王菲 胡昕 孫慧 黃毅 齊曼古力·吾守爾

ADAM33基因單核苷酸多態(tài)性與慢性阻塞性肺病的相關(guān)研究進(jìn)展

王菲 胡昕 孫慧 黃毅 齊曼古力·吾守爾

慢性阻塞性肺病(Chronic Obstructive Pulmonary Disease,簡(jiǎn)稱(chēng)慢阻肺)被稱(chēng)作是具有進(jìn)行性、完全不可逆性的氣流受限為特征的肺部疾病，進(jìn)一步可發(fā)展為肺源性心臟病、呼吸衰竭。2014年慢性阻塞性肺病全球策略一文中提出，預(yù)計(jì)到2020年，慢性阻塞性肺病將升居至全球死亡原因的第3位[1]。為了預(yù)防和控制慢阻肺的發(fā)生和發(fā)展，識(shí)別危險(xiǎn)因素、弄清相關(guān)發(fā)病機(jī)理是關(guān)鍵所在。慢阻肺與基因遺傳因素相關(guān)越來(lái)越被研究者追捧，尤其是單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide poly-morphisms,SNPs)的發(fā)現(xiàn)，其定義為在基因組中由于單個(gè)核苷酸的變異，使得DNA序列呈現(xiàn)多態(tài)性。這種現(xiàn)象使得我們對(duì)遺傳因素方面有了更深入了解?；騍NPs成為當(dāng)今各位研究者們爭(zhēng)相研究的熱點(diǎn)之一。首次提出的是Gosman等[2]人，于2006年指出ADAM33基因SNPs通過(guò)影響氣道的高反應(yīng)性、炎癥從而參與慢阻肺病理生理過(guò)程?，F(xiàn)就ADAM33基因SNPs與慢阻肺的相關(guān)進(jìn)展予以綜述。

DAM33的基因結(jié)構(gòu)及其功能

一、ADAM33基因及結(jié)構(gòu)

20世紀(jì)90年代ADAM家族作為一類(lèi)I型跨膜蛋白家族被研究者發(fā)現(xiàn)[3]，它們?cè)诓煌?xì)胞表面均有鑲嵌，承擔(dān)著多種功能。目前研究發(fā)現(xiàn)，關(guān)于A(yíng)DAM家族已富含30多種,ADAM33只是作為ADAM家族的一分子，ADAM33基因位于第20號(hào)染色體短臂13號(hào)位(20p13)(A區(qū))，長(zhǎng)約14 kb(B區(qū)),涵蓋22個(gè)外顯子和21個(gè)內(nèi)含子(C區(qū))，其編碼的蛋白質(zhì)約為813個(gè)氨基酸[4]。

二、ADAM33的功能

目前對(duì)于A(yíng)DAM33功能尚不能完全明了，其編碼約813個(gè)氨基酸，蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與其他ADAM家族結(jié)構(gòu)大致相同。活化的ADAM蛋白水解功能甚是強(qiáng)大，能夠消化大多數(shù)蛋白質(zhì)。對(duì)于A(yíng)DAM33基因先前已有相關(guān)研究，于2002年Van Eerdewegh等[3]對(duì)高加索種族進(jìn)行全基因檢測(cè),發(fā)現(xiàn)了人類(lèi)染色體20p13，其與哮喘密切相關(guān),同時(shí)對(duì)該區(qū)域基因進(jìn)行連鎖分析，包括該區(qū)23個(gè)基因，共135種基因SNPs。發(fā)現(xiàn)位于A(yíng)DAM33基因上的14種基因SNPs與 BHR 和哮喘密切相關(guān)。相關(guān)研究隨即而生，國(guó)內(nèi)外很多研究者都認(rèn)為ADAM33基因是通過(guò)引起氣道成纖維細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞功能異常而導(dǎo)致氣道重塑和氣道高反應(yīng)性的發(fā)生[5]。目前大量ADAM33 的拼接體已被識(shí)別,一些拼接體導(dǎo)致肌細(xì)胞生成,從而表明ADAM33參與誘導(dǎo)氣道平滑肌增生和肥大[6]。目前對(duì)于A(yíng)DAM33的功能研究還處于初級(jí)階段，暫時(shí)發(fā)現(xiàn)其生理功能分別為傳導(dǎo)信號(hào)，激活細(xì)胞增殖，分解細(xì)胞外基質(zhì)，增加成纖維細(xì)胞移動(dòng)度。

ADAM33 基因表達(dá)和調(diào)節(jié)

一、ADAM33基因的表達(dá)

研究發(fā)現(xiàn)人類(lèi)ADAM33基因于人體中廣泛表達(dá)，在大腦、心臟、腎臟、肺、睪丸等組織中高表達(dá)，但Umland等[6]研究指出ADAM33的mRNA表達(dá)具有一定的組織特異性，主要表達(dá)于間質(zhì)細(xì)胞起源平滑肌細(xì)胞、成纖維細(xì)胞和肌纖維細(xì)胞，而在支氣管上皮細(xì)胞、T細(xì)胞或其他免疫細(xì)胞中表達(dá)較少，在胸腺和淋巴結(jié)中也有低表達(dá)。然而一些研究表明ADAM33 定植于上皮細(xì)胞[7]。Dijkstra等[8]用免疫組織學(xué)抗體方法對(duì)ADAMs家族不同成員在人類(lèi)肺組織的表達(dá)情況進(jìn)行相關(guān)研究,得出ADAM33表達(dá)于肺組織中的基底上皮細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞，而且參與炎癥介質(zhì)、生長(zhǎng)因子釋放，因此進(jìn)一步提出ADAM家族可能在氣道防御和保護(hù)性修復(fù)中起重要作用。所有ADAMs均表達(dá)在支氣管上皮,而他們?cè)诨缀晚敹瞬糠种g有不同的分布。主要和強(qiáng)烈表達(dá)于支氣管上皮基底細(xì)胞的只有ADAM33一員。此外ADAM33也極高表達(dá)于血管內(nèi)皮細(xì)胞,ADAM的其他成員為低表達(dá),這反映了ADAM33可能參與炎癥細(xì)胞(特別是嗜酸性粒細(xì)胞)的激活、粘附、溢出等及血管生成。

二、ADAM33基因的調(diào)節(jié)

先前有相關(guān)研究表明啟動(dòng)子中CpG島對(duì)調(diào)節(jié)ADAM33表達(dá)有重要作用；ADAM33上位于內(nèi)含子BC5,末端SNP、BC+1可影響轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)元件；作為炎性介質(zhì)的干擾素y以依賴(lài)劑量、時(shí)間的方式減少ADAM33基因表達(dá)mRNA；1,25-(OH)：D3顯著下調(diào)氣道平滑肌細(xì)胞被動(dòng)致敏后的ADAM33蛋白表達(dá)和mRNA水平；Th2型細(xì)胞因子中 IL-4、IL-13增加ADAM33 mRNA表達(dá)。近年來(lái),對(duì)于影響 ADAM33表達(dá)的因素并未停止步伐。Yang等[9]研究發(fā)現(xiàn),轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子( TGF-β)以依賴(lài)濃度和時(shí)間于人類(lèi)呼吸道成纖維細(xì)胞中減少ADAM33基因表達(dá)mRNA,這種抑制作用是通過(guò)改變?nèi)旧w的結(jié)構(gòu),而不是和上皮細(xì)胞一樣通過(guò) DNA甲基化導(dǎo)致基因沉默來(lái)完成的。

ADAM33基因SNPs與慢阻肺關(guān)系的研究

隨著近期研究發(fā)現(xiàn)，ADAM33在多種疾病表型都存在影響，在慢性氣道疾病中，對(duì)于A(yíng)DAM33基因的認(rèn)識(shí)不再僅僅局限在哮喘。Gosman等[2]進(jìn)行ADAM33基因SNPs與氣道高反應(yīng)性的嚴(yán)重程度和在慢阻肺氣道炎癥是否具有相關(guān)性研究,于2006年首次指出ADAM33基因?qū)τ跉獾栏叻磻?yīng)性、氣道炎癥存在影響，從而在慢阻肺病理生理過(guò)程中起到一定作用；但ADAM33基因SNPs是如何參與及影響慢阻肺的發(fā)病機(jī)制與病情進(jìn)展，仍尚未完全明了。目前更傾向認(rèn)為是通過(guò)除氣道重塑之外的炎癥過(guò)程影響氣道高反應(yīng)性。

一、ADAM33基因SNPs與慢阻肺易感性

近幾年國(guó)內(nèi)外學(xué)者將熱點(diǎn)轉(zhuǎn)移至研究探索不同民族、不同地域、不同易感基因位點(diǎn)，如秦等[10]研究得出在中國(guó)華北地區(qū)漢族人群中，ADAM33基因SNPs與慢阻肺的易感性有關(guān)。國(guó)內(nèi)外學(xué)者不僅對(duì)不同地域進(jìn)行研究，并且對(duì)不同民族進(jìn)行研究,如Xiao等[11]于我國(guó)藏族人群中對(duì)于A(yíng)DAM33基因中8個(gè)位點(diǎn)進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)T2位點(diǎn)與慢阻肺明顯相關(guān)，其中G等位基因是慢阻肺發(fā)病的危險(xiǎn)因素。Tan等[12]發(fā)現(xiàn)中國(guó)蒙古族人群的ADAM33基因位點(diǎn)(S2、S1、Q-1、F+1)SNPs與慢阻肺易感性相關(guān)。李雙等[13]研究得出新疆維吾爾族人群慢阻肺患者ADAM33基因T2位點(diǎn)中AG+AA基因型比GG基因型，在降低慢阻肺發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)更具優(yōu)勢(shì)。轉(zhuǎn)向國(guó)外，Shah[14]等在印度克什米爾人中對(duì)78名慢阻肺患者與77名健康者進(jìn)行慢阻肺與ADAM33基因T1,T2,Q1位點(diǎn)基因型的SNPs研究發(fā)現(xiàn)，基因型T1GG,T2GG,Q1AG，病例組高于對(duì)照組，而T1AA,T2AA,Q1AA,Q1GG對(duì)照組高于病例組。Kola[15]在印度海德拉巴政府胸科醫(yī)院，關(guān)于患慢阻肺危險(xiǎn)性與ADAM33基因型S1，S2的SNPs關(guān)系相關(guān)研究中通過(guò)對(duì)150名慢阻肺患者及200名健康患者對(duì)比得出結(jié)論，在印度ADAM33基因型S1，S2多態(tài)性是在慢阻肺病因?qū)W遺傳因素起主要作用。對(duì)比各項(xiàng)研究結(jié)果，一些研究者歸納分析發(fā)現(xiàn)，不同民族、不同國(guó)家、不同地域易感等位基因不盡相同，如Zhang等[16]通過(guò)Meta分析，對(duì)不限制語(yǔ)言檢索出的不同民族、地域的研究結(jié)果進(jìn)行歸納分析，結(jié)果顯示ADAM33基因S1多態(tài)性位點(diǎn)是中國(guó)吸煙人群在遺傳方面發(fā)生慢阻肺危險(xiǎn)因素之一，Q-1位點(diǎn)多態(tài)性是所有人群在遺傳方面發(fā)生慢阻肺危險(xiǎn)因素之一；同期在A(yíng)ierken H[17]的Meta分析中也對(duì)不同民族、地域的相關(guān)研究進(jìn)行分析，選取2005-2012年符合要求10篇論著，結(jié)果顯示ADAM33基因中T1 (AGvsAA, GGvsAA)，S1(GG + AGvsAA) 在亞洲人群中與慢阻肺危險(xiǎn)性有關(guān)，而在白種人中不相關(guān)。S2 與任何人種都無(wú)關(guān)。Zhou D[18]通過(guò)Meta分析對(duì)5篇關(guān)于白種人與8篇關(guān)于亞洲人的13個(gè)研究結(jié)果分別進(jìn)行了合并，得出與亞洲人發(fā)生慢阻肺危險(xiǎn)性相關(guān)的基因有T1，T2，S1，F(xiàn)+1，Q-1；與歐洲人發(fā)生慢阻肺危險(xiǎn)性相關(guān)的基因有T1，T2，S1，F(xiàn)+1，Q-1，ST+5。Yan等[19]通過(guò)收集2014年10月12日以前的Meta分析和系統(tǒng)回顧關(guān)于A(yíng)DAM33 基因位點(diǎn)多態(tài)性與發(fā)生慢阻肺危險(xiǎn)性相關(guān)的陽(yáng)性結(jié)果，對(duì)其進(jìn)行假陽(yáng)性報(bào)告概率分析。得出結(jié)論，ADAM33rs612709 (病例組+ 對(duì)照組:1341 + 3359)降低慢阻肺發(fā)生的危險(xiǎn)性。盡管ADAM33基因的SNPs與慢阻肺存在相關(guān)性得到很多學(xué)者研究認(rèn)可,但也有研究者得出不同的結(jié)論。Pabst等[20]研究發(fā)現(xiàn)德國(guó)人ADAM33基因 F+ 1、S2的SNPs在慢阻肺患者和健康者之間的分布無(wú)顯著差異,對(duì)疾病發(fā)展過(guò)程也沒(méi)有影響。Guo等[21]對(duì)中國(guó)漢族人群的331例慢阻肺患者和213名健康人46個(gè)基因的97個(gè)位點(diǎn)進(jìn)行研究,其中包括ADAM33基因 T1、T2位點(diǎn),得出ADAM33基因T1、T2 位點(diǎn)多態(tài)性與中國(guó)漢族人群慢阻肺病發(fā)生無(wú)明顯相關(guān)性。羅雪梅等[22]通過(guò)Meta分析對(duì)不同地域、國(guó)家中5個(gè)種族人群的7個(gè)研究結(jié)果進(jìn)行了整合，對(duì)ADAM33基因的3個(gè)位點(diǎn)(T1、Q-1和F+1)的SNPs進(jìn)行基因分型和關(guān)聯(lián)性分析，得出，ADAM33基因的T1、Q-1和F+1位點(diǎn)的SNPs與慢阻肺易感性間并不相關(guān)性。

二、ADAM33與肺功能及慢阻肺的關(guān)系

近年來(lái)研究者發(fā)現(xiàn)ADAM33基因SNPs與慢阻肺患者的肺功能下降也有關(guān)聯(lián)。2005年Van Diemen等[23]利用既往的數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)1390個(gè)樣本進(jìn)行時(shí)長(zhǎng)為25年的群體性關(guān)聯(lián)研究，首次提出ADAM33基因SNPs與慢阻肺及肺功能下降有關(guān)聯(lián)。隨即有相關(guān)研究提出，在A(yíng)DAM33基因SNPs與吸煙的慢阻肺患者及肺功能通氣較低有相關(guān)：Ayman等[24]通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)埃及人群中ADAM33基因S1、Q1基因型為GG的吸煙的慢阻肺患者中肺功能下降明顯。張等[25]也對(duì)ADAM33基因SNPs與慢阻肺患者的肺功能進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn) ADAM33基因T1位點(diǎn)的GG基因型、T2位點(diǎn)的 GG 基因型較野生基因FEV1% 預(yù)測(cè)值以及TLC%預(yù)計(jì)值顯著降低。同時(shí)得出細(xì)胞外基質(zhì)可被金屬蛋白酶分解導(dǎo)致肺泡結(jié)構(gòu)被破壞，從而進(jìn)一步使得氣道氣流受限和肺彌散功能下降。近幾年研究進(jìn)一步表明ADAM33基因SNPs與患者肺功能下降有一定關(guān)聯(lián)，說(shuō)明ADAM33基因SNPs與氣道結(jié)構(gòu)、功能改變和慢阻肺的發(fā)生相關(guān)。當(dāng)然也有研究者得到陰性結(jié)果，如Van Diemen 等[26]在研究中并未發(fā)現(xiàn)ADAM33基因SNPs與慢阻肺患者的肺功能水平相關(guān)。李雙等[13]研究ADAM33基因T2位點(diǎn)不同基因型與新疆維吾爾族人群慢阻肺患者肺功能的關(guān)系，得出雖然T2位點(diǎn)GG基因型較AG+AA基因型更具易感性，但是將其FEV1%預(yù)計(jì)值、FEV1/FVC的進(jìn)行比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。目前ADAM33基因SNPs與慢阻肺患者及肺功能的關(guān)系仍需進(jìn)一步探索。

三、ADAM33表達(dá)與慢阻肺的嚴(yán)重程度

2007年Gosman等[2]研究荷蘭111例慢阻肺患者ADAM33基因上的8個(gè)位點(diǎn)基因分型，其中患者ST+5位點(diǎn)基因型為AA比基因型為GG的患者有更嚴(yán)重的氣道高反應(yīng)性及炎癥反應(yīng)。但國(guó)外研究者也對(duì)ADAM33基因與慢阻肺嚴(yán)重程度的關(guān)聯(lián)性提出了異議，2010年P(guān)abst等[20]對(duì)德國(guó)人群研究，發(fā)現(xiàn)ADAM33基因F+1和S2位點(diǎn)SNPs與慢阻肺及其嚴(yán)重程度沒(méi)有關(guān)聯(lián)。近幾年秦睿君等[10]在中國(guó)華北地區(qū)漢族人群中,并未發(fā)現(xiàn)ADAM33基因S1、S2位點(diǎn)與慢阻肺病嚴(yán)重程度有關(guān)。目前關(guān)于慢阻肺病嚴(yán)重程度與ADAM33基因多態(tài)性的表達(dá)的研究資料比較少，此處值得我們進(jìn)一步深究原因。

結(jié) 論

ADAM33與慢阻肺的研究是近十年的研究熱點(diǎn),且由于地理環(huán)境、地域、種族、樣本選取等的差異,研究結(jié)果也存在差異。當(dāng)然目前研究仍只是在較淺水平，還需更多的關(guān)于基因位點(diǎn)、種族、地域上研究ADAM33與慢阻肺相關(guān)性，對(duì)于A(yíng)DAM33與慢阻肺其肺功能改變及疾病嚴(yán)重程度是否相關(guān)，仍存在很多問(wèn)題尚未解決，以及在A(yíng)DAM33 基因變異怎樣導(dǎo)致慢阻肺發(fā)病的機(jī)制上進(jìn)行更多、更深入的研究與投入,只有這方面研究更加成熟才能夠?yàn)閺幕蛩綖橹委熉璺翁峁┬碌乃悸放c方向。

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