cè)方法雖然各具優(yōu)勢(shì),但都存在一定不足。以分子生物學(xué)法為例,若采用核酸探針?lè)ㄟM(jìn)行檢測(cè),則對(duì)每一種菌進(jìn)行檢測(cè)就要更換一次探針;若采用PCR法進(jìn)行檢測(cè),隨無(wú)需進(jìn)行換針等重復(fù)性機(jī)械操作,但存在容易污染等不足。因此,可在病原微生物檢測(cè)中利用CLIA技術(shù),現(xiàn)以豬肉、農(nóng)產(chǎn)品、牛奶和啤酒為例,其檢測(cè)的微生物主要包括大腸桿菌、沙門桿菌與乳酸菌三種。其中,豬肉中大腸桿菌的線性范圍為1.0×105~5.0×106cfu/ml,檢測(cè)限為8.5×104cfu/ml;農(nóng)產(chǎn)品中大腸桿菌的線性范圍為102~105cfu/mL;牛奶中大腸桿菌的線性范圍為105~106cfu/mL;牛奶中沙門桿菌的線性范圍為106~107cfu/mL;啤酒中乳酸菌的線性范圍為300~105cfu/ mL[3]。由此可以看出,CLIA技術(shù)憑借其良好的靈敏度與特異性,可滿足對(duì)殘留病原微生物的安全檢測(cè)需求。
CLIA技術(shù)作為具有一定代表性檢測(cè)重要有機(jī)有害化學(xué)物質(zhì)殘留檢測(cè)技術(shù),在抗體抗原與半抗原等的免疫檢測(cè)領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用,可以為食品安全檢測(cè)工作提供可靠的方法與手段。它不僅融合了眾多學(xué)科知識(shí),還與相關(guān)學(xué)科未來(lái)發(fā)展保持緊密的聯(lián)系,特別是材料科學(xué)與生物技術(shù)。為了更好適應(yīng)食品安全檢測(cè)發(fā)展需求,CLIA技術(shù)等主要有機(jī)有害化學(xué)物質(zhì)殘留檢測(cè)技術(shù)也需要進(jìn)行不斷的升級(jí)和完善。
[1] 吳俊,鄭翔,讓蔚清.QuEChERS方法在食品農(nóng)藥殘留檢測(cè)中的應(yīng)用前景[J].實(shí)用預(yù)防醫(yī)學(xué),2014,10(3):619-621.
[2] 吳晶,黃伶慧,王遠(yuǎn)航,等.微流控芯片電泳在食品安全與環(huán)境污染檢測(cè)中的應(yīng)用[J].分析測(cè)試學(xué)報(bào),2015,11(3):283-288.
[3] 邱云青,李鳳琴.化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)在食品有害因素檢測(cè)中的應(yīng)用[J].國(guó)外醫(yī)學(xué)(衛(wèi)生學(xué)分冊(cè)),2014,11(6):371-374.
Analysis of Residual Detection Technology for Important Organic Harmful Chemical Substances in Food Safety Inspection
Wang Rui
In this paper,CLIA technology is taken as an example.Based on the introduction of technical principle and classif i cation,this paper analyzes the technology of biodeoxin detection and pathogenic microorganism in the detection of important organic harmful chemical substances in food safety detection.Application analysis,in order to improve the level of food safety testing to provide technical support.
food safety;harmful substances;detection technology;CLIA
TS207.6
A
1003–6490(2017)03–0058–01
2017–02–13
王睿(1987—),男,貴州貴陽(yáng)人,助理工程師,主要研究方向?yàn)槭称窓z測(cè)、農(nóng)藥及新化學(xué)物質(zhì)檢測(cè)。